高效液相色譜法測定香砂養(yǎng)胃丸中α-香附酮的含量

屠 瑩

（天津市胸科醫(yī)院藥劑科，天津 300051）

高效液相色譜法測定香砂養(yǎng)胃丸中α-香附酮的含量

屠 瑩

（天津市胸科醫(yī)院藥劑科，天津 300051）

[目的]建立香砂養(yǎng)胃丸中香附的α-香附酮含量測定方法。[方法]采用Agilent ZORBAX TC-C18
（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱；以甲醇-水（75∶25）為流動(dòng)相；流速為 1.0 mL/min；檢測波長為 250 nm。[結(jié)果]α-香附酮在0.005 5～0.55 μg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.999 9），平均回收率為102.36%，RSD為1.75%（n＝6）。[結(jié)論]該法簡便、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于香砂養(yǎng)胃丸的質(zhì)量控制。

香砂養(yǎng)胃丸；α-香附酮；含量測定；高效液相色譜法

香砂養(yǎng)胃丸由木香、厚樸(姜制)、白術(shù)、香附、陳皮、甘草等14味藥組成，具有溫中和胃的功能[1]。主要用于不思飲食，嘔吐酸水，胃脘滿悶，四肢倦怠等治療。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國藥典》[2]，原標(biāo)準(zhǔn)中僅有對厚樸酚的含量測定，目前文獻(xiàn)中也僅有少量有關(guān)香砂養(yǎng)胃丸中橙皮苷含量測定的報(bào)道[3]，為了更有效地控制藥品質(zhì)量，現(xiàn)以α-香附酮為定量指標(biāo)，建立高效液相色譜法（HPLC）測定樣品中香附的含量測定方法。

1 儀器與試藥

Agilent-1200高效液相色譜儀（自動(dòng)進(jìn)樣器、紫外－可見檢測器）。α-香附酮對照品（中國藥品生物制品檢定所購置，批號(hào)：110748－200110），為供含量測定用。香砂養(yǎng)胃丸（河南宛西制藥股份有限公司，批號(hào)：080601，080602，080603）甲醇（色譜純，天津市康科德科技有限公司），磷酸（分析純），水為去離子水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent ZORBAX TC-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（75∶25）；流速：1.0mL/min；檢測波長：250nm；進(jìn)樣量為 10μL。理論板數(shù)按α-香附酮峰計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

2.2 溶液配制

2.2.1 對照品溶液的制備 取α-香附酮對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含α-香附酮30μg的溶液，即得。結(jié)果見圖1。

2.2.2 供試品溶液的制備 取同一批號(hào)（080603）

樣品適量，研細(xì)，取0.5 g，精密稱定，精密加入80%甲醇25 mL，稱定質(zhì)量，超聲提取60 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用80%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，即得。結(jié)果見圖2。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 按處方配比，制備不含香附的陰性對照，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制得陰性樣品溶液。結(jié)果見圖3。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取α-香附酮對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成濃度為每1mL中含α-香附酮 0.55、2.75、13.75、27.5、55 μg的對照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，以進(jìn)樣濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。α-香附酮的回歸方程為：Y=7.395＋127.25X（r=0.999 9）。結(jié)果表明α-香附酮在0.005 5～0.55 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.4 精密度實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)（080603）樣品0.50g，精密稱定，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品，重復(fù)進(jìn)樣6次，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定峰面積，測得樣品中α-香附酮峰面積平均值為350，RSD為0.86%。表明儀器精密度良好。

2.5 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)（080603）樣品6份，精密稱定，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，樣品中α-香附酮含量平均值為0.32 mg/g，RSD為1.59%。結(jié)果表明該測定方法重現(xiàn)性良好。

2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)（080603）樣品0.50g，精密稱定，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品，分別在 0、2、4、8、12、24 h 進(jìn)樣，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，測得樣品中α-香附酮峰面積平均值為363，RSD為1.45%。表明樣品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 回收率實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)（080603）樣品0.25g，共6份，精密稱定，分別精密加入每1 mL中含α-香附酮3.2 μg的對照品溶液25 mL，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備，制得供回收率用供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，計(jì)算回收率。結(jié)果α-香附酮平均回收率為102.36%，RSD為1.75%。

2.8 樣品測定 取3個(gè)不同批號(hào)的樣品，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，計(jì)算樣品中α-香附酮的總量。結(jié)果見表1。

表1 3批樣品含量測定結(jié)果Tab.1 The contents of α-Cyperone in the 3 of samples mg/g

3 討論

α-香附酮為方中香附的主要成分，由于其為較強(qiáng)的前列腺素生物合成抑制劑，故也是鎮(zhèn)痛作用的主要成分之一[2]。因此選擇對α-香附酮進(jìn)行含量測定，可以有效控制香附的質(zhì)量，進(jìn)而控制香砂養(yǎng)胃丸的質(zhì)量。

吸收波長的選擇：按“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液制備方法制得溶液，在紫外分光光度計(jì)200～400 nm范圍內(nèi)掃描。結(jié)果α-香附酮在250 nm處有最大吸收，且香砂養(yǎng)胃丸中其他成分在此處無干擾，故選擇250 nm為檢測波長。

流動(dòng)相的選擇：根據(jù)文獻(xiàn)色譜條件[5]，本實(shí)驗(yàn)對流動(dòng)相選擇進(jìn)行了篩選，分別采用甲醇－水（68∶32）及甲醇－水（75∶25）為流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果采用甲醇－水（75∶25）分析時(shí)間適宜，分離效果較好。

[1]肖文平，高 雄.高效液相色譜法測定香砂養(yǎng)胃丸中厚樸酚的含量[J].湖北中醫(yī)雜志，2011，33（3）：70-71.

[2] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：779.

[3] 黃險(xiǎn)峰，彭國平.香附的化學(xué)成分及藥理研究進(jìn)展[J］.中藥材，2003，26（1）：65－68.

[4] 梁從慶，羅源生.高效液相色譜法測定香附油中α-香附酮的含量[J].中藥材，2004，27（8）：578－579.

[5] 梁從慶，羅源生.高效液相色譜法測定香附油α-香附酮的含量[J].中藥材，2004，27（18）：578-579.

Determination of α-Cyperone in Xiangsha Yangwei pills by HPLC

TU Ying
（Department of Pharmacy，Tianjin Chest Hospital,Tianjin 300051,China）

[Objective]To develop an HPLC method for the determination of α-Cyperone in Xiangsha Yangwei pills.[Methods]Analyses were carried out on Agilent ZORBAX TC-C18 column(250 mm ×4.6 mm,5μm)with methanol-water(75∶25)as the mobile phase.The flow rate was 1.0 mL/min and the UV detection wavelength was set at 250 nm.[Results]The linearities of α-Cyperon were in the range of 0.005 5～0.55 μg/mL(r=0.999 9).The average recoveries of α-Cyperon were 102.36%.The RSD were 1.75%(n=6).[Conclusion]The method is simple,accurate,strongly specific and can be used for the quality control of Xiangsha Yangwei pills.

Xiangsha Yangwei pills;α-Cyperone;determination;HPLC

R284.2

A

1672-1519（2012）05-0487-02

屠 瑩（1983-），女，碩士，藥師，主要從事醫(yī)院藥學(xué)工作。

2012-06-15）

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