神農架林區并殖吸蟲病自然疫源地調查＊

朱 敬，朱艷霞，朱名勝，衛榮華

神農架林區位于湖北省西北部，北接豫西，西鄰陜西，南與四川毗鄰。全區海拔在1 000～3 000m，原始森林頗多，調查區域海拔多在1 500～2 000m之間，其間野生動物繁多，經常出沒在溪谷之間。溪水常年緩流，溪旁雜草叢生，溝底常有淡水螺、蟹孳生。居民多臨溝河居住，食蟹現象極為普遍，因而肺吸蟲病病人時有發現［1－2］。為了解神農架林區人群肺吸蟲病感染情況及流行特征，為控制和防治肺吸蟲病提供科學依據，本文采用肺吸蟲病金標滲濾試劑盒（DIGFA－kit）對神農架林區進行人群血清學調查和肺吸蟲病自然疫源地的分布及蟲種進行了調查研究，結果報道如下。

1 材料與方法

1．1 中間宿主調查 神農架林區山溪間捕捉溪水蟹、螺，鑒定種類。蟹類碾碎、人工消化液消化，反復水洗沉淀，取沉淀物鏡檢囊蚴；螺類采用玻片壓碎法鏡檢尾蚴。囊蚴和尾蚴以形態大小及結構特征作初步蟲種鑒定。

1．2 動物宿主調查 采集家貓、家犬等動物糞便，經水洗沉淀法和直接涂片法鏡檢肺吸蟲蟲卵。陽性者解剖動物，收集肝、肺等臟器或組織檢查成蟲和蟲卵，收集野生動物果子貍、野獾等動物肺臟，查找肺吸蟲成蟲。

1．3 人群感染調查 1 128份血清標本采自神農架林區松柏鎮中、小學生，男617人，女511人，年齡為6～15歲，平均10．27歲。

1．4 試劑盒 肺吸蟲病抗體快速檢測（金標滲濾法）試劑盒由浙江省醫學科學院生物工程研究所提供；ELISA平行對照檢測試劑盒由深圳市綠瀚生物技術有限公司提供，均在有效期內使用。

1．5 試驗方法

1．5．1 DIGFA－kit 取試劑盒置一平面上，加洗脫液1滴（100μL），使加樣孔上NC膜濕潤；加待測血清25μL，待滲入；加洗脫液1滴（100μL），洗去未結合抗體；加膠體金－羊抗人Ig G標記物1滴（100 μL），待滲入；加洗脫液2滴（200μL），滲入后肉眼判斷結果。中央圓孔NC膜上出現紅色圓點為陽性；未出現紅色圓點，僅留白色或淡紅色背景為陰性。

1．5．2 ELISA 操作方法和結果判定按說明書要求進行。每次檢測均設陽性、陰性和空白對照。血清學試驗抗體陽性者作病史調查。

1．6 動物感染蟲種鑒定 分離出的囊蚴經計數后感染健康家犬和大鼠，由院實驗動物中心提供。犬經口飼囊蚴100～300個／條，大鼠經腹腔注射囊蚴20個／只。感染90 d后分別剖檢肺臟、肝臟及胸腹腔等處，查找成蟲蟲體，并進行蟲種鑒定。

2 結 果

2．1 第一中間宿主分布 在調查區境內主要水系溪溝捕捉螺類，標本經鑒定為擬釘螺（Tricul a sp．），共解剖1 988只，發現陽性螺18只，陽性率為0．91%，從螺體內分離出的子雷蚴為臘腸型，腸管如袋狀，內有12個左右大小不等的短尾蚴，短尾蚴為微尾型，排泄囊為倒三角形，末端可見類球形的短尾。

2．2 第二中間宿主分布 所查蟹體中均查出肺吸蟲囊蚴，共檢查1 313只蟹，檢出囊蚴4 219個，平均每只蟹含囊蚴3．21個，其中鋸齒華溪蟹（Sinopotamon denticul atu m）、光澤華溪蟹（S．davidi）和陜西華西蟹（S．shensiense）每只蟹含囊蚴分別為3．70個（879／3256）、2．28 個 （361／822）和 1．93 個 （73／141）。囊蚴呈球形或類圓形，有兩層囊壁，外壁薄、內壁厚，內有彎曲的腸盲管2根，在兩盲腸中間有一充滿黑色顆粒的排泄囊；測量新鮮囊蚴39個，平均大小為421．48μm×423．76μm。

2．3 動物宿主感染情況 共檢查29只家貓糞便，其中15只發現有肺吸蟲蟲卵，蟲卵金黃色，形狀多數不對稱，卵殼厚薄不勻，卵蓋明顯，測量20個新鮮蟲卵，平均大小為76．44μm×44．24μm，剖檢后獲得斯氏貍殖吸蟲成蟲47條；收集果子貍肺臟19份，其中3份查獲斯氏貍殖吸蟲成蟲11條，家貓和果子貍的自然感染率分別為51．72%和15．79%。另檢查15只家犬糞便，3只野獾肺臟，均為陰性。

2．4 人群感染情況 DIGFA－kit檢測1 128份血清樣本，陽性76份（男41人，女35人），陽性率為6．74%。ELISA平行對照陽性符合率為98．7%（75／76），檢測1 052份陰性人群血清均為陰性結果。陽性者中有生吃或半生吃溪蟹者占76．32%（58／76），其余均有飲生水的習慣。

2．5 動物感染蟲種鑒定 感染家犬和大白鼠90 d后在糞便中均查獲蟲卵，90～120 d剖檢，從肝、肺、胸腔及腹腔中檢獲成蟲，新鮮蟲體標本為粉紅色，蠕動活躍，背部隆起，腹面扁平，長條形。測量17個人工感染的新鮮成蟲平均大小為6．21 mm×3．38 mm；成蟲經壓平固定染色后，測量15個成蟲平均大小為7．88 mm×3．78 mm。口吸盤平均大小為479．32μm×578．56μm，腹吸盤平均大小為676．12 μm×697．50μm，位于體前1／3，卵巢位于腹吸盤后方一段距離的一側，分支細而多，中心體明顯。睪丸多呈狹長型，分支簡單，成蟲皮棘以單生型為主。蟲體經鑒定為斯氏貍殖吸蟲（Par agoni mus surj abini）。

3 討 論

斯氏貍殖吸蟲是中國獨有的并殖吸蟲蟲種，斯氏貍殖吸蟲病主要是生食或半生食含有囊蚴的蟹而感染。調查結果表明，湖北省神農架林區自然環境適宜于斯氏貍殖吸蟲各階段宿主的孳生。近年來經本室確診的肺吸蟲病病人主要來自城區及各縣、市，神農架林區，以及毗鄰的陜西、四川所轄縣市，且多具有幼蟲移行癥為特征的斯氏貍殖吸蟲病的臨床表現。與陳心陶［3］描述的斯氏貍殖吸蟲、鐘慧瀾等［4－5］描述的四川并殖吸蟲及會同并殖吸蟲對人體的致病性類似，病人除具有典型的游走性皮下包塊外，還可移行侵犯多個臟器致損傷［6－7］。本次調查神農架林區中、小學生的感染率為6．74%，且多有食蟹史，第一中間宿主擬釘螺肺吸蟲雷蚴和尾蚴感染率為0．91%，第二中間宿主蟹平均每只感染斯氏肺吸蟲囊蚴3．21個，并在人工感染的保蟲宿主家犬及大鼠和自然感染的家貓及果子貍體內檢獲斯氏貍殖吸蟲成蟲，初步證實該地區有斯氏貍殖吸蟲病的流行，為斯氏貍殖吸蟲的自然疫源地。

近年來報道應用衛氏并殖吸蟲成蟲抗原（Pw A）金標滲濾試劑盒（DIGFA）檢測同源肺吸蟲病病人血清抗體敏感性可達98．8%和98．9%，特異性可達93．0%和94．8%［8－9］，證明應用于衛氏肺吸蟲病流行地區具有敏感性高、特異性強、操作簡便、快速，不需要特殊儀器設備等優點，適用于臨床檢驗和現場應用。湖北省神農架林區經調查證實是斯氏貍殖吸蟲病流行地區，本研究中人群血清陽性率為6．74%，ELISA平行對照陽性符合率為98．7%，結果證明DIGFA－kit與ELISA在斯氏肺吸蟲病流行地區亦具有同等的現場應用價值。

神農架林區區域內生態環境基本相同，在人群中流行的肺吸蟲只有斯氏貍殖吸蟲，并且作為一種在野生動物之間和家養動物與野生動物間傳播的人獸共患病，可能會較長時間存在并繼續保持流行。從自然感染動物上看，貓和果子貍在流行病學上具有一定的意義。家犬人工感染成功率高，但自然感染率低，作為保蟲宿主不構成肺吸蟲病的傳播。由于神農架林區原始森林覆蓋面大等地理環境因素，可能會有更多的野生動物作為保蟲宿主對本病的流行具有實際意義。

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