肖冰梅 劉義芳 郭錦明 龔力民
湖南中醫藥大學藥學院,湖南 長沙 410208
向日葵Helianthus annuus是菊科向日葵屬植物,在我國種植已有400多年的歷史。我國的《植物名實圖考》對向日葵早有記載,現在全國各地均有種植。主要分布在東北、西北和華北地區,如內蒙古、吉林、遼寧、黑龍江、山西等省、自治區[1-2]。向日葵是蒙族、景頗族等多個少數民族的傳統藥,其根、莖髓、花盤、莖葉、種子、花等均可入藥。蒙族、景頗族用向日葵根治小便澀痛、血淋、尿路結石等癥,傣藥用其治眩暈、失眠、高血壓,療效顯著,沿用至今[3]。
國外對向日葵屬植物地上部分的化學成分作了詳細的研究,已從其中分離出了黃酮類,倍半萜類及二萜類等化學成分130多種,但這些研究主要都集中在向日葵地上部分,國內也只局限在對向日葵種子中的脂肪酸和綠原酸、根醇提物進行了研究[4-6],對向日葵根揮發油的研究還未見報道。本文首次利用氣質聯用技術對向日葵根部揮發油做了檢測,成功檢測到三十三個成分。為建立向日葵根的藥用質量標準、進行深入的開發利用提供了科學的實驗依據。
1.1 實驗材料、試劑與儀器
本實驗采用的材料為菊科植物向日葵屬植物向日葵(Helianthus annuus)根,購自遼寧。經本校中藥鑒定教研室劉塔斯教授鑒定無誤。
本實驗所需的試劑為濃度95%乙醇﹑無水乙醇、乙酸乙酯、石油醚﹑氯仿﹑水合氯醛﹑稀甘油等,均為分析純。蒸餾水。
儀器采用島津GC-MSQP2010氣質聯用儀。
1.2 實驗方法
1.2.1 揮發油提取[7]
方法 將向日葵根在60℃干燥2h,粉碎,過篩制成向日葵根粉備用,將制好的向日葵根粉50克裝入1000 ml的燒瓶中,按固液比1:10添加500ml蒸餾水。將燒瓶置于水浴鍋上,安裝回流裝置,檢查氣密性。用電熱套加熱;在裝置的另一端的濃縮瓶內加入10ml乙醚,反復提取十次,共計500g。回收溶有揮發油的乙醚溶液。得率為1%。
1.2.2 GC-MS測定條件
將揮發油用無水硫酸鈉脫水,再用微孔濾膜過濾,除去其中微粒,以保護儀器。將濾液放在一個干凈的錐形瓶中,用1ml的移液管移取,放入10ml的容器中,定容。
測定條件 氣相色譜柱:Rtx-5ms(30 m×0.25 mm×0.25 μm);載氣:He,流速:1.0 mL/min;進樣口溫度:220℃;程序升溫:60℃保持1min,以5℃/min升溫到190℃,保持33min;進樣量:1 μL;分流比:10︰1。離子源溫度:200℃ ;電離方式:EI,電子能量:70 eV;溶劑延遲時間:3.0 min;質量掃描范圍:40~550 amu;采集方式:SCAN掃描。色譜分析總離子流圖如圖1所示。
本實驗利用氣質聯用技術首次對向日葵根部揮發油做了分析,成功檢測到33個有效成分,結果如表1。由表1可知,揮發油中主要含有脂肪酸及萜類成分,其中以脂肪酸和倍半萜類成分所占比重最大,如棕櫚酸占樣品總量的16.29%,白菖烯占12.17%,β-甜沒藥烯占6.4%。顯示出以低沸點成分為主。因此,用水蒸氣蒸餾法提取揮發油很難提取到揮發油。我們經多次試驗之后采用乙醚溶解揮發油的方法順利提取到了揮發油,得率為1%,效果較好。
倍半萜內酯類、二萜類、甾體類、黃酮苷元類、香豆素類等藥理作用主要為抗腫瘤、抗炎、抗衰老、抗心絞痛、降壓等[8-10]。所以向日葵根的揮發油應該具備廣泛的生物活性,可以開發成降壓藥、消炎藥及抗腫瘤藥等新型藥物,有藥用價值和綜合利用價值。
本實驗對向日葵根揮發油的化學成分進行了研究,并確認主要為脂肪酸和倍半萜類成分,為其揮發油相關藥物的開發打下了基礎。


表1 向日葵根揮發油的GC-MS檢測結果

Peak Name Mol Wt Formula Similarity Ret.time Area%27 n-Hexadecanoic acid棕櫚酸 256 C16H32O288 27.470 16.26 28 Kaur-16-ene扁枝烯 272 C20H32 94 28.613 1.15 29 Cycloartanyl acetate環木菠蘿烯醇乙酸酯 470 C32H54O2 80 29.988 10.33 30 (Z,Z) -9,12-Octadecadienoic acid十八碳二、三烯酸 280 C18H32O2 84 31.400 4.06 31 (Z)-9-Octadecenoic acid OleicAcid十八烯酸油酸 282 C18H34O2 93 31.481 2.55 32 7-Tetradecenal,(Z) - 十四烯 210 C14H26O 88 31.558 0.81 33 Labda-8(20),13(16),14-triene未知 272 C20H3282 32.935 1.36
[1]中國藥材公司.中國中藥資源志要[M].科學出版社,1994:931-932.
[2]中藥學大辭典 (上冊)[M].上海:上海科學技術出版社,1977:931.
[3]賈敏如,李星煒.中國民族藥志要[M].北京:中國醫藥科技出版社,2005:317.
[4]蘇曉琴.向日葵的藥用研究[J].黑龍江醫藥,1995,8(1):57~58.
[5]宋晚平.向日葵根中活性成分的提取分離研究[D].西北農林科技大學碩士論文,2004.
[6]Maciás F A,Molinillo J,Torres A.,Varela.et al.Bioactive flavonoids from Hilianthus annuus[J].Cultivars.Phytochemistry,1997,45 ﹙ 45 ﹚:683~687.
[7]匡海學.中藥化學[G].中國中醫藥出版社,2003:198.
[8]索茂榮,楊竣山.向日葵屬倍半萜類化學成分及其生物活性研究概況[J].中草藥,2006,37(1):135~140.
[9]黃世德,梁生旺.分析化學[G].中國中醫藥出版社,2005:41.
[10]WANGPY,HUANGRH,HAOJY.Study on microwave extraction of sunflower seeds oil[J].Chinaoils and Fats(中國油脂),2000,25(6):207—208(in Chinese).