用于DNA 雜交檢測的絲網(wǎng)印刷型生物傳感器的研究

摘 要 將單鏈DNA(ssDNA)固定到絲網(wǎng)印刷碳電極上構(gòu)成電化學(xué)DNA 傳感器，采用電化學(xué)指示劑，建立DNA 雜交的檢測方法。Co(phen)33+ 電化學(xué)指示劑通過鈷鹽與配體鄰菲羅啉絡(luò)合制備，采用等離子發(fā)射光譜法(ICP-AES)和核磁共振法(NMR)表征功能基團，采用循環(huán)伏安法(CV)分析指示劑的電化學(xué)特性，并以此為基礎(chǔ)研究ssDNA 在電極表面的固定及DNA 雜交過程。本研究探討了直接吸附、靜電吸附與鍵合等3 種ssDNA在電極表面的固定方法，結(jié)果表明，靜電吸附法和鍵合法具有較高的ssDNA 固定量，采用靜電吸附法固定探針的電極雜交目標(biāo)DNA 后，Co(phen)33+ 易于嵌入雙鏈DNA(dsDNA)中，CV 峰電流(ip )信號隨目標(biāo)DNA濃度增加。本研究采用靜電吸附ssDNA 的電極檢測DNA 雜交，實驗表明，當(dāng)探針固定液中ssDNA 濃度為5 mg/L 時，目標(biāo)DNA 濃度在6.65×10-8 ～4.26×10-6 mol/L 范圍內(nèi)，Co(phen)33+ 在dsDNA 修飾電極上ip 值與DNA 濃度呈良好的線性關(guān)系，R2 為0.9819。本研究為建立新的微生物分子分型手段提供了初步依據(jù)。

關(guān)鍵詞 DNA 雜交;絲網(wǎng)印刷電極;電化學(xué);生物傳感器