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用于DNA 雜交檢測的絲網印刷型生物傳感器的研究

2012-04-12 00:00:00陳盛珍蔡強彭方毅黃新新賈玉玲
分析化學 2012年8期

摘 要 將單鏈DNA(ssDNA)固定到絲網印刷碳電極上構成電化學DNA 傳感器,采用電化學指示劑,建立DNA 雜交的檢測方法。Co(phen)33+ 電化學指示劑通過鈷鹽與配體鄰菲羅啉絡合制備,采用等離子發射光譜法(ICP-AES)和核磁共振法(NMR)表征功能基團,采用循環伏安法(CV)分析指示劑的電化學特性,并以此為基礎研究ssDNA 在電極表面的固定及DNA 雜交過程。本研究探討了直接吸附、靜電吸附與鍵合等3 種ssDNA在電極表面的固定方法,結果表明,靜電吸附法和鍵合法具有較高的ssDNA 固定量,采用靜電吸附法固定探針的電極雜交目標DNA 后,Co(phen)33+ 易于嵌入雙鏈DNA(dsDNA)中,CV 峰電流(ip )信號隨目標DNA濃度增加。本研究采用靜電吸附ssDNA 的電極檢測DNA 雜交,實驗表明,當探針固定液中ssDNA 濃度為5 mg/L 時,目標DNA 濃度在6.65×10-8 ~4.26×10-6 mol/L 范圍內,Co(phen)33+ 在dsDNA 修飾電極上ip 值與DNA 濃度呈良好的線性關系,R2 為0.9819。本研究為建立新的微生物分子分型手段提供了初步依據。

關鍵詞 DNA 雜交;絲網印刷電極;電化學;生物傳感器

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