卵巢因子對小鼠卵母細胞發育的影響

高國龍

摘要：卵巢因子對卵母細胞發育的影響已成為發育生物學研究的主要內容，卵巢產生的大量生長因子通過自分泌／旁分泌方式對生發泡破裂（Germinal Vesicle Breakdown，ＧＶＢＤ）、第一極體釋放、胚胎發生及早期胚胎發育發揮調控作用。對卵巢因子調控作用的深入研究有助于進一步了解卵母細胞成熟及早期胚胎發育過程中的細胞通訊系統網，尋找治療不孕不育的新途徑和新方法，為體外成熟、體外受精及胚胎干細胞分化制定更加優化的培養環境。概述了目前卵巢因子在小鼠卵母細胞發育調控中的研究進展。

關鍵詞：小鼠；卵巢因子；卵母細胞；胚胎；發育

中圖分類號：Ｓ８１１文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）06－1085-04

Tｈｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｏｖａｒｉａｎ Ｆａｃｔｏｒ ｏｎ ｔｈｅ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｏｕｓｅ Ｏｏｃｙｔｅｓ

ＧＡＯ Ｇｕｏ－ｌｏｎｇ

（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Uｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕｉｙａｎｇ ５５０００１，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： The sｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｏｏｃｙｔｅｓ ｈａｄ ｂｅｃｏｍｅ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｂｉｏｌｏｇｙ， ｏｖａｒｉａｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｕｒｔｈｅｒ ａｃｔ ａｓ ｐａｒａｃｒｉｎｅ ａｎｄ／ｏｒ ａｕｔｏｃｒｉｎｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｄｕｒｉｎｇ ＧＶＢＤ， ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｐｏｌａｒ ｂｏｄｙ， ｅａｒｌｙ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｅａｒｌｙ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ． Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｏｖａｒｉａｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ ｔｏ ｆｕｒｔｈｅｒ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｏｆ ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｏｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｅａｒｌｙ ｅｍｂｒｙｏｓ， ａｎｄ ｔｈｅｓｅ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ｃｏｕｌｄ ｌｅａｄ ｔｏ ｎｅｗ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ， ａｎｄ ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ ｆｕｔｕｒｅ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ， ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ． Progress ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｏｏｃｙｔｅｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ was summarized．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｍｏｕｓｅ； ｏｖａｒｉａｎ ｆａｃｔｏｒ； ｏｏｃｙｔｅｓ； ｅｍｂｒｙｏｓ； ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ

隨著人類不孕不育及動物胚胎工程領域體外受精和體細胞克隆技術研究的逐漸深入，卵母細胞發育機制已經成為發育生物學研究的重要內容之一［１，２］，人們通過對細胞間通訊系統的研究來提高卵母細胞的發育潛能［３－６］。

大量的研究證實，內分泌激素可以刺激卵巢產生大量的生長因子，促使卵母細胞成熟及發育，顆粒細胞和卵母細胞也可以產生類似卵巢因子的生長因子促使卵母細胞進一步發育［４，５］,現在卵巢因子對卵母細胞發育的影響已成為發育生物學研究的主要內容。本文就目前小鼠卵母細胞發育過程中發現的卵巢因子的種類、對卵母細胞發育的影響作用、調控方式及所用到的研究方法等綜述如下。

１卵巢因子的發現及其作用

在哺乳動物中，發育卵泡中的初級卵母細胞被阻滯在第一次減數分裂前期的雙線期，卵母細胞處于該階段長達數月甚至數年。隨著排卵前內分泌激素分泌水平的逐漸提高，卵母細胞繼續減數分裂，進而表現出生發泡破裂（Ｇｅｒｍｉｎａｌ ｖｅｓｉｃｌｅ ｂｒｅａｋｄｏｗｎ，ＧＶＢＤ）、染色質濃縮及第一極體釋放等有助于受精和早期胚胎發育的特征。ＧＶＢＤ和第一極體釋放是卵母細胞核成熟的標志，除此之外，卵母細胞也需要細胞質組分的變化來實現胞質成熟，才有利于隨后的胚胎發生，并為植入前胚胎的發育做好準備［７，８］。

雖然排卵前的促黃體素（Ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ， ＬＨ）對卵母細胞成熟起最重要和最直接的作用，但由于生殖細胞缺乏ＬＨ受體，ＬＨ和人絨毛膜促性腺激素（Ｈｕｍａｎ ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ，ＨＣＧ）等并沒有直接作用于卵母細胞。ＬＨ／ＨＣＧ對卵母細胞的調節功能可能是通過對ＬＨ敏感的體細胞的旁分泌因子來調控，或者是將卵丘細胞或顆粒細胞產生的細胞信號通過細胞間的緊密連接向卵母細胞傳遞來完成［９］。后來的研究證實，內分泌激素ＬＨ刺激卵巢產生大量卵巢因子，以促進ＧＶＢＤ的發生，而顆粒細胞和卵丘細胞也可以產生相似的生長因子［４，５］，這些因子有利于卵母細胞受精及植入前胚胎的繼續發育。同時，早期胚胎發育過程也包括機體通過自分泌／旁分泌途徑產生的大量生長因子和細胞因子的參與［３，１０］。

通過對特定基因及其表達蛋白的檢測分析，人們不但在卵巢、顆粒細胞、卵丘細胞和卵母細胞中檢測到卵巢因子的表達，而且在妊娠動物的輸卵管和子宮組織中也檢測到卵巢因子及其受體蛋白的表達。卵巢因子不但促使ＧＶＢＤ和第一極體釋放，進而完成卵母細胞核成熟，還有可能通過自分泌／旁分泌對胚胎發生及早期胚胎發育產生調控作用。進一步研究卵巢因子在卵母細胞發育中的調控作用有助于了解卵母細胞成熟及早期胚胎發育過程中的細胞通訊系統網，尋找治療不孕不育的新途徑和新方法，為體外成熟、體外受精及早期胚胎發育制定更加優化的培養環境。

２主要卵巢因子

２．１ＢＤＮＦ

ＢＤＮＦ（Ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ）最初是從豬腦純化的小分子堿性蛋白質，是一種腦源性神經營養因子，其對神經細胞的生長發育及保護修復有著重要作用，是神經營養因子家族（ＮＴＦｓ）的一個成員。ＢＤＮＦ分子質量為1３ ｋu，由兩個成熟亞基以非共價結合方式形成同源活性二聚體，成熟亞基含有１１９個氨基酸殘基。同源活性二聚體作為配體，結合受體后，誘導細胞膜上的酪氨酸蛋白激酶受體Ｂ（ＴｒｋＢ）形成二聚體和磷酸化，進一步激活細胞內信號，發揮其生物學效應［１１，１２］。與神經生長因子不同，ＢＤＮＦ主要在中樞神經系統，維持神經脊和外胚層基板的感覺神經元，這些神經元對神經生長因子無反應。

近年來的研究發現，ＢＤＮＦ與哺乳動物的繁殖機能有著密切的聯系，人們發現ＢＤＮＦ及其高親合力受體ＴｒｋＢ在卵巢組織中表達，而且其表達水平和卵母細胞發育潛能關聯性很高。家雞排卵前卵巢卵泡膜細胞表達ＢＤＮＦ，家雞排卵前顆粒細胞和小鼠的卵母細胞膜上分別有ＴｒｋＢ表達，ＴｒｋＢ基因敲除的大鼠卵泡發育不良［１３－１５］。在對哺乳動物小鼠和人的研究中，人們發現排卵前ＬＨ分泌量的上升刺激卵泡顆粒細胞產生大量ＢＤＮＦ，ＢＤＮＦ促使卵母細胞第一極體釋放并進一步誘導胞質成熟［１６，１７］。關于ＢＤＮＦ在卵巢中的表達及其對卵巢功能的影響研究，無論從基礎研究還是臨床研究的角度都具有重大利用價值。

２．２ＧＤＮＦ

ＧＤＮＦ（Ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ）是膠質細胞源性神經營養因子，是幾種不同類型的神經元中第一個被確定的存活因子［１８，１９］。ＧＤＮＦ成熟肽均有１３４個氨基酸殘基，活性形式為二硫鍵連接的同源二聚體糖蛋白，能促進神經元尤其是多巴胺能神經元的生長分化，是治療神經退化性疾病如帕金森癥的潛在有效藥物。ＧＤＮＦ家族神經營養因子信號傳導是通過復合受體途徑實現的，復合受體由兩部分組成，第一部分是糖基化的磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）錨定到細胞表面的蛋白分子，稱為ＧＤＮＦ家族受體（ＧＤＮＦ ｆａｍｉｌｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｌｐｈａ１，ＧＦＲＡ），另一部分是由原癌基因ｃ－ｒｅｔ編碼的蛋白產物（Ｒｅｔ ｐｒｏｔｏ－ｏｎｃｏｇｅｎｅ，Ｒｅｔ），它是一種受體酪氨酸激酶［２０］。

雖然ＧＤＮＦ及其受體主要在神經系統中大量表達，但人們也在幾種邊緣組織中發現ＧＤＮＦ及其受體，其中就包括卵巢和睪丸組織［２１］。在睪丸組織中，ＧＤＮＦ參與精原細胞增殖及分化的調控［２２］。通過ＤＮＡ芯片分析，ＧＤＮＦ在卵巢、卵丘細胞和顆粒細胞中均有表達，并且其表達水平在排卵前明顯上升［１６］。在對小鼠的研究中發現，ＧＤＮＦ作為主要生長因子促進精原干細胞的增殖［２３］。ＧＤＮＦ及其受體ＧＦＲＡ和Ｒｅｔ在卵母細胞、卵管和子宮中均有大量表達，ＧＤＮＦ促使小鼠卵母細胞第一極體的釋放，并通過抑制胚胎細胞的凋亡促使２細胞胚胎向囊胚階段發育［６］。

２．３ＩＮＳＬ３

ＩＮＳＬ３（Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｆａｃｔｏｒ ３）是胰島素樣因子３，是松弛素－胰島素激素家族的成員之一，由睪丸間質細胞在整個生命周期內穩定分泌產生的一種激素，被認為可能是比睪丸激素水平更敏感的，能顯示間質細胞功能狀況的指標。ＩＮＳＬ３基因或其受體基因ＬＧＲ８／ＧＲＥＡＴ若發生突變，則可能會導致男性患隱睪病［２４］。除睪丸組織外，其他類型的組織中也有ＬＧＲ８／ＧＲＥＡＴ基因的表達，在發育成熟的間質細胞中檢測到ＩＮＳＬ３，說明ＬＧＲ８／ＧＲＥＡＴ－ＩＮＳＬ３激素系統在成年個體內可能還擔負其他生理功能。在之后的研究中，人們發現ＩＮＳＬ３在出生前后的睪丸間質細胞和出生后的卵巢中特異地表達［２５］，排卵前的卵母細胞中卵巢因子ＩＮＳＬ３表達水平上升，卵巢因子ＩＮＳＬ３在卵母細胞成熟中發揮了重要作用，其可以激活卵母細胞外圍體細胞中ＩＮＳＬ３的受體，引起卵母細胞ｃＡＭＰ水平下降，對ＧＶＢＤ的發生具有明顯的促進作用［４，５］。

２．４Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１

Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ最早是從培養的豬主動脈內皮細胞中分離純化出的活性多肽，由２１個氨基酸組成，分子質量為２ ４００ u，Ｎ端是２個二硫鍵將１－１５、３－１１位置的半胱氨酸連接起來，Ｃ端是一些疏水性氨基酸的殘基。Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ屬于結構同源肽家族，包括Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１、Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－２和Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－３，其差別在于個別氨基酸的殘基。多項研究證實，Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ不僅存在于血管內皮，維持基礎血管張力與心血管系統的穩定，也廣泛存在于包括生殖內分泌系統在內的各種組織和細胞中，其在生殖過程中參與生殖活動調控的作用被多次研究報道［２６－３０］。在對大鼠的研究中，Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１能夠有效降低氧化亞氮對早期胚胎的損傷［３１］。通過對排卵前卵巢基因芯片的全基因組分析，人們發現Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１在小鼠卵巢組織的表達水平很高，Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１可以促進排卵前卵母細胞ＧＶＢＤ的發生［２７］。Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ有２個Ｇ蛋白偶聯受體ＥＤＮＲＡ 和 ＥＤＮＲＢ。ＥＤＮＲＡ 對Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１有很高的特異性，但ＥＤＮＲＢ對Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１、Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－２ 和Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－３均具有一致的親和力［３２，３３］。可以結合Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１、Ａｎｔｉ－ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１及Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１特異性受體ＥＤＮＲＡ，對Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１在卵母細胞發育中的調控作用進行深入研究。

３主要研究方法

通過卵巢因子、卵巢因子特異性受體及卵巢因子抗體，結合基因芯片、實時熒光定量ＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ、免疫組化、卵母細胞體外成熟、體外受精、早期胚胎體外培養、囊胚內細胞團細胞數量及細胞凋亡評估等，可以對卵巢因子在ＧＶＢＤ、第一極體釋放、胚胎發生及早期胚胎發育中的自分泌／旁分泌調控作用進行深入研究。

３．１卵巢因子在細胞及組織中表達分析

運用基因芯片分析鑒定卵巢因子及其特異性受體在卵巢的表達，通過實時熒光定量ＰＣＲ對卵巢因子及其特異性受體在卵巢轉錄物進行分析，進一步驗證基因芯片的結果，ＥＬＩＳＡ檢測卵巢因子及其特異性受體蛋白在卵巢、輸卵管和子宮組織中的表達。分離卵巢表面卵泡中的卵丘細胞、顆粒細胞和卵母細胞，以實時熒光定量ＰＣＲ技術檢測卵巢因子及其特異性受體在３種細胞的轉錄物，運用免疫組織化學方法定位卵巢因子及其特異性受體蛋白在３種細胞中的表達。

３．２卵母細胞核成熟評價

卵巢獲取卵丘卵母細胞復合體（ＣＯＣｓ），通過添加卵巢因子及其抗體，對ＣＯＣｓ和裸卵進行體外培養，研究卵巢因子對卵母細胞ＧＶＢＤ及第一極體釋放的影響，驗證卵巢因子是否充當旁分泌因子調控卵母細胞的核成熟。

３．３卵母細胞胞質成熟評價

獲取ＣＯＣｓ，細胞在添加和不添加特定卵巢因子的環境中培養，體外成熟培養，然后進行體外受精及早期胚胎體外培養，評估卵母細胞受精及受精卵發育至２細胞、桑葚胚、囊胚的能力。

３．４細胞增殖和囊胚細胞凋亡的評價

培養液中添加卵巢因子，體外培養早期胚胎，收集擴展囊胚，使用ＴＵＮＥＬ法處理細胞，評估卵巢因子對細胞增殖和細胞凋亡的影響，通過卵巢因子抗體進一步驗證卵巢因子的作用。

４存在問題

雖然目前人們研究發現了許多卵巢因子，并對卵巢因子在卵母細胞發育中的調控作用開展了大量研究，也取得了一些研究成果，但這些研究大多集中在卵母細胞核成熟階段（ＧＶＢＤ和第一極體釋放），對卵巢因子在卵母細胞發育后期的研究較少，從胚胎發生及早期胚胎發育角度研究卵巢因子的自分泌／旁分泌調控作用及其機制的報道不多［６，１６］。同時，大多研究只是涉及單一卵巢因子對卵母細胞發育的影響，對不同卵巢因子在卵母細胞發育調控過程中是互相協同、階段性分工還是互相拮抗認識不清，對包括ＢＤＮＦ、ＧＤＮＦ、ＩＮＳＬ３和Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１在內的卵巢因子，在卵母細胞發育調控過程中的相互作用還有待進一步研究。

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［１９］ ＬＩＮ Ｌ Ｆ， ＤＯＨＥＲＴＹ Ｄ Ｈ， ＬＩＬＥ Ｊ Ｄ， ｅｔ ａl． ＧＤＮＦ： ａ ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｍｉｄｂｒａｉｎ ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ ｎｅｕｒｏｎｓ［Ｊ］． Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９３，２６０（５１１１）：１１３０-１１３２．

［２０］ ＳＡＡＲＭＡ Ｍ， ＳＡＲＩＯＬＡ Ｈ． Ｏｔｈｅｒ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ： ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ （ＧＤＮＦ）［Ｊ］． Ｍｉｃｒｏｓｃ Ｒｅｓ Ｔｅｃｈ，１９９０，４５（４－５）：２９２-３０２．

［２１］ ＴＲＵＰＰ Ｍ， ＲＹＤＥＮ Ｍ， Ｊｏｒｎｖａｌｌ Ｈ， ｅｔ ａ１． Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ＧＤＮＦ， ａ ｎｅｗ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ａｖｉａｎ ａｎｄ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｎｅｕｒｏｎｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，１９９５，１３０（１）：１３７-１４８．

［２２］ ＭＥＮＧ Ｘ， ＬＩＮＤＡＨｌ Ｍ， ＨＹＶＯＮＥＮ Ｍ Ｅ， ｅｔ ａl． Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｆａｔｅ ｄｅｃｉｓｉｏｎ ｏｆ ｕｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａ ｂｙ ＧＤＮＦ［Ｊ］． Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２０００， ２８７（５４５７）：１４８９-１４９３．

［２３］ ＢＲＩＮＳＴＥＲ Ｒ Ｌ． Ｍａｌｅ ｇｅｒｍｌｉｎｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ： ｆｒｏｍ ｍｉｃｅ ｔｏ ｍｅｎ［Ｊ］． Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００７，３１６（５８２３）：４０４-４０５．

［２４］ ＩＶＥＬＬ Ｒ，ＢＡＬＶＥＲＳ Ｍ，ＤＯＭＡＧＡＬＳＫＩ Ｒ， ｅｔ ａl． Ｒｅｌａｘｉｎ-ｌｉｋｅ ｆａｃｔｏｒ：ａ ｈｉｇｈｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ｎｅｗ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｌｅｙｄｉｇ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｔｅｓｔｉｓ［Ｊ］． Ｍｏｌ Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，１９９７，３（６）：４５９-４６６．

［２５］ ＺＩＭＭＥＲＭＡＮＮ Ｓ，ＳＣＨＯＴＴＬＥＲ Ｐ， ＥＮＧＥＬ Ｗ， ｅｔ ａl． Ｍｏｕｓｅ Ｌｅｙｄｉｇ ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ （Ｌｅｙ Ｉ－Ｌ） ｇｅｎｅ： ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｔｅｓｔｉｓ ａｎｄ ｏｖａｒｙ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］． Ｍｏｌ Ｒｅｐｒｏｄ Ｄｅｖ， １９９７，４７（１）：３０-３８．

［２６］ ＢＯＩＴＩ Ｃ， ＧＵＥＬＦＩ Ｇ， ＢＲＥＣＣＨＩＡ Ｇ， ｅｔ ａl． Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｌｕｔｅｏｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｐｓｅｕｄｏｐｒｅｇｎａｎｔ ｒａｂｂｉｔｓ［Ｊ］． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００５，１４６（３）：１２９３-１３００．

［２７］ ＫＡＷＡＭＵＲＡ Ｋ， ＹＥ Ｙ， ＣＨＥＮＧ Ｇ Ｌ， ｅｔ ａl． Ｐａｒａｃｒｉｎｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｕｍｐｔｉｏｎ ｏｆ ｏｏｃｙｔｅ ｍｅｉｏｓｉｓ ｂｙ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１［Ｊ］． Ｄｅｖ Ｂｉｏｌ， ２００９，３２７（１）：６２-７０．

［２８］ ＭＥＩＤＡＮ Ｒ， ＬＥＶＹ Ｎ． Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｒｐｕｓ ｌｕｔｅｕｍ： ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］． Ｄｏｍｅｓｔ Ａｎｉｍ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２００２，２３（１－２）：２８７-２９８．

［２９］ ＮＯＬＬ Ｇ， ＷＥＮＺＥＬ Ｒ Ｒ， ＬＵＳＣＨＥＲ Ｔ Ｆ． Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ： ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ａｎｄ ｒｅｎａｌ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］． Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９９６，１５７（１－２）：２５９-２６７．

［３０］ ＯＴＡＮＩ Ｈ， ＹＡＭＯＴＯ Ｍ， ＦＵＪＩＮＡＧＡ Ｈ， ｅｔ ａl． Ｐｒｅｓｅｎｃｅ ａｎｄ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｏｖａｒｙ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｂｙ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎｓ［Ｊ］． Ｅｕｒ Ｊ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ， １９９６， １３５（４）：４４９－４５４．

［３１］ ＳＩＮＮＥＲ Ｄ， ＪＡＷＥＲＢＡＵＭ Ａ， ＰＵＳＴＯＶＲＨ Ｃ， ｅｔ ａl． Ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１ ｉｎ ｅｍｂｒｙｏｓ ｆｒｏｍ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｎｅｏｎａｔａｌ ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒａｔｓ， ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｒｅｐｒｏｄ Ｆｅｒｔｉｌ Ｄｅｖ，２００２， １４（１－２）：２３－２８．

［３２］ ＡＲＡＩ Ｈ， ＨＯＲＩ Ｓ， ＡＲＡＭＯＲＩ Ｉ， ｅｔ ａl． Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｃＤＮＡ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ａｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ，１９９０，３４８（６３０３）：７３０-７３２．

［３３］ ＳＡＫＵＲＡＩ Ｔ， ＹＡＮＡＧＩＳＡＷＡ Ｍ， ＴＡＫＵＷＡ Ｙ，ｅｔ ａl． Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ａ ｃＤＮＡ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ａ ｎｏｎ－ｉｓｏｐｅｐｔｉｄｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｓｕｂｔｙｐｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ，１９９０，３４８（６３０３）：７３２－７３５．