EP7.0和USP34兩版本藥典中撲米酮相關雜質檢測方法探討

徐飛

(南通精華制藥股份有限公司，江蘇南通226006)

撲米酮是本公司生產三十幾年的一個原料藥，也是現今國內唯一一家生產商，撲米酮主要用于癲癇大發作和精神運動性發作。服用量從小劑量逐漸遞增，一周后增至常用量，口服一次0.25g。本公司在2005年將該品種在歐洲注冊且取得了 CEP證書，CEP證書號為 R0－CEP2005－109－Rev01，公司本品種現生產Ch.P2010，EP7.0和USP34三個版本規格。歐洲藥典撲米酮從EP5.0開始采用HPLC方法檢測相關雜質，美國藥典從USP34采用HPLC方法檢測相關雜質，兩個藥典側重點有些差異，現對其方法進行研討［1，2］。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津LC－20AT高效液相色譜儀。LC－20AT泵，SIL－20A自動進樣器，SPD－20A檢測器，LC solution工作站。

1.2 藥品和試劑 EP7.0版本標準品:撲米酮標準品(來源批號1)，撲米酮峰鑒別標準品(包含雜質A，B，C，D，E，F) (來源批號:n。1)(均從EDQM購買)，(雜質B)苯巴比妥二級標準品(本公司制備);USP34版本標準品:撲米酮標準品(批號LOTHOD399)，苯巴比妥標準品(批號KOH134)，撲米酮有關物質C標準品(批號LOTFOI107)，均從美國USP購買。甲醇為色譜純(Merk公司)，其余試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 流動相:溶液A:1.36 g·L－1磷酸二氫鉀，溶液B:甲醇，流速:3.2 mL·min－1，檢測波長:215 nm，進樣量:10 μL，使用自身對照溶液進行外標法進行各雜質含量計算。色譜柱(USP34):Merck Chromolith Performance RP－18e (4.6 mm×100 mm);色譜柱(EP7.0):Merck Chromolith Performance RP－18e(4.6 mm×150 mm)流動相比例如表1。

2.2 樣品制備

表1 流動相比例

圖1 EP7.0D的系統適應性圖譜

圖2 USP34的系統適應性圖譜

2.2.1 USP34標準對照溶液的制備 稱取撲米酮標準品10 mg，用甲醇定容至10 mL(即1 000 μg·mL－1的標準儲備液)，精密吸取此溶液1.0 mL，用甲醇定容至100 mL，再吸取1.0 mL此溶液用甲醇定容至10 mL，此對照液用于各雜質的含量計算。系統適應性溶液:精密稱取苯巴比妥標準品1 mg與撲米酮相關化合物C標準品1mg至100 mL容量瓶，用1 000 μg·mL－1的撲米酮標準儲備液稀釋至刻度，此溶液用于計算分離度和拖尾因子及鑒定峰。

EP7.0標準對照溶液a:用甲醇將1.0 mL測試液稀釋至100 mL，再用甲醇將1.0 mL此溶液稀釋至10.0 mL，此對照液用于各雜質的含量計算。系統適應性溶液:將5mg用于峰鑒別的標準品(含有雜質A、B、C、D、E、F)溶于5 mL甲醇，此溶液用于各雜質峰鑒定和計算分離度。

2.2.2 兩版本藥典相關雜質的規格要求比較 見表2。

表2 兩版本藥典方法相關雜質規格要求

2.2.3 系統應用性比較 見表3。

表3 兩版本藥典方法系統應用性比較

2.2.4 檢出限和定量限的對比 見表4。

表4 兩版本藥典方法檢出限和定量限對比

2.2.5 樣品測試對比 見表5。

表5 兩版本藥典方法樣品測試對比

3 討論

對于撲米酮的EP7.0和USP34相關雜質測試方法，除色譜柱長度不一樣外，其流動相、波長、流速、進樣量等均一樣。從以上兩個版本的方法、質量標準規格、系統適用性、檢測限、定量限和三批樣品分析等幾方面可以看出，EP7.0的測試方法因其相當校正因子比USP34的大，所以其對雜質的控制要求更加嚴格，從系統適用性可以看出EP7.0的測試方法分離效果更好一些，檢出限和定量限EP7.0的測試方法也稍稍更好一點，從樣品測試也可知EP7.0的測試方法稍更靈敏有效。且我公司生產的所有批次撲米酮均能符合EP7.0和USP34的質量要求。

［1］ 韓雪梅，李娟，張偉.氨磺必利有關物質檢測方法的研究［J］.齊魯藥事，2011，30(8):461－463.

［2］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄.