校本課程綠蘿的組織培養實驗

摘 要：以綠蘿葉片為外植體進行組織培養實驗，在不同濃度的激素誘導培養基條件下可以脫分化形成愈傷組織，再分化形成完整的植株個體。通過本實驗使學生體驗組織培養的過程，從中獲得知識應用，并從實踐中獲得成功的快樂。

關鍵詞：綠蘿；組織培養；校本課程

綠蘿（Eipremnum aureum）為天南星科綠蘿屬植物，原產印尼所羅群島。蔓性多年生草本，耐陰，以攀緣莖附于它物上，莖節有氣生根。葉廣橢圓形，蠟質，暗綠色，有的鑲嵌著金黃色不規則斑點或條紋。枝條懸掛下垂，常用作柱式或掛壁式栽培。北方冬天萬物凋零，綠蘿葉綠生輝，是一種室內觀賞價值很高的觀葉植物，因此深受人們喜愛。

綠蘿通常以無性扦插繁殖為主，繁殖系數較低。選用綠蘿的幼嫩葉片作為外植體，在不同濃度的激素誘導培養基條件下可以脫

分化形成愈傷組織，再分化形成完整的植株個體。通過本實驗使學生體驗組織培養的過程，從中獲得知識應用，并從實踐中獲得成功的快樂。

【目的要求】

體驗用綠蘿葉片做植物組織培養的方法和過程。

【材料用具】

幼嫩的綠蘿葉片

三角瓶，瓊脂，pH計，氫氧化鈉，鹽酸，稱量紙，牛皮紙，棉線，高壓滅菌鍋，計時器，長鑷子，解剖刀，剪刀，無菌水，超凈臺，體積分數為75%的酒精溶液，質量濃度為2%的次氯酸鈉溶液，標簽，記號筆， MS以及MS培養基，質量濃度分別為2.0 mg/L和1.0 mg/L

的6-BA（6-芐基嘌呤）溶液，質量濃度分別為0.5 mg/L、0.2 mg/L和0.1 mg/L的萘乙酸（NAA）溶液，質量濃度為0.5 mg/L和0.1 mg/L的2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）溶液。

【方法步驟】

一、培養基滅菌

將配好的培養基加入瓊脂加熱溶解，調至pH5.8，趁熱分裝于100 mL三角燒瓶中，每瓶約20 mL。待培養基冷卻凝固后，用一層稱量紙和一層牛皮紙包扎瓶口，并用棉線扎牢，然后在高壓滅菌鍋中121℃（1 kg/cm2）下滅菌20 min。取出三角燒瓶放在臺子上，冷卻后備用。接種操作所需的一切用具（如長鑷子、解剖刀、剪刀等）及滅菌水，需同時滅菌。

二、材料的消毒處理

剪取幼嫩的葉，用流水沖洗 30min以上。在超凈臺內用體積分數為75%的酒精處理30 s；再用質量濃度為2%的次氯酸鈉溶液滅菌10 min，最后用無菌水刷洗3～4次。用長鑷子將它接種在誘導

培養基（MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+2，4-D 0.5mg/L）上，注意圓片的切口朝向培養基，每瓶接種2～4片，接種后扎好瓶口，每個學生接種1瓶，貼上標簽，用記號筆寫清楚姓名、時間、材料等等。

三、誘導產生愈傷組織

將已接入植物組織的三角燒瓶，培養在25℃溫室中，每星期檢查1～2次，剔除材料已被雜菌污染的三角燒瓶，3～4周后產生愈傷組織。

四、愈傷組織的再分化

選取愈傷組織生長良好的三角燒瓶，用解剖刀將愈傷組織切下，并3等分，轉移到含有不同濃度激素的試驗培養基1（MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最適合誘導愈傷組織增殖）、2（MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2，4-D 0.1 mg/L最適合誘導產生叢生芽）、

3（1/2 MS+NAA 0.1 mg/L最適合愈傷組織生根）瓶中，每瓶放1～2塊，仍培養在25℃溫室中，光照時間10～12小時/天，每周1～2次觀察不同處理的三角燒瓶中。

五、觀察實驗現象記錄實驗結果

討論：

（1）對于同種個體，通過組織培養的綠蘿和在自然條件下繁育的綠蘿性狀是否一樣？為什么？

（2）在組織培養的過程中，哪些過程容易帶來實驗失敗？為什么？

（3）在組織培養的過程中，為什么需要光照條件？

參考文獻：

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[2]樊銳鋒，胡寶忠.小葉綠蘿的組織培養技術研究.北方園藝，2004（6）：76-78.

[3]陳廣玉.綠蘿的組織培養及快速繁殖的研究.北京農業，2011（1）：16-17.

[4]郭英，梁國魯.小葉綠蘿同源多倍體誘導研究初報.西南園藝，2002（4）：1-3.

（作者單位 陜西省西安市第四十二中學）