堿性橙與蛋白間的特異性與非特異性作用熒光光譜比較
2012-04-12 00:00:00雷紅濤唐秋實(shí)黃文凱ChenSitu劉英菊孫遠(yuǎn)明
分析化學(xué) 2012年8期
摘 要 將堿性橙與抗體的作用、堿性橙與牛血清白蛋白(BSA)間的作用分別作為特異性作用和非特異性作用模型，采用熒光光譜法固定激發(fā)波長(zhǎng)為280 nm，掃描不同溫度下堿性橙與抗體和牛血清白蛋白兩種相互作用，在300～600 nm 的發(fā)射波長(zhǎng)，比較了兩種相互作用的差異。結(jié)果表明，堿性橙與抗體結(jié)合為單一的靜態(tài)猝滅過程，二者之間的作用力主要為靜電作用力;在溶液中，二者以摩爾比1∶1 結(jié)合，結(jié)合常數(shù)為3.88×104 L/mol(25 °C)，3.73×104 L/mol(37 °C)和2.35×104 L/mol(45 °C);堿性橙距抗體分子色氨酸殘基最短距離(r)為5.52 nm。堿性橙與BSA 的結(jié)合也為靜態(tài)猝滅，作用力為靜電作用力。但堿性橙與抗體作用過程中形成了激基復(fù)合物，與BSA 則不形成激基復(fù)合物。
關(guān)鍵詞 堿性橙;抗體;牛血清白蛋白(BSA);相互作用;熒光光譜
