E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的意義

熊中堂 江慶萍 彭娟 熊漢真

[摘要] 目的 探討E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中的表達(dá)及在其發(fā)生發(fā)展中的意義。 方法 采用免疫組化方法檢測(cè)子宮頸癌組織中E-cadherin和P120ctn的表達(dá)情況，以正常子宮頸黏膜及子宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）黏膜作為對(duì)照。 結(jié)果 E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中的表達(dá)下調(diào)率高于二者在正常子宮頸黏膜及CIN黏膜中的表達(dá)下調(diào)率；E-cadherin和P120ctn在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮頸癌中的表達(dá)下調(diào)率高于二者在不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮頸癌中的表達(dá)下調(diào)率；E-cadherin和P120ctn在浸及深肌層的子宮頸癌中表達(dá)下調(diào)率高于二者在未浸及深肌層的子宮頸癌中的表達(dá)下調(diào)率。 結(jié)論 E-cadherin和P120ctn表達(dá)下調(diào)和子宮頸癌發(fā)生有關(guān)；E-cadherin和P120ctn表達(dá)下調(diào)促進(jìn)子宮頸癌的侵襲與轉(zhuǎn)移。

[關(guān)鍵詞] 子宮頸癌；E-cadherin；P120ctn；免疫組化

[中圖分類號(hào)] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2012）01-092-02

The Significance of E-cadherin and P120ctn Protein in the Tumorigenesis and Development of Cervical Carcinoma

XIONG Zhongtang JIANG Qingping PENG Juan XIONG Hanzhen

Department of Pathology, the Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510150, China

[Abstract] Objective To investigate the expression ofE-cadherin and P120ctn protein in cervical carcinoma and its significance in the tumorigenesis and development of cervical carcinoma. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of E-cadherin and P120ctn protein in normal cervical epithelia, CIN cervical epithelia and cervical carcinoma. Results The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctn in cervical carcinoma was higher than in normal cervical epithelia and CIN cervical epithelia; The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctnin cervical carcinoma with lymph node metastases was higher than those wich without lymph node metastases; The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctnin cervical carcinoma that invasive outer cervix was higher than those which invasive inter cervix. Conclusion The down-regulation expression of E-cadherin and P120ctn may promote the tumorigenesis and development of cervical carcinoma; The down -regulation expression of E-cadherin and P120ctn may promote the invasion and metastasis of cervical carcinoma.

[Key words] Cervical carcinoma; E-cardherin; P120ctn; Immunohistochemistry

1 資料與方法

1.1臨床資料

收集廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院病理科2008~2011年存檔的子宮頸癌標(biāo)本58例和CIN黏膜40例，并與39例正常的子宮頸黏膜做對(duì)照。子宮頸癌中，年齡27～81歲，中位年齡48歲；高-中分化鱗癌13例，低-未分化鱗癌45例；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例，不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例。所有子宮頸癌患者手術(shù)前均未接受過(guò)放化療及其它針對(duì)腫瘤的治療。

1.2 方法

鼠抗人E-cadherin單克隆抗體（即用型）購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)公司；鼠抗P120ctn單克隆抗體（濃縮型）及Max Vision試劑盒均購(gòu)自福州邁新公司。

所有標(biāo)本均用4%的中性甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片厚4 μm，行HE和免疫組化染色。免疫組織化學(xué)標(biāo)記采用Max Vision二步法，高溫高壓抗壓修復(fù)，DAB顯色。

1.3 結(jié)果

E-cadherin及P120ctn蛋白陽(yáng)性為鱗狀上皮細(xì)胞膜線性棕黃色顆粒沉著，根據(jù)著色強(qiáng)度及顯色細(xì)胞比例將染色結(jié)果分-，+，++和+++級(jí)：① 按切片中細(xì)胞顯色有無(wú)及深淺評(píng)分：無(wú)顯色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；② 根據(jù)顯色細(xì)胞的比例計(jì)分：<25%為0分，20%～50%為1分，50%～75%為2分，>75%為3分。每例結(jié)果的積分=（1）×（2）。按積分高低分為：0分為陰性(-)，1~3分為弱陽(yáng)性（+），4~6分為中等陽(yáng)性（++），7~9分為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和等級(jí)相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 E-cadherin和P120ctn的表達(dá)情況

在正常子宮頸黏膜組織中，E-cadherin和P120ctn均呈連續(xù)線性定位與上皮細(xì)胞膜，低表達(dá)率分別為5.23%、2.56%；CIN病理中二者的表達(dá)定位與在正常黏膜中的定位模式相同，呈線性定位于細(xì)胞膜，低表達(dá)率均為2.50%；在子宮頸癌中，E-cadherin和P120ctn低表達(dá)率分別為63.79%、60.34%。E-cadherin呈線性定位于細(xì)胞膜，但P120ctn有47.37%的病例異位表達(dá)于細(xì)胞漿。兩兩比較發(fā)現(xiàn)，E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中的低表達(dá)率高于二者在正常子宮頸黏膜及CIN中的低表達(dá)率，二者在正常和CIN中的低表達(dá)率之間無(wú)明顯差別。

2.2 E-cadherin和P120ctn蛋白表達(dá)與子宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系

分析E-cadherin和P120ctn表達(dá)與臨床病理特征發(fā)現(xiàn)，E-cadherin在年齡大于50歲的患者中的低表達(dá)率高于在年齡小于或等于50歲中的低表達(dá)率，P120ctn的表達(dá)情況與年齡無(wú)關(guān)。E-cadherin和P120ctn在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮頸癌中的低表達(dá)率高于在不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮頸癌中的低表達(dá)率。本研究還發(fā)現(xiàn)E-cadherin和P120ctn表達(dá)和腫瘤侵襲深度有關(guān)，侵襲深度越深低表達(dá)率越高。E-cadherin和P120ctn表達(dá)與腫瘤的分化無(wú)關(guān)。

2.3 E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌中表達(dá)的相關(guān)性

在子宮頸癌中，E-cadherin低表達(dá)與P120ctn低表達(dá)呈顯著正相關(guān)（P<0.05）。

3 討論

P120ctn是鏈蛋白家族中重要成員，定位于上皮細(xì)胞膜連接處，它與E-cadherin胞內(nèi)肽段胞膜端（the juxtamen brane domain，JMP）結(jié)合構(gòu)成黏蛋白-鏈蛋白復(fù)合體（cadherin catenin complex,CCC），其在上皮細(xì)胞間粘附、結(jié)構(gòu)完整性、極性及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用[1]。諸多研究發(fā)現(xiàn)CCC 成員之一表達(dá)異常將引起功能改變而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。

研究發(fā)現(xiàn)E-cadherin及P120ctn在腫瘤中表達(dá)異常，如胃癌、乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌[2]。歐海玲[3]等也發(fā)現(xiàn)E-cadherin和P120ctn在鼻咽癌中異常表達(dá)明顯高于正常鼻腔黏膜上皮。這些結(jié)果提示E-cadherin和P120ctn的異常表達(dá)可能破壞上皮細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)及細(xì)胞間粘附而促進(jìn)癌的發(fā)生。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)方法研究E-cadherin、P120ctn在正常子宮頸黏膜、CIN黏膜及子宮頸癌中的表達(dá)，結(jié)果顯示在子宮頸癌中，二者表達(dá)較正常子宮頸及CIN黏膜中的表達(dá)下調(diào)；二者在正常子宮頸及CIN黏膜中的表達(dá)沒(méi)有差別。說(shuō)明P120ctn、E-cadherin表達(dá)下調(diào)并非子宮頸腫瘤發(fā)生的早期事件；二者表達(dá)下調(diào)促進(jìn)子宮頸CIN發(fā)展為子宮頸癌。其原因可能是P120ctn, E-cadherin表達(dá)異常影響CCC的正常結(jié)構(gòu)，破壞了子宮頸瘤變細(xì)胞間的粘附而突破基底膜發(fā)展為癌。Bellovin等發(fā)現(xiàn)P120ctn在早期結(jié)腸癌細(xì)胞中表達(dá)和定位發(fā)生改變，并且與E-cadherin表達(dá)及定位異常相關(guān)[4]。本研究也發(fā)現(xiàn)同樣現(xiàn)象，在47.37%的子宮頸癌中P120ctn出現(xiàn)了胞漿表達(dá)。有的學(xué)者認(rèn)為其原因可能是E-cadherin首先表達(dá)缺失，P120ctn無(wú)法與E-cadherin結(jié)合，導(dǎo)致P120ctn異位表達(dá)于胞漿[5]。據(jù)此推測(cè)P120ctn表達(dá)異位可能影響CCC的正常結(jié)構(gòu)及功能而引起子宮頸癌的發(fā)生。

宮頸癌的侵襲與轉(zhuǎn)移是患者致死的首要原因，而上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是上皮細(xì)胞獲得運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移的重要原因[6]。子宮頸癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移首先必須脫離癌細(xì)胞之間的粘附膜，而E-cadherin及P120ctn形成CCC對(duì)維持細(xì)胞間粘附及抑制EMT起重要作用。Pavis等認(rèn)為P120ctn的表達(dá)改變會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞黏附與增殖失調(diào)，從而誘發(fā)腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移 [7]。研究發(fā)現(xiàn)在肺癌中P120ctn異常表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[8]。本研究發(fā)現(xiàn)P120ctn、E-cadherin表達(dá)下調(diào)與宮頸癌的侵襲與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。二者在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及侵及深肌層病例中的低表達(dá)率分別顯著高于在不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及侵及淺肌層的子宮頸癌。提示E-cadherin、P120ctn表達(dá)下調(diào)的子宮頸癌細(xì)胞間黏附失去穩(wěn)定性，可能導(dǎo)致癌細(xì)胞間粘附力下降或發(fā)生EMT，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞侵入子宮頸壁及轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié)。有研究發(fā)現(xiàn)E-cadherin表達(dá)缺失導(dǎo)致P120ctn在胞漿中異位表達(dá)，通過(guò)調(diào)節(jié)Rho-GTPases的活性而促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移[9]。可見E-cadherin與P120ctn表達(dá)異常可能促進(jìn)了宮頸癌的侵襲與轉(zhuǎn)移。

本研究結(jié)果顯示P120ctn異位表達(dá)與E-cadherin異位