治傷散的薄層色譜鑒別

陳曉燕，陳衛(wèi)紅

(1.長沙市第三醫(yī)院，湖南 長沙 410015;2.湖南中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，湖南 長沙 410005)

治傷散是由土鱉蟲、丹參、黃柏、冰片等13味中藥制成的制劑，具有活血祛淤、消腫止痛等功效，用于跌打損傷、淤血腫痛、軟組織損傷、閉合性骨折經(jīng)手法復位后的輔助治療。為了控制該制劑質量，保證臨床用藥安全，本文采用薄層層析法對該制劑中丹參、冰片及黃柏進行了鑒別，方法簡便可靠，可用于該制劑的定性鑒別。

1 試藥與儀器

1.1 儀器 PEPROSTAR3紫外檢測儀(島津，日本);KQ－300DE超聲清洗器(常州諾基儀器有限公司，常州);電子天平(Startorius，德國)。

1.2 試藥 丹參酮ⅡA對照品(批號:110766－200417，供鑒別用);丹參對照藥材(批號:120923－200610，供鑒別用);冰片對照品(批號:0743－8902，供鑒別用);黃柏對照藥材(批號:0937－200004，供含量測定用);鹽酸小檗堿對照品(批號:110713－200910，供含量測定用)，以上對照藥材及對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供;硅膠G(青島海洋化工廠，薄層色譜用);其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 丹參的薄層鑒別

2.1.1 供試品溶液的制備［1～3］取本品 10g，加乙醚 40mL，振搖提取10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對照藥材溶液的制備 取丹參對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。

2.1.3 陰性對照藥材溶液的制備 按處方稱取缺丹參的其他藥材，制成缺丹參的陰性對照樣品，同法制備缺丹參的陰性對照溶液。

2.1.4 對照品溶液的制備 取丹參酮ⅡA對照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作為對照品溶液。

2.1.5 鑒別方法 照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述供試品溶液、陰性對照溶液與對照藥材溶液各7μL、對照品溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)－乙酸乙酯(18∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，缺丹參的陰性對照無干擾(見圖1)。

2.2 冰片的薄層鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備 取本品0.5 g，加乙酸乙酯5mL，超聲處理10min，濾過，濾液作為供試品溶液。

圖1 丹參的薄層鑒別圖譜

2.2.2 對照品溶液的制備 取冰片對照品，加乙酸乙酯制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.3 陰性對照藥材溶液的制備 按處方稱取缺冰片的其他藥材，制成缺冰片的陰性對照樣品，同法制成缺冰片的陰性對照溶液。

2.2.4 鑒別方法 照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述三種溶液各4μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－丙酮(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，缺冰片的陰性對照無干擾(見圖2)。

圖2 冰片的薄層鑒別圖譜

2.3 黃柏的薄層鑒別

2.3.1 供試品溶液的制備 取本品1.5 g，加甲醇10mL，振搖提取10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為供試品溶液。

2.3.2 對照藥材溶液的制備 取黃柏對照藥材0.1 g，同法制成對照藥材溶液。

2.3.3 對照品溶液的制備 取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每毫升含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

2.3.4 陰性對照藥材溶液的制備 按處方稱取缺黃柏的其他藥材，制成缺黃柏的陰性對照樣品，同法制成缺黃柏陰性對照溶液。

2.3.5 鑒別方法 照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述供試品溶液及陰性對照溶液各2μL、對照藥材及對照品溶液各1μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－乙酸乙酯－異丙醇－甲醇－水(6∶3∶2∶1.5∶0.3)為展開劑(置雙槽展開缸中，另一槽加等體積的濃氨試液，預平衡15min)，展開，取出，晾干，置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性無干擾(圖3)。

圖3 黃柏的薄層鑒別圖譜

3 討論

3.1 丹參中含有菲醌類化合物:如丹參酮Ⅰ(TanshinoneⅠ)、丹參酮ⅡA(TanshinoneⅡA)、丹參酮ⅢB(TanshinoneⅢB)、隱丹參酮(Cryptotanshinone)等;合成冰片主要含龍腦(Borneol)59.78% ～58.93%，異龍腦(Isobornrol)38.98% ～37.52%;黃柏含有小檗堿等生物堿類成分［4～7］。根據(jù)各藥味的成分，設計薄層色譜鑒別方法，結果表明方法可行。

3.2 在規(guī)定的薄層色譜條件下，對丹參、冰片、黃柏的薄層色譜鑒別方法分別進行了溫、濕度條件的影響試驗，結果薄層色譜均斑點清晰，分離度好，表明溫濕度條件對薄層色譜鑒別效果影響可忽略。

3.3 此外對治傷散中其他藥材如大黃、白芍、西紅花等的薄層鑒別方法進行了研究，因薄層色譜效果不理想，暫未列入質量標準。

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