堿性橙與蛋白間的特異性與非特異性作用熒光光譜比較

摘 要 將堿性橙與抗體的作用、堿性橙與牛血清白蛋白(BSA)間的作用分別作為特異性作用和非特異性作用模型，采用熒光光譜法固定激發(fā)波長為280 nm，掃描不同溫度下堿性橙與抗體和牛血清白蛋白兩種相互作用，在300～600 nm 的發(fā)射波長，比較了兩種相互作用的差異。結果表明，堿性橙與抗體結合為單一的靜態(tài)猝滅過程，二者之間的作用力主要為靜電作用力;在溶液中，二者以摩爾比1∶1 結合，結合常數(shù)為3.88×104 L/mol(25 °C)，3.73×104 L/mol(37 °C)和2.35×104 L/mol(45 °C);堿性橙距抗體分子色氨酸殘基最短距離(r)為5.52 nm。堿性橙與BSA 的結合也為靜態(tài)猝滅，作用力為靜電作用力。但堿性橙與抗體作用過程中形成了激基復合物，與BSA 則不形成激基復合物。

關鍵詞 堿性橙;抗體;牛血清白蛋白(BSA);相互作用;熒光光譜