利拉魯肽對糖耐量異常大鼠血清炎癥指標的影響

郭南京，孫 嘉，湛 奕，陳 宏，張 樺，蔡德鴻

(南方醫科大學珠江醫院，廣州510282)

目前，我國糖尿病(DM)及DM前期人群逐漸增多。DM是心血管疾病的主要危險因素，其心血管疾病發病率高，已成為我國主要的公共健康難題之一［1］。DM前期是一種低度炎癥狀態，包括糖耐量受損和(或)糖耐量異常(IGT)，其DM及心血管疾病的發病率較高;炎癥在DM及心血管疾病的發生、發展中發揮重要作用［2，3］。利拉魯肽是胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)類似物，其生理作用與天然GLP-1相似，能通過改善胰島細胞功能及胰島素敏感性等機制發揮降糖作用［4］。目前，國內關于利拉魯肽對DM前期抗炎作用的研究少見報道。2010～2011年，我們以自發性IGT-OLETF大鼠模型作為研究對象，觀察了利拉魯肽對IGT大鼠血清炎癥指標的影響。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 4周齡雄性OLETF大鼠或同種系同周齡LETO大鼠8只(日本大冢制藥株式會社德島研究所贈送)，以標準飼料飼養。12周齡符合IGT的OLETF大鼠29只。利拉魯肽由諾和諾德(中國)制藥公司提供;胰島素及炎癥指標［IL-6、超敏C反應蛋白(hs-CRP)、纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)、纖維蛋白原(Fib)］ELISA試劑盒購自武漢中美科技公司。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 將29只IGT的OLETF大鼠隨機分成4組，其中生理鹽水(NS)干預8只(NS組)，利魯拉肽50、100、200 μg/kg干預分別為8、6、7只(50、100、200 μg/kg組);均行腹腔注射，2次/d，共12周。8只OLETF或LETO大鼠(正常組)腹腔注射NS，2次/d，共12周。

1.2.2 檢測方法 各組干預12周后行葡萄糖耐量試驗，試驗前隔夜禁食、不禁水。試驗時，將50%葡萄糖2 g/kg注入胃管，采集鼠尾靜脈血15 μL，采用穩豪?倍優型血糖儀檢測各組空腹血糖(FPG)、2 h空腹血糖(2 h PG);ELISA法檢測血清胰島素(FIns)。根據公式計算胰島素敏感性指數(ISI=1/ FPG×FIns)、胰島素抵抗指數(HOMA-IR=FPG× FIns/22.5)、胰島β細胞功能指數［HOMA-β=20× FIns/(FPG－3.5)］。FPG≥16.7 mmol/L、2 h PG≥11.1 mmol/L診斷為DM，具備兩者之一診斷為IGT［5］。同時取空腹靜脈血1.5 mL，采用ELISA法檢測血清IL-6、hs-CRP、PAI-1、Fib。

1.2.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件，數據以s表示，多組間比較用ANOVA分析。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血糖、胰島細胞功能及胰島素敏感性指標比較 干預12周后，與NS組比較，利拉魯肽干預組FPG、2 h PG明顯降低，HOMA-β、ISI及HOMA-IR明顯改善(P均＜0.05)。見表1。

表1 各組血糖、胰島細胞功能及胰島素敏感性指標比較(s)

表1 各組血糖、胰島細胞功能及胰島素敏感性指標比較(s)

注:與NS組比較，#P＜0.05

組別 n FPG(mmol/L) 2 h PG(mmol/L) ISI HOMA-IR HOMA-β正常組 8 5.46±0.24# 6.54±0.28# 6.29±0.39# 7.28±0.50# 331.16±34.94# NS組 8 8.54±0.35 11.99±0.24 2.36±0.17 19.55±1.54 205.75±7.42利魯拉肽50 μg組 8 6.35±0.22# 7.35±0.42# 4.06±0.25# 11.27±0.78# 290.99±27.50# 100 μg組 6 6.22±0.18# 7.03±0.21# 4.34±0.33# 10.54±0.78# 288.62±31.44# 200 μg組 7 6.21±0.31# 7.27±0.19# 4.73±0.59# 10.40±1.37# 294.41±40.98#

2.2 各組血清炎癥指標比較 干預12周后，與NS組比較，利拉魯肽干預組各血清炎癥指標均明顯降低(P均＜0.05)。見表2。

表2 各組血清炎癥指標比較(s)

表2 各組血清炎癥指標比較(s)

注:與NS組比較，#P＜0.05

組別 n hs-CRP (ng/mL) IL-6 (pg/mL) PAI-1 (ng/mL) Fib (U/mL)正常組 8 4.22±0.45#4.73±0.50#22.03±9.85#62.51±4.64# NS組 8 5.72±0.31 8.72±0.34 63.37±4.93 94.20±2.33利魯拉肽50 μg組 8 4.14±0.43#5.63±0.52#27.74±10.62#80.45±3.54# 100 μg組 6 3.90±0.48#4.79±0.90#37.34±21.88#81.60±3.40# 200 μg組 7 3.68±0.34#5.11±0.74#34.07±12.61#78.15±5.42#

3 討論

近年來，DM患者逐漸增加。截至2007年，中國成人總的DM患病率為9.7%，DM前期患病率為15.5%;據此估計，我國約有DM患者1億、DM前期人群1.5億。DM前期是一種低度炎癥狀態，具有較高的DM及心血管疾病發病率。因此，預防DM前期對于減少DM及心血管疾病發病率非常重要。

利拉魯肽是GLP-1類似物，是治療T2DM的新型藥物。該藥具有抑制胰高血糖素分泌、促進胰島β細胞增生、抑制細胞凋亡、改善胰島功能、抑制食欲、減輕體質量等作用。本研究顯示，與正常大鼠比較，IGT-OLETF大鼠經NS干預12周后，其血糖及炎癥指標明顯升高，胰島素敏感性及胰島細胞功能明顯減退;而采用利拉魯肽干預的IGT-OLETF大鼠的血糖、胰島素敏感性及胰島細胞功能則明顯改善，炎癥指標明顯降低。表明利拉魯肽能過通過改善大鼠的胰島素敏感性及胰島細胞功能，改善其IGT，延緩甚至阻止DM發生發展;提示利拉魯肽可作為預防DM的藥物選擇。本研究結果與國外文獻報道［6］一致。

DM、DM前期及心血管疾病都有炎癥病變的病理基礎，炎癥可影響其疾病的發生、發展及預后轉歸。DM及DM前期的心血管疾病發病率較高，對DM、DM前期進行干預治療，雖能明顯降低心血管疾病發病率，但嚴格的血糖控制卻未能減少大血管事件發生［7，8］。既往研究顯示，IGT人群的炎癥指標IL-6、hs-CRP、PAI-1、Fib明顯升高，這些炎癥因子也是重要的心血管危險因子［7，9，10］。鑒于炎癥在DM、DM前期及心血管疾病中的作用，我們觀察了利拉魯肽治療對IGT-OLETF大鼠抗炎及潛在的心血管保護作用。本研究顯示，IGT-OLETF大鼠經利拉魯肽干預后，其血清炎癥指標明顯降低;提示利拉魯肽有潛在的抗炎及心血管保護作用。

綜上所述，利拉魯肽能改善IGT-OLETF大鼠的糖代謝及炎癥狀態，具有潛在的預防DM及心血管疾病發生的作用。這種預防作用可能與其有抗炎、改善胰島素敏感性和保護胰島β細胞功能的作用相關，但其對心血管疾病的預防作用仍待進一步臨床研究證實。

［1］Yang W，Lu J，Weng J，et al.Prevalence of diabetes among men and women in China［J］.N Engl J Med，2010，12(362):1090-1101.

［2］Masters SL，Latz E，O'Neill LA.The inflammasome in atherosclerosis and type 2 diabetes［J］.Sci Transl Med，2011，81(3):17-81.

［3］Ceriello A.Impaired glucose tolerance and cardiovascular disease: the possible role of post-prandial hyperglycemia［J］.Am Heart J， 2004，5(147):803-807.

［4］Wajcberg E，Amarah A.Liraglutide in the management of type 2 diabetes［J］.Drug Des Devel Ther，2010，(4):279-290.

［5］Kawano K，Hirashima T，Mori S，et al.Spontaneous long-term hyperglycemic rat with diabetic complications.Otsuka long-evans tokushima fatty(OLETF)strain［J］.Diabetes，1992，11(41):1422-1428.

［6］Cummings BP，Stanhope KL，Graham JL，et al.Chronic administration of the glucagon-like peptide-1 analog，liraglutide，delays the onset of diabetes and lowers triglycerides in UCD-T2DM rats［J］.Diabetes，2010，10(59):2653-2661.

［7］Chiasson JL，Josse RG，Gomis R，et al.Acarbose treatment and the risk of cardiovascular disease and hypertension in patients with impaired glucose tolerance:the STOP-NIDDM trial［J］.JAMA，2003，4(290):486-494.

［8］Schernthaner G.Diabetes and cardiovascular disease:is intensive glucose control beneficial or deadly?Lessons from ACCORD，ADVANCE，VADT，UKPDS，PROactive，and NICE-SUGAR［J］.Wien Med Wochenschr，2010，160(1-2):8-19.

［9］Muller S，Martin S，Koenig W，et al.Impaired glucose tolerance is associated with increased serum concentrations of interleukin 6 and co-regulated acute-phase proteins but not TNF-alpha or its receptors［J］.Diabetologia，2002，6(45):805-812.

［10］Okopien B，Krysiak R，Herman ZS.Effects of short-term fenofibrate treatment on circulating markers of inflammation and hemostasis in patients with impaired glucose tolerance［J］.J Clin Endocrinol Metab，2006，5(91):1770-1778.