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原子吸收光譜法測定血清鋅、銅、鐵、鈣、鎂

2012-01-30 03:53:30王景平天津市東麗區萬新街社區衛生服務中心300163
醫學理論與實踐 2012年15期
關鍵詞:血清

王景平 天津市東麗區萬新街社區衛生服務中心 300163

鋅、銅、鐵、鈣和鎂5種微量元素都是人體必需的,缺鋅(Zn)導致發育不良,缺鐵(Fe)導致貧血、免疫力低下,缺銅(Cu)元素會導致不育、早產、心血管疾病,缺鈣(Ca)會誘發軟骨病、痙攣、畸形、骨質疏松,鎂(Mg)元素是構成骨骼牙齒的主要成分,還可以調節神經和肌肉的活動,維持體內的酸堿平衡,以及激活體內多種酶,人體缺鎂會震顫,手足顫動,隨著科技進步更多的人體微量元素研究問世,同時也對人體的健康有著積極地指導意義[1]。筆者采用原子吸收光譜法測定血清中以上5種元素含量,并得出參考值范圍。

1 材料和方法

1.1 儀器、試劑

1.1.1 儀器。GGX-9A型原子吸收分光光度計(北京地質儀器廠);80-1型離心機(天津華北實驗儀器有限公司);WKY型微量移液管(上海求精生化試劑儀器有限公司)。

1.1.2 試劑及其配制。Zn、Cu、Fe標準儲備液100mg/L(國家標準物質中心),用時稀釋至10mg/L備用。Ca、Mg標準儲備液1 000mg/L(國家標準物質中心),用時稀釋至100mg/L備用。曲拉通(德國默克試劑集團);硝酸(天津試劑五廠,AR);鹽酸(天津試劑五廠,AR);氯化鈉(天津試劑五廠,AR);氧化鑭(天津試劑五廠,AR);曲拉通與硝酸混合液:取曲拉通141ml,加硝酸30ml用二次蒸餾水定容至3L,用時稀釋10倍后備用。鑭鹽與氯化鈉混合液:取氧化鑭287g加100ml二次蒸餾水、436ml鹽酸、30g氯化鈉最后定容至3L,用時稀釋4倍后備用。實驗用水為二次蒸餾水。

1.2 實驗步驟

1.2.1 樣品的預處理。取事先存放在冰箱保存的全血樣品,上離心機離心2min,然后用微量取樣器分取500μl血清于5ml已經烘干干凈小塑料管中,加入2ml稀釋后的曲拉通與硝酸的混合液,搖勻備用,此試樣用于血清中Zn、Cu、Fe的測定。再分取100μl血清于5ml已經烘干干凈小塑料管中,加入2.0ml稀釋后的鑭鹽與氯化鈉的混合液,搖勻備用,此試樣用于Ca、Mg血清中的測定。

1.2.2 校準曲線的繪制。取Zn、Cu、Fe標準使用液10mg/L,(此使用液三種元素可以配在一起),分別吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于100ml容量瓶中,用稀釋后的曲拉通和硝酸混合液稀釋至刻度,此標準溶液曲線分別為0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mg/L,搖 勻 備 用。取 Ca 標 準 使 用 液100mg/L,分別吸取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于100ml容量瓶中,用稀釋后的鑭鹽和氯化鈉的混合液稀釋至刻度,此標準溶液曲線為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mg/L,和 Ca的標準曲線配制一樣,配成 Mg的校準曲線為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/L,搖勻備用。

2 結果

按上述選定的工作條件參數見表1。

校準曲線的線性回歸方程及相關系數見表2,對試樣進行平行6次的測定,精密度結果見表3,加標回收率見表4。

表2 校準曲線的線性回歸方程及相關系數

表3 精密度測試結果

3 討論

3.1 本法采用混合試劑直接稀釋樣品,不用消解直接上機測定,避免了待測元素的損失,實驗證明此法方便快速,重現性好,靈敏度高,極其適合大批樣品的測定,測定結果在校準曲線范圍內。

表4 加標回收率測試結果(mg/L)

3.2 由表3看出,人體血清中鈣元素的含量較高,相當于鎂元素的5倍,其余3種元素相對比較接近,筆者檢測100份正常健康體檢者血清樣本,按照檢測平均值±2倍標準差作為參考值范圍,則Cu:0.90~2.00mg/L,Zn:0.90~2.00mg/L,Fe:0.90~3.00mg/L,Ca:95.0~115.0mg/L,Mg:21.0~25.0mg/L。其中注意如果血清溶血則鐵元素含量大于3.00mg/L,這時候測定的鐵元素的數值不準確,需取樣品重新測定。

3.3 實驗結果表明此5種元素的回收率很好,說明該方法的可靠性好,準確度高,簡單、快速易于掌握。

[1]單云.原子吸收法同時測定大豆及其乳制品中Zn、Cu、Fe、Ca、Mg〔J〕.光譜實驗室,1998,15(2):94-95.

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