幾種簡便的微循環障礙動物模型復制方法

余上斌

華中科技大學同濟醫學院基礎醫學實驗教學中心，武漢430030

高分子右旋糖酐（HMWD）法：選擇2～3Kg的健康家兔，雌雄不限。制模當天禁食、禁水。將平均分子量為20～40萬的HMWD配成10%生理鹽水溶液，以7～15ml／Kg體重的劑量作耳緣靜脈快速推注，同時觀察動物球結膜微循環。用藥前家兔眼球結微膜血管中的微動脈和毛細血管呈樹枝狀分布，微靜脈常與微動脈平行，血管由粗到細，光滑自然，微血流呈帶狀或線狀，偶見流動很快的粒線狀血流，但不會出現血細胞聚集的顆粒狀血流，毛細血管，特別是近瞳孔處毛細血管網血流常呈粒線狀流動；微血管周圍無出血及滲出，背景較白（鞏膜），視野清晰。用藥后，眼球結膜微循環中可見下列典型的急性微循環障礙表現：（1）毛細胞血管和微靜脈中紅細胞流速明顯減慢，血流呈斷線狀、虛線狀或粒狀，局部區域甚至完全停滯；（2）微血管中出現明顯血細胞聚集，嚴重時見到血細胞團塊；（3）有時尚可見到微血管發生輕度痙攣，微血管周圍有滲出和出血，以及微靜脈中有血細胞貼壁翻滾等現象。用藥后24h內，上述急性微循環障礙表現最嚴重，少數動物可因急性栓塞而突然死亡，也有少數動物出現偏癱癥狀。存活者，如經精心護理，則72h后微循環障礙逐漸好轉。經測定，在此種急性微循環障礙模型中，動物血粘度明顯升高、紅細胞電泳變慢、血沉加速。

這種急性微循環障礙動物模型的復制方法簡便，出現快，成功率高（95%以上），適于探索與急性微循環障礙有關的各種疾病的發病機制及藥物作用原理的研究。

胎兒羊水靜脈注射法：給予家兔1～4ml／Kg體重劑量靜脈注射新鮮胎兒羊水，注射完成即刻，可見血細胞流動速度減慢，毛細血管中微血流呈間歇性流動，呈紅白交替現象；在微靜脈或較大的毛細血管中常可見到隨血流流動的透明細胞（可能為羊水細胞）。2min后，微血流明顯瘀滯，局部出現凝血，微循環毛細血管中出現體積逐漸加大的白色團塊（可能是流動的白色血栓，以羊水細胞為核心構成）。1h左右，大部分微血流停止流動，僅有部分微血管中可見血流緩慢移動，而且常可出現栓塞所致的突然死亡。這種急性微循環障礙動物模型的復制成功率常因羊水的質量而異。

兔腦粉浸出液靜脈注射法：取新鮮兔腦粉100mg，加生理鹽水5ml，50℃溫箱孵育20min后，取上清液備用。給家兔耳緣靜脈推注上述溶液，1～4ml／Kg體重，同時可給1／4MCaCl24ml，必要時添加少量乳酸靜脈注射。球結膜微循環觀察所見與HMWD復制模型類似。此法缺點是劑量不易控制，每個動物的敏感程度不一，用量太小，急性微循環障礙表現不顯；劑量稍大，動物可發生突然死亡，必須十分注意。