VEGF與TK1的檢測對乳腺癌的診斷價值

肖 慶，韋慶文，藍宇萍

乳腺癌是最為常見的婦科惡性腫瘤之一，其預后的判斷是一個眾所關注的問題。腫瘤的生長和轉移是一個多步驟的復雜過程，在很大程度上依賴于腫瘤血管生成。目前的研究認為:血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是腫瘤血管生成過程中作用最強、特異性最高的促血管生長因子［1］，VEGF與乳腺癌血管生成密切相關，并能促進其生長、浸潤及轉移。另大量臨床研究表明，胸苷激酶1 (TK1)是與細胞DNA合成和細胞增殖密切相關的關鍵酶，在非增殖細胞和健康人血清中含量極微或檢測不到，但在乳腺癌患者中TK1伴隨著腫瘤細胞的急劇增殖而升高，并與疾病的輕重程度有關［2］。因此檢測VEGF和TK1可作為反映乳腺癌生物學行為的指標之一。本研究應用化學發光法檢測血清中VEGF與TK1的含量，對這兩種指標與臨床指標的關系進行分析，旨在為乳腺癌患者的綜合治療和判斷術后預后提供相關的理論依據。

1 資料與方法

1.1 資料 選取我院普外科2007～2010年乳腺癌根治術或改良根治術切除標本36例，有淋巴結轉移者22例，無淋巴結轉移者14例。同時選取乳腺良性病變者26例。患者均為女性，年齡37～65歲，平均年齡(54±7)歲。2組患者術前均未經任何治療。正常對照組為36例來自體檢的正常健康女性，年齡33～65歲，平均年齡(55±8)歲。

1.2 方法 主要試劑:血清VEGF、TK1濃度檢測均采用化學發光法，試劑盒購自羅氏公司。標本檢測:所有受試者均于晨起7時抽取空腹靜脈血約3 m l，分離血清，-20℃冷凍保存，嚴格按說明書進行操作。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計分析軟件處理數據。組間用t檢驗對檢測數據進行處理，結果用±s表示，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清VEGF與TK1的比較 乳腺癌患者的VEGF與TK1值明顯高于乳腺良性病變組和正常對照組，差異均有顯著性(P＜0.05)，而乳腺良性病變組和正常對照組之間VEGF與TK1值則差異無顯著性(P＞0.05)，見表1。

表1 各組血清VEGF與TK1測定結果(±s)

表1 各組血清VEGF與TK1測定結果(±s)

組別 例數年齡(歲) VEGF(ng/ml) TK1(pg/ml) 36 50±5 171.02±15.17 6.60±17.00乳腺良性病變組 26 59±8 75.25±8.20 4.08±1.73正常對照組 26 51±6 52.91±7.23 2.86±1.33 t值乳腺癌組＜0.05 ＜0.05 38.341 40.511 P值

2.2 有否腋窩淋巴結轉移血清VEGF及TK1測定 本組乳腺癌病例經病理檢查，有腋窩淋巴結轉移者為22例，無轉移者為14例，淋巴結轉移陽性者血清VEGF、TK1水平顯著高于陰性者(P＜0.05)，VEGF水平隨TK1增高而增加(P＜0.05)，見表2。

2.3 乳腺癌患者血清VEGF及TK1水平的相關分析 從表1和表2可以看出，從正常對照組，乳腺良性病變組到乳腺癌組VEGF及TK1濃度不斷升高，且隨著乳腺癌血清中TK1表達量升高，VEGF水平也升高，兩者之間存在呈正相關關系。TK1是乳腺癌的致癌因子，主要起到促進乳腺癌形成和加速其發展的作用;VEGF對乳腺癌淋巴結轉移具有間接促進作用，有助于判斷有無淋巴結轉移及預后。

表2 有否腋窩淋巴結轉移者血清VEGF及TK1測定結果(±s)

表2 有否腋窩淋巴結轉移者血清VEGF及TK1測定結果(±s)

注:陽性與陰性比較，△P＜0.05。

淋巴轉移情況 例數 年齡(歲) VEGF(ng/l) TK1(pg/ml) 22 54±2 136.40±11.89 7.06±2.13有淋巴結轉移 14 57±5 310.11±28.50△ 3.48±1.16無淋巴結轉移△

3 討論

乳腺癌是最為常見的婦科惡性腫瘤之一，其預后的判斷是一個眾所關注的問題。關于乳腺癌發生的分子機制尚不清楚，其發生是由一系列基因損傷所致基因突變的累積誘導效應下原癌基因的激活以及抑癌基因失活，繼而引發細胞的過度增殖或異常的程序性死亡。VEGF是.從牛垂體濾泡星狀細胞的體外培養液中純化出一種特異性作用于血管內皮細胞(EC)并促進有絲分裂的物質，VEGF作為特異性的新生淋巴管刺激因子，可調節腫瘤周淋巴血管生成，腫瘤VEGF過表達引起外周淋巴管直徑增加。可以認為VEGF是淋巴管內皮細胞和新生淋巴管的特異性標志物［3］。因此VEGF是腫瘤血管生長及腫瘤生長和轉移的關鍵因素。Mokbel［4］報道，富于VEGF的乳腺癌病例，其預后明顯比VEGF表達弱者差，認為乳腺癌VEGF的表達與血管生成及早期復發有關。

TK1為一種嘧啶補救合成DNA的關鍵酶，是一個S期特殊酶。TK1水平的升降與DNA在細胞周期S期的合成速度密切相關，腫瘤增殖細胞TK1的水平在細胞周期的G1和S期交界處開始升高，隨著細胞進入G1晚期，TK1的水平逐漸上升，直至S和G2期交界處。這種高TK1水平從S晚期持續到M早期。TK1在非增殖細胞和健康人血清中含量極微或檢測不到，但隨著腫瘤細胞的急劇增殖而升高。大量研究表明，TK1檢測適用于臨床腫瘤的治療效果監測和預后評估，以及對健康人群發生惡性腫瘤風險的早期預測和篩查［5-6］。從上述試驗結果表明，乳腺癌患者組和健康體檢組比較差異有顯著性(P＜0.05)，由此可見TK1作為輔助診斷機體是否患有乳腺癌作用非常明顯，雖然TK1的特異性不高，但TK1有較高的敏感性，因此對早期乳腺癌的發現有很大的輔助作用。本文研究顯示，乳腺癌患者血清TK1水平明顯高于正常對照組，進一步證明了高水平TK1對乳腺癌的發生具有重要的促進作用，是女性乳腺癌發生的危險因素。

本文研究結果顯示，乳腺癌患者血清VEGF及TK1均顯著高于正常人，二者濃度過高均可能是發生乳腺癌的危險因素，在其發生發展過程中發揮著重要作用。VEGF及TK1水平存在正相關，這表明VEGF及TK1參與了乳腺血管的病變過程，當TK1濃度過高時，引起DNA復制、轉錄異常，從而促進腫瘤發生［7］。乳腺癌患者血清VEGF及TK1水平隨淋巴結轉移而增加，差別具有統計學意義(P＜0.05)，這些對乳腺癌患者的疾病的嚴重程度也有一定的臨床參考價值。目前多數研究認為腫瘤中VEGF含量可以作為預后因子，其高表達預示著患者無瘤生存率(RFS)和總體生存率(OS)的降低［8］，Salven［9］研究發現乳腺良性腫瘤患者的可溶性 VEGF(SVEGF)不高于328 pg/ml，局限性乳腺癌患者的S-VEGF范圍是11～539 pg/ml，有轉移乳腺癌患者的S-VEGF范圍是7～1347 pg/ml，表明乳腺癌的播散伴隨循環中VEGF水平的提高。由此可見，VEGF是對乳腺癌預后價值預測的理想標志物。

VEGF可促進乳腺癌血管形成，進而促進乳腺癌的生長、浸潤和轉移。TK1具有致癌性的主要原因是它能刺激乳腺細胞的過度增殖。TK1濃度大于風險值的，較大一部份都伴隨著一些亞健康疾病。隨著年齡的增長，生理進程差異，腫瘤病變的頻率逐漸增加，可能出現TK1有意義的升高變化。TK1檢測增高的體檢者應定期檢測，若TK1連續幾次檢測都為陽性且有持續上升趨勢，則高度注意急躁早期診斷和預防乳腺癌的發生。

綜上所述，VEGF及TK1可作為反映乳腺癌生物學行為的指標之一。根據本文結果，我們認為，乳腺癌的VEGF和TK1表達明顯高于乳腺良性病變;VEGF陰性的乳腺癌預后較好;VEGF可以作為乳腺癌的預后指標。聯合檢測VEGF及TK1水平可以更好地為臨床判斷預后及治療提供參考依據。可為乳腺癌的預防及臨床干預起到重要的指導作用，對乳腺癌的預防可起到積極作用，降低乳腺癌的發生風險。

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［3］ Purushotham AD，Bennett Britton TM，Klevesath MB，et al.Lymph node status and breast cancer-related lymphedema［J］.Ann Surg，2007，12(6):42-45.

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