犢牛巴氏桿菌病的診斷與防治

宋艷華 孫洪梅 陳立宏 楊井坤 高明輝

（1.黑龍江職業學院，雙城 150111；2.內蒙古赤峰市克旗經棚一中，赤峰 025350）

2011年8月，黑龍江省雙城市某牛場犢牛曾發生疑似巴氏桿菌感染病例?，F就該病的流行情況、病理變化、實驗室診斷及防治作簡要匯報，供廣大獸醫臨床工作者參考。

1 發病情況

發病牛場共飼養育肥犢牛62頭，其中黃牛10頭，夏洛來41頭，荷爾斯坦公牛11頭，年齡分布均在1～3月齡之間。主訴：最初有5頭發病。其中，1頭出現高熱、食欲減退、呼吸加快、腹瀉，糞便中混有黏液和血液，發病后第2 d死亡。另外，4頭癥狀如下：高熱、食欲減退、呼吸困難，在其頭頸部和胸前的皮下出現浮腫，發病后第3 d死亡。其余57頭，犢牛仍有13頭精神沉郁，呆立不動，喜臥；大部分犢牛排稀便。同時，牛群飲欲和食欲明顯降低，個別牛流鼻涕，鼻涕內帶有血絲。地方獸醫對最初發病的犢牛采用青鏈霉素和大劑量地塞米松治療2 d無效，后改用紅霉素、慶大霉素注射亦不能完全控制病情。該養殖戶不明確這些病牛的病因，就將那頭急性病死牛送到我們實驗室，請求做適當的檢驗及診斷。

2 病理變化

內臟器官廣泛性出血。黏膜、漿膜以及肺、舌、皮下組織和肌肉都有出血點。淋巴結顯著水腫。胸腹腔內有大量積液，內含纖維素性絮狀物。肺組織發生肉樣變，呈暗紅色或灰紅色，質地較硬，小葉間結締組織由于發生漿液性水腫而增寬，其切面呈大理石樣花紋。心內外膜有片狀出血。肝、腎發生較嚴重的實質變性。咽喉部呈膠凍樣水腫。小腸內有米粒大至蠶豆大的潰瘍。脾臟無明顯病理變化。采該病犢牛心臟、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟，10%中性甲醛固定，常規石蠟切片，鏡檢，可見心肌纖維著色深淺不一，有的發生斷裂、崩解，甚至溶解；肝臟發生顆粒變性，胞漿中出現大量微細顆粒，有時見胞漿中出現小空泡；肺臟呈典型的纖維素性肺炎，氣管、支氣管及肺泡腔內有大量嗜中性細胞、吞噬細胞和脫落的上皮細胞。

3 實驗室診斷

3.1 鏡檢

無菌采取病死犢牛的肝臟、脾臟、心血等病變組織直接涂片，制備若干張，自然干燥后，用甲醇固定。先進行美藍染色，鏡檢可見有數量較多的兩極濃染的近似于橢圓形的球桿菌；再進行革蘭氏染色，發現菌體兩極著色明顯，呈革蘭氏陰性。

3.2 分離培養

將送檢牛的病料（即肝臟、脾臟和肺臟）分別接種于營養瓊脂平板、血瓊脂平板及麥康凱瓊脂平板，置37℃溫箱中培養24 h，未見菌落，繼續培養24 h后觀察，可見血瓊脂平板上有淡黃色、圓形、表面光滑、邊緣整齊的濕潤的露珠樣小菌落。經美蘭染色，顯微鏡下觀察，可見形態多為卵圓形、兩端鈍圓且著色較深的短小桿菌；革蘭氏染色陰性。

3.3 生化試驗

無菌操作，鉤取血瓊脂平板培養基上的可疑菌落，分別接種到蔗糖、葡萄糖、果糖、甘露醇液體培養基，培養24 h后觀察，結果為產酸不產氣；另一組接種鼠李糖、水楊苷液體培養基，培養24 h后結果為陰性（不發酵）；而M-R試驗及V-P試驗均為陰性；硫化氫試驗為陽性，甲基紅試驗為陰性反應。根據細菌的菌落特征、生長特性和生化鑒定結果，查閱《伯吉手冊》，確定該細菌為多殺性巴氏桿菌。

3.4 動物試驗

將菌落收集于離心管中，加適量生理鹽水混勻，離心，取上清液給小白鼠注射，劑量為0.2 ml/只，接種后小白鼠18～24 h死亡，其病理變化與犢牛病理變化一致，并在小鼠的肺臟檢出與病犢牛肺臟同樣的病原菌——巴氏桿菌，且接種小鼠的內臟及胃腸道敗血癥變化更為明顯。

3.5 藥敏試驗

將純化的細菌接種于血清瓊脂培養基上，用紙片法對15種藥物進行藥敏試驗，置37℃溫箱中培養24 h。結果發現頭孢曲松鈉、左旋氧氟沙星高度敏感，其抑菌圈大于20 mm；恩諾沙星、磺胺嘧啶鈉中度敏感，其抑菌圈大于10 mm；青霉素、卡諾霉素、紅霉素和慶大霉素不敏感。

4 治療

首先，隔離病牛。用頭孢曲松鈉、美洛西林、丁胺卡那進行治療（用藥劑量參照說明書）。對體溫升高、食欲減退的病牛在使用以上藥物的同時，再用10%磺胺嘧啶鈉注射液50～100 ml配入500 ml生理鹽水中、5%碳酸氫鈉溶液100～150 ml靜脈注射，2次/d，直到體溫正常。連用藥3 d后牛群癥狀大為好轉，5 d后，除5頭嚴重病牛死亡外，其余牛8 d后全部康復。在對病牛進行隔離治療的同時，注意圈舍通風，對圈舍、飼槽、用具及污染場地用碘制劑或火堿徹底消毒，糞便收集作生物發酵處理。

4 預防

預防，可采用接種疫苗的方法。目前用于預防巴氏桿菌病的疫苗有滅活苗和弱毒苗2種，一般疫苗在接種14 d后可以產生較好的免疫效果，免疫期為6～9個月。在疫區，每年有必要在春冬2季進行2次接種。對于從外地引入的犢牛，在運輸期間應細心照料，避免過度勞累。為了避免運輸應激引起巴氏桿菌病，可以在運輸前注射高免血清預防；到達目的地后，應先隔離觀察，不立即與其他犢牛盲目混群，以防擴大疾病流行范圍。

[1]蔡寶祥.家畜傳染病學（第四版）[M]北京：中國農業出版社，2006：301-304

[2]張宏偉，董永森.動物疫病 [M]北京：中國農業出版社，2009：74-83

[3]許慶陽.牛巴氏桿菌病[J].畜牧與飼料科學，2009，（3）：11-12