大鯢人工催產與孵化技術研究

張紅星 沈建忠 趙虎 等

摘要：對大鯢（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）的人工催產和孵化技術進行了研究。結果表明，ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ催產效果較好，經人為調控可使大鯢性腺成熟度狀態良好；人工孵化時通過嚴格控制水溫１８～２１ ℃、溶氧保持在５ ｍｇ／Ｌ以上、光照度３００ ｌｘ以下，給予適當的流水刺激，孵化率可達７６．４％。

關鍵詞：大鯢（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）；催產；受精；孵化

中圖分類號：Ｓ９６１．２；Ｓ９６６．６文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）15－3282-02

Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｓｐａｗｎｉｎｇ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｉａｎｔ Ｓａｌａｍａｎｄｅｒ（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）

ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｘｉｎｇ１，ＳＨＥＮ Ｊｉａｎ－ｚｈｏｎｇ２，ＺＨＡＯ Ｈｕ１，ＷＡＮＧ Ｑｉ－ｊｕｎ１，ＷＡＮＧ Ｚｈｏｎｇ－ｑｉａｎ３

（１． Ｓｈａａｎｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｚｏｏｌｏｇｙ， Ｘｉａｎ ７１００３２， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００７０，Ｃｈｉｎａ；

３． Ｓｈａａｎｘｉ Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｘｉａｎ ７１００８６，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈe ｓｐａｗｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｇｉａｎｔ ｓａｌａｍａｎｄｅｒｓ（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ） was studied． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗed ｔｈａｔ ＬＲＨ－Ａ２ ａｎｄ ＨＣＧ ｏｘｙｔｏｃｉｎ ｗｅｒｅ ｂｅｔｔｅｒ spawning agents. Bｙ ｈｕｍａｎ ｃｏｎｔｒｏｌ， ｇｏｎａｄ ｍａｔｕｒｉｔｉｅｓ ｏｆ ｇｉａｎｔ ｓａｌａｍａｎｄｅｒｓ would be at ｉｄｅａｌ ｓｔａｔｅ． Ｂｙ ｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇ ｗａｔｅｒ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ at １８～２１ ℃， ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｏｘｙｇｅｎ higher than ５ ｍｇ／Ｌ， ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ at ３００ ｌｘ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ｆｌｏｗ， ｔｈｅ ｈａｔｃｈｉｎｇ ｒａｔｅ could be ｕｐ ｔｏ ７６．４％ by ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： gｉａｎｔ ｓａｌａｍａｎｄｅｒ（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）； ｓｐａｗｎｉｎｇ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ； ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ； ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ

大鯢（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）的產卵季節為７～９月，屬一年一次產卵類型［１，２］。在親鯢培育池中培育出雌、雄性腺同步發育成熟的群體，通過人工催產和孵化，可以有效提高大鯢的催產率、受精率和孵化率，從而促進大鯢規模化養殖的健康發展［３-6］。本試驗在人工養殖條件下進行了大鯢的人工催產和孵化技術研究，現將結果報告如下。

１材料與方法

１．１親鯢來源

試驗用親鯢由陜西省寧陜縣龍泉大鯢馴養繁育場提供，選擇性腺成熟度較好的雌鯢１７尾、雄鯢１５尾。

１．２試驗條件

試驗于2008年8月在陜西省寧陜縣龍泉大鯢馴養繁育場進行。繁育場海拔８５６ ｍ，泉水流量０．３５ ｍ３／ｓ，水質清新無污染，溶氧８ ｍｇ／Ｌ，ｐＨ ７．３２，試驗期間水溫１９．５～２１．６ ℃。大鯢親本培育池規格１．２ ｍ×１．５ ｍ×１．０ ｍ，進排水方便。繁育場具備孵化室，進排水能控制，水、電條件能滿足孵化要求。選擇活爽、潔凈的水源，孵化用水經沙棒濾水器過濾、紫外線 殺菌水處理器殺菌（或用臭氧機制臭氧殺菌）后注入孵化槽。配備空壓泵、增氧氣泡石和電控調溫器、孵化槽、孵化篩、揀卵器、弱光源燈等。

１．３雌雄鑒別與性腺成熟度判斷

親鯢的性別在非繁殖期從外形上較難區別，但是在繁殖期可通過觀察泄殖孔和腹褶形態特征進行區分。雄性親鯢泄殖孔橢圓形，邊緣有一排外突的小白點，外圍有一橢圓形的隆起；雌性親鯢泄殖孔近圓形，略向內凹，邊緣平滑，無小白點和橢圓形隆起，腹部膨大而松軟，腹褶短小［7］。

大鯢親體性腺成熟度直接影響著催產率的高低與出苗的成敗。采用經驗鑒別與形態檢查相結合的方法，依據親鯢腹褶的形態、泄殖孔內凹程度、腹部松軟程度以及活動姿態而定。在繁殖季節，雌鯢泄殖孔充血，腹部膨大而柔軟、富有彈性；雄鯢泄殖孔邊緣有一排外突的小白點，外圍有一橢圓形隆起。

１．４精液常規檢測

用量筒測量精液量，用精密ｐＨ試紙（測量范圍６．４～８．０）測定精液ｐＨ值。將精液用３％氯化鈉溶液稀釋５倍，在顯微鏡下用血細胞計數板計數，測定精液的密度。

精子的運動有３種類型，即直線前進運動、旋轉運動和振擺運動，在顯微鏡視野中觀察精子的運動，估測直線前進運動精子數占精子總數的百分比，根據直線前進運動的精子比例評價精子活力。采用十級制評定精子的活力等級，直線前進運動的精子比例為１００％者評定為１．０級，９０％者評定為０．９級，以此類推［８］。

１．５人工催產與授精

催產藥物選用ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ，采用一次性腹腔注射，從親鯢背部（靠后）肋間進針０．５～０．８ cm，注射劑量為ＬＲＨ－Ａ２ ２～４ μｇ／ｋｇ，ＨＣＧ ２００～１ ０００ ＩＵ／ｋｇ，雌雄注射相同劑量。

人工授精采用干濕法。在室內操作控制光照，當發現雌鯢產出卵帶后，一人立即用手托住卵帶放入盆中，另一人用手輕擠雄鯢腹部，用小燒杯在泄殖孔處接收精液，將采集的精液加入到卵帶盆中，加入精子營養液，輕輕搖晃卵帶盆，使卵受精均勻。１５ ｍｉｎ后，將卵帶盆里的水更換２次，然后將卵帶放入孵化篩內進行孵化。

１．６人工孵化

受精卵的孵化采用流水孵化法，采用槽式孵化篩，水體經紫外線殺菌水處理器消毒、多級凈水增氧，溶氧保持在5 mg/L以上；通過電動調溫器嚴格控制水溫１８～２１ ℃，水流量０．０３ ｍ３／ｍｉｎ，光照度３００ ｌｘ以下，適時翻卵和揀卵，以滿足卵子發育的生理條件。每天定時用溫度計測量水溫，檢查受精卵，及時剔除死卵并做好記錄。

２結果與分析

２．１催產效應

親體一次性腹腔注射ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ后，產卵效應時間為４～１２ ｄ，其中最佳時間為４～６ ｄ。催產后親鯢表現明顯的性活動行為，產卵和受精及時，從而提高了繁育率。

２．２大鯢精液常規檢測

對該場６尾性成熟并參與繁殖的雄性親鯢進行精液常規檢測，結果見表１。由表１可知，親鯢體重均達到參繁要求，排精量在１２．８～６４．１ ｍＬ，相對排精量為２．１～１２．１ ｍＬ／ｋｇ，精液呈中性偏酸，密度（２．１５～１０．７５）×１０６個／ｍＬ，精子活力在０．７級以上，達到受精要求。

２．３參繁情況

１７尾雌鯢有１４尾產卵，雌性親鯢的參繁率為８２．４％；１５尾雄鯢性腺全部發育成熟，其中有２尾未經催情就能多次擠出乳白色優質精液，經鏡檢精子活力良好。

２．４產卵量與受精率

２００８年８月，產卵９ ３３５粒；人工授精采用干濕法，獲受精卵８ ４９５粒，卵的受精率達９１．０％。在孵化室內精心孵化，孵化出苗６ ４９１尾，出苗率達 ７６．４％。

３小結與討論

３．１影響催產的因素

催產是輔助生殖途徑中的重要環節，催產效果的好壞直接影響到子代的成活率和發育狀況。影響催產的因素包括外在因素和內在因素，其中外在因素有水質、水溫、水流量、催產劑的種類和劑量、注射次數等，內在因素有親鯢的年齡和成熟度等。內在因素是主因，外在因素是輔因，外在因素要配合內在因素方能到達良好的催產效果。水質好（溶氧量高、濁度低）、水溫適宜（１８～２１ ℃）、有流水刺激時效應時間會明顯縮短。親鯢一般達到５～６齡即可開始參繁，成熟度好的親鯢催產后效應時間短。根據親鯢發育狀況，選擇適合的催產劑、注射劑量和注射次數均可縮短效應時間。經過長期試驗總結，ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ對大鯢催產效果較好，經濟實用。

３．２精液指標方面

大鯢精液常規指標測定表明，相對排精量最多可達１２．１ ｍＬ／ｋｇ。原因可以歸結為人工飼養環境良好、營養豐富，高質量的精液對人工授精的成功具有重要意義。精液密度最高可達１．０７５×１０７個／ｍＬ，精液活力最高可達０．9級，該數據與劉鑒毅等［9］和李駿珉等［１０］的報道有一定差異，產生該差異的原因可能與親鯢的營養水平和養殖環境狀況不同有關。

３．３人工孵化方面

在人工孵化過程中水溫對孵化影響極大。水溫１８～２１ ℃，孵化期為２８～３５ ｄ；水溫１６～１８ ℃，孵化期為３５～４０ ｄ。日溫差變幅不宜超過１．５ ℃。孵化水溫超過２３ ℃，則易造成胚體死亡或產出畸形苗。因此，適宜的孵化水溫為１８～２１ ℃。水中溶氧保持在５ ｍｇ／Ｌ以上，嚴格控制光照在３００ ｌｘ以下，水流量在0.03 m3/min，保持卵的靜態翻（滾）動。嚴防卵體感染水霉及發生胚胎“貼殼”死亡，若發現卵或胚胎停止發育而死亡應立即剔除。

本試驗是在規模化養殖情況下對大鯢人工催產與孵化技術的一次驗證，但關于親鯢的選配、受精及胚胎發育等方面還有待進一步的探討和研究。

參考文獻：

［１］ 陽愛生，劉國均．大鯢人工繁殖的初步研究［Ｊ］． 淡水漁業，１９７９（２）：１－５．

［2］ 葛蔭榕，鄭合勛．大鯢的自然繁殖周期［Ｊ］． 河南師范大學學報（自然科學版），１９９４，２２（２）：６７－７０．

［3］ 王文林，杜秀琦，張麗琴，等．大鯢繁殖生物學初探［Ｊ］． 河南教育學院學報（自然科學版），２００２，１１（１）：２１－２２．

［4］ 李培青，相學軍，朱必才．中國大鯢生殖激素的初步研究［Ｊ］．生物學雜志，２００８，２５（３）：３０－３２．

［5］ 王海文，卓君華，歐東升．促使雌雄大鯢性同步發育技術［Ｊ］．水產養殖，２００９（１）：８－１０．

［6］ 施學文．大鯢人工繁殖技術初步研究［Ｊ］． 福建水產，２０１１，３３（５）：４８－５１．

［7］ 陳云祥，陽愛生，江輝，等． 大鯢性腺成熟度的外部感官鑒別［Ｊ］．水利漁業，２００６，２６（６）：５２．

［８］ 桑潤滋．動物繁殖生物技術［Ｍ］． 第二版． 北京：中國農業出版社，２００２．

［９］ 劉鑒毅，肖漢兵，楊焱清，等．大鯢成熟精、卵的形態學觀察及受精卵孵化中的形態變化［Ｊ］． 淡水漁業，１９９９，２９（３）：６－９．

［１０］ 李駿珉，方樹淼，范維端，等．大鯢的自然受精試驗［Ｊ］． 四川動物，２００４，２３（３）：２９６－２９７．