示差折光—相色譜法測定蜂蜜中β—喃果糖苷酶殘留量

摘要：基于β呋喃果糖苷酶與棉子糖在檸檬酸氫氧化鈉緩沖介質（pH 4.50）中50 ℃下反應16 h后的酶解產物蜜二糖含量的變化，建立了高效液相色譜示差折光檢測（HPLC-RID）技術測定蜂蜜中β呋喃果糖苷酶殘留量的新方法。以Agilent Carbohydrate柱為分離柱，乙腈水（78∶22，V/V為流動相，流速為1.4 mL/min，檢測器為示差折光檢測器，柱溫和檢測器溫度均為35 ℃。結果表明，蜂蜜樣品經過聚丙烯酰胺凝膠柱分離后，樣品峰形得到簡化，靈敏度提高了1.3倍；方法的線性范圍為10～200 U/kg；測出限為10 U/kg；回收率為81.3%～112.4%；相對標準偏差為3.7%～9.7%（n=6）。當蜂蜜樣品中β呋喃果糖苷酶含量>20 U/kg時，判定為陽性樣品，即摻假蜂蜜。

關鍵詞：β呋喃果糖苷酶；蜂蜜；示差折光；液相色譜 ；摻假