劉 杰,韓國全,舒 蕾,劉 丹,潘海波,李鄉城,顏其貴,b*
(1.四川農業大學 a動物醫學學院 b動物疫病與人類健康四川省重點實驗室,四川 雅安 625014;2.四川農業大學動物營養研究所,四川 成都 611130)
某豬場,存欄育肥豬500頭,仔豬200頭。2012年春節前后全場母豬、仔豬均發生不同程度腹瀉,其中尤以仔豬發病最為嚴重,發病率達90%,仔豬初乳過后,即發生腹瀉,發病后6 d左右死亡,死亡率達80%。
多為2日齡仔豬,初乳過后即發生水樣或糊狀腹瀉,糞便呈黃色,常混有未消化的凝乳塊,4~5日齡精神委頓、嚴重脫水,四肢乏力,發病后6 d左右死亡,造成嚴重經濟損失。
剖檢7頭4日齡病豬,其中1頭為病死豬,豬體多為臟、臭、消瘦,胃腸鼓脹;小腸變薄、脹氣、半透明,腸道內充滿酸臭的凝乳塊及泡沫樣液體;腸系膜充血,腸系膜淋巴結腫大,肝臟腫大,腎臟有出血點。
無菌采集7頭病死豬小腸、肝臟等組織。將病豬的小腸、肝臟組織病料無菌接種到普通瓊脂平板、血清瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板及伊紅美藍瓊脂平板,置37 ℃培養。18~24 h后,普通瓊脂平板及血清瓊脂平板均長出均一的、表面隆起、圓滑、半透明菌落;麥康凱瓊脂平板上的菌落呈紅色;伊紅美藍瓊脂平板上形成黑色、具有金屬光澤菌落,鏡檢如圖1。挑取單個菌落經革蘭氏染色呈陰性,生化鑒定結果符合大腸桿菌特性,綜合判定優勢菌為大腸桿菌。

圖1 大腸桿菌鏡檢100×10
挑取典型大腸桿菌單個菌落,接種于普通LB肉湯培養基,37 ℃振蕩培養10 h,取培養物0.2 mL接種小鼠,24 h后試驗小鼠全部死亡;另取培養物3倍稀釋后涂布于LB培養基,待其干后,將藥敏片貼于培養基表面,倒置培養10 h后,觀察并記錄其抑菌圈大小,并判定其耐藥性。
根據臨床癥狀和剖檢觀察,初步判定為豬流行性腹瀉(PED)或豬傳染性胃腸炎(TGE),隨機取2頭病豬小腸組織研磨成懸濁液后利用酚氯仿法抽提送檢組織總RNA,利用本實驗室建立的RT-PCR方法對采集病料進行了豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎的檢測。將產物經1%瓊脂糖凝膠電泳。結果如圖2,TGEV陽性,PEDV陰性。
根據流行病學調查、臨床癥狀觀察、病例剖檢和實驗室診斷,確診為豬傳染性胃腸炎繼發大腸桿菌感染,對該場采取以下防治措施:
加強豬舍環境消毒和飼養管理,搞好豬舍環境衛生,注意防寒保暖。但要防止豬舍潮濕悶熱,保持舍內空氣新鮮,提高豬群健康水平,增強抗病力。
做好防疫注射工作。用傳染性胃腸炎和流行性腹瀉疫苗進行預防免疫:妊娠母豬于產前20~30 d注射2 mL/頭,初生仔豬注射0.5 mL/頭,10~50 kg豬注射1 mL/頭,50 kg以上育肥豬注射2 mL/頭。免疫期均為6個月。
補充電解質、維生素等營養物質和黃芪多糖等免疫增強藥物,加強豬群健康程度和機體免疫抵抗力;黃芪多糖+電解多維,按說明配制,自由飲用。

圖2 傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病原檢測結果

表1 分離大腸桿菌對12種常見藥物的敏感性試驗 mm
對于腹瀉仔豬進行對癥治療,采取口服補液鹽、葡萄糖、電解多維等方式進行補液防止脫水、脫鹽。
抗生素類藥物推薦采用頭孢曲松鈉、氧氟沙星、環丙沙星等。
通過以上措施,患病仔豬病情減輕、精神好轉,仔豬發病率明顯降低。
豬傳染性胃腸炎是由冠狀病毒科冠狀病毒屬的豬傳染性胃腸炎病毒引起的一種高度接觸性消化道傳染病,一般2周齡以內的仔豬感染后12~24 h會出現嘔吐,繼而出現嚴重的水樣或糊狀腹瀉,糞便呈黃色,常夾有未消化的凝乳塊,兩周齡內高死亡率為主要特征[1],常繼發細菌感染[2]。
豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉均是由冠狀病毒引起的以仔豬發生嘔吐、腹瀉和脫水為顯著臨床癥狀的兩種傳染病[3],其流行病學、病理變化極其相似[4],難以鑒別診斷。目前,國內對這兩種病的鑒別診斷方法主要有病毒中和試驗、免疫熒光法、免疫電鏡法、ELISA 法和RT-PCR 法。 其中ELISA 法和RT-PCR法具有敏感性高、特異性強、生產成本低等優點。在本次診斷利用RT-PCR 法對病樣進行了快速、準確、高效診斷,使養殖場快速控制了疫情,減少了經濟損失。
對豬傳染性胃腸炎的治療,目前雖然沒有安全而有效的藥物[5],通過對癥治療,可以防止并發癥發生的同時,也能提高豬對疾病的抵抗能力,并對減少豬只死亡和促進仔豬的生長發育都有很大的益處。目前報道的對癥治療方法的研究除了限量飼喂或饑餓治療、補充體液、應用部分抗菌藥物外,對于中草藥治療的研究日益興起,并且取得了一定程度的療效[6]。利用中草藥治療具有副作用小,無抗生素殘留等優點。
在本次病例診斷過程中,通過采取上述防治措施,有效地控制了發病豬場疫情,為豬場應對豬傳染性胃腸炎提供了防治的參考方案。
[1] 陳健雄,楊玉堅.豬傳染性胃腸炎的臨床診斷和防制[J].養豬,2008(1):65-67.
[2] 任玉鵬,王利娜,顏其貴,等.豬流行性腹瀉的預防與控制[J]. 豬業科學, 2010(12): 36-39.
[3] 張坤,何啟蓋.豬流行性腹瀉病毒,豬傳染性胃腸炎病毒和豬 A 群輪狀病毒多重RT-PCR 檢測方法的建立及臨床應用[J].畜牧獸醫學報,2010,41(8): 1001-1005.
[4] Chae C, Kim O, Cho C, et al. Prevalence of porcine epidemic diarrhoea virus and transmissible gastroenteritis virus in Korea pigs [J]. J Vet Res, 2000, 147(21): 606-608.
[5] 張春葉,沈紅,陳永杰,等.豬傳染性胃腸炎預防和治療的研究進展[J].中國農學通報,2010,26(1):5-8.
[6] 陳會良.豬傳染性胃腸炎的診治[J].畜牧與飼料科學,2009, 30(7-8): 24-28.