劉德穩
(德州學院農學系,山東 德州 253023)
2011年8月下旬,山東文登某水貂養殖場斷乳分窩10d左右的幼貂突然發生拉稀,病情較急,很快波及同期斷乳幼貂和哺乳貂,經痢特靈、頭孢噻呋鈉、免疫球蛋白抗病毒等藥物治療3d后,拉稀癥狀沒有得到控制,并出現12只死亡。
發病初期患貂表現不安,不斷尖叫,之后病貂出現腹瀉,糞便初期為灰白色并帶有黏液和泡沫,精神沉郁,體溫升高(40℃以上),呼吸急促,食欲減退或廢絕,嚴重病例發生嘔吐,輕按腹部時,流出黃綠色糞便,嚴重時呈水樣血便。四肢軟弱無力,病后期麻痹,有的出現持續性痙攣或昏迷狀態,最后衰竭死亡。哺乳貂排出未經消化好的凝乳塊,有時混有血液,肛門四周、尾部、后肢被糞便污染,被毛常粘在一起,病貂很快衰弱,一般3d死亡,慢性病例經5~6 d死亡。
對病死或瀕死水貂進行了剖檢,病理變化基本一致,被毛蓬亂不潔,肛門和后軀附有少量糞便。肺淤血實變,切之有淡紅色泡沫樣液體流出;心臟呈淡紅色,心內膜條狀出血,胸腔個別有滲出性出血,腸壁變薄、臌氣,腸管內有黃綠色積液,腸系膜淋巴結腫大,呈暗紅色,切面多汁,肝腫大呈土黃色,脾腫大,被膜有出血點;腎呈灰黃色或暗紫色,包膜下出血。
4.1 直接鏡檢 取病死貂的肝臟、脾臟、肺等組織觸片,革蘭染色鏡檢發現大量散在的革蘭陰性小桿菌,偶有2~3個菌體連在一起。
4.2 細菌培養 在無菌條件下,取肝、脾、肺、腎等病料直接接種于營養瓊脂平板、麥康凱平板、伊紅美藍平板、S.S.平板、血平板,普通肉湯上,37℃ 恒溫培養18~24h后,營養瓊脂平板上有圓形、隆起、光滑濕潤、半透明、淡灰色或乳白色中等大菌落生長;在麥康凱上形成紅色菌落。在伊紅美藍瓊脂上產生黑色帶金屬光澤的圓形菌落;在S.S.瓊脂上生長不良,呈紅色,菌落明顯小于前兩種培養基上的菌落;血平板上為白色黏稠菌落且呈β型溶血。在肉湯中呈均勻混濁,管底有黏性沉淀,液面管壁有菌環。挑取各培養基上單個菌落涂片染色鏡檢,細菌形態特征同病料檢測,但在病料組織觸片上的體積比培養基上的粗壯。
4.3 藥敏試驗 用紙片擴散法將待檢測細菌涂于營養瓊脂平板上,篩選10種藥物,37℃恒溫培養16 h后,所測菌落對氟苯尼考、阿米卡星高度敏感;對諾氟沙星中度敏感;而環丙沙星、痢特靈、新諾明、紅霉素、青霉素、氨芐西林、頭孢噻呋鈉則對其完全沒有抑菌作用。
4.4 細菌鑒定 按常規方法進行糖發酵試驗,結果該菌能發酵乳糖、葡萄糖、麥芽糖和甘露醇,產酸產氣;對蔗糖少量產酸,產氣少;不產生脲素酶,不液化明膠,符合大腸桿菌的特性。
4.5 血清型鑒定 用大腸桿菌的 O5、O6、O15、O22、O32和O83等鞭毛抗原的抗原血清進行玻片凝集試驗鑒定,O5、O15、O22、O32和 O83等抗原血清反應全為陰性。O6型抗原血清學反應呈陽性。證明所分離到的大腸桿菌為O6型大腸桿菌。
4.6 動物試驗 取病死水貂組織純培養菌制成懸液,接種健康小鼠5只,每只0.2mL,對照組5只接種同等劑量的滅菌生理鹽水,接種4h后,試驗組5只小鼠全部拉稀,精神沉郁,呼吸加快,18h后死亡,采取死鼠病料涂片鏡檢,結果同水貂病料檢測一致。對照組飼養7d后健康存活。
4.7 病毒的檢測 取病死貂的肝、脾、肺、小腸等組織磨碎,反復凍融后離心吸上清液,然后加氟苯尼考和生理鹽水制成混懸液,注射3只健康兔子(每只0.5mL),36h后,兔子無任何癥狀,5d后也沒有發病,由此排除水貂病毒性感染。
依據發病情況,臨床癥狀、剖檢病變及實驗室診斷結果,確診為致病性較強的O6型大腸桿菌感染。
防治措施:根據診斷和藥敏試驗結果,對病貂肌肉注射氟苯尼考+清溫靈,各0.2mL/kg體重,每天1次,連用3~5d,同時飲水中加入電解多維和小蘇打,用藥3d后病情得到了控制,沒有出現死亡;全群水貂用氟苯尼考或阿米卡星拌料,連用5d,大群沒有出現新增病例,同時做好貂舍消毒工作。
經過與水貂飼養員交流了解到,此次水貂感染大腸桿菌可能與前幾天飼喂畜禽內臟有關,這些畜禽生前可能感染大腸桿菌,水貂生食后,則易被感染,對原因不明的動物性飼料,要高溫處理方可飼喂。所以建議應加強飼料管理,盡量投喂新鮮飼料,避免造成不必要的損失。
另外,水貂是季節性繁殖動物,發情、交配、妊娠、產仔、育成各期非常集中,一般每年6~7月份是幼貂斷乳分窩期,此時因為天氣炎熱,極易因為應激和管理不當而引起大腸桿菌病的暴發,建議幼貂斷乳前后飼料中添加廣譜抗菌藥物和多維,以凈化水貂體內有害細菌和防范應激。
最后,本次試驗分離出的細菌屬于O6型致病性較強的大腸桿菌,對一般藥物都有耐藥性,所以,對發病貂要做到早發現,早診斷,最好做藥物敏感試驗,這樣才不至于盲目用藥,延誤病情。