塵肺患者全肺灌洗液中骨橋蛋白水平測定的分析

蔣澤文，劉春云

(1、信豐縣人民醫院呼吸內科，江西 信豐 341600；2、贛州市第五人民醫院呼吸內科，江西 贛州341000)

塵肺患者全肺灌洗液中骨橋蛋白水平測定的分析

蔣澤文1，劉春云2

(1、信豐縣人民醫院呼吸內科，江西 信豐 341600；2、贛州市第五人民醫院呼吸內科，江西 贛州341000)

目的探討各期塵肺患者全肺灌洗液中骨橋蛋白（OPN）水平及其在塵肺防治中的意義。方法選取塵肺全肺灌洗患者60例，采用ELISA法測定全肺灌洗液的OPN水平，另外20例具有相同接塵史但未確診塵肺患者列為對照。結果塵肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期組的肺泡灌洗液OPN水平均顯著高于對照組(P均<0.01)；Ⅰ、Ⅱ期組OPN水平低于Ⅲ期組(P<0.01)；Ⅱ期組高于Ⅰ期組(P均<0.05)均有統計學意義。結論OPN參與塵肺的發生發展過程,并且其水平可能與塵肺嚴重程度有關聯。

塵肺；全肺灌洗；骨橋蛋白

塵肺病是由于在職業活動中，長期吸入生產性粉塵并在肺內潴留而引起的以肺組織彌漫性纖維化為主的全身性疾病。粉塵長期滯留在細支氣管與肺泡內，使病人即使脫離粉塵作業場所，病變也會繼續發展，其機制仍不清楚。國內外學者在探索其機理方面做了大量的研究，最近有研究發現骨橋蛋白(osteopontin，OPN)作為細胞因子參與了塵肺的發生發展。本文我們收集了60例塵肺患者和20例接塵者全肺灌洗液標本，并對他們OPN水平進行了檢測和分析。

1 資料與方法

1.1 對象及分組 隨機選取贛州市第五人民醫院2011年3月至2012年3月住院治療的塵肺患者60例,所有塵肺患者均經市級職業病防治研究所按照GBZ70)2009《塵肺病診斷標準》予以確診并分期，其中Ⅰ期18例 ,Ⅱ期22例，Ⅲ期20例。同時20例具有相同接塵史但未確診塵肺患者列為對照。所有研究對象均排除各種感染所致急、慢性炎癥,系統性疾病包括肝腎功能不全、腫瘤、糖尿病、結締組織病、炎性腸病、口服類固醇及激素替代治療者。所選病例中在接塵史、年齡、性別構成上無顯著性差異。

1.2 手術方法 全部病人均按肺灌洗常規進行，快速麻醉誘導，采用雙腔支氣管導管插管，靜脈復合麻醉。插管成功，雙肺分隔滿意后，分別測左右肺氣道壓＜30cmH2O及各項指標正常時開始灌洗。一般一側肺灌洗9～12次，灌洗量1000～1500ml/次，直至灌洗回收液澄清為止。

1.3 標本采集 收集全部灌洗回收液,混勻后取30 ml于塑料離心管中,1200r/min離心10 min,取上清液置于-20℃冰箱保存備用。

1.4 測定方法 采用ELISA法,測定藥盒USCN LIFE SCIENCE＆TECHNOLOGY COMPANY提供;專人專機進行測量,操作按說明書進行。

1.5 統計學分析 結果處理采用SPSS13.0統計軟件包進行處理,計量資料采用均數±標準差(±s)表示,計量資料組內及組間比較采用t檢驗及方差分析,計數資料比較用χ2檢驗。以P﹤0.05為差異有顯著統計學意義。

2 結果

2.1 研究對象的一般情況 對照組及各期塵肺組一般資料比較,對照組與各期塵肺組接塵史、平均年齡及性別比如表所示。對照組及塵肺各期間常規資料比較均無明顯差異,見表1。

2.2 塵肺組與對照組各指標比較 OPN塵肺組與對照組比較P＜0.01,有統計學意義，見表2。

2.3 各組灌洗液OPN水平的比較 塵肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期組的肺泡灌洗液OPN水平均顯著高于對照組(P均<0.01)；Ⅰ、Ⅱ期組OPN水平低于Ⅲ期組 (P<0.01)；Ⅱ期組高于Ⅰ期組(P均<0.05)均有統計學意義,見表 3。

3 討論

塵肺的基本病變是結節的形成和彌漫性間質纖維增生。在這一過程中，單核巨噬細胞、肺泡上皮細胞、內皮細胞、成纖維細胞、肌成纖維細胞等都可以分泌細胞因子、炎性介質等生物活性物質，從而促進成纖維細胞的遷移和增生以及間質膠原的增生[1]。在眾多的細胞因子，骨橋蛋白作為一種機體反應性功能蛋白,參與纖維化的過程已經得到許多實驗證實。OPN是一種分泌型糖基化磷蛋白，廣泛存在于各種組織和體液中，具有多種生物學活性，整合素αvβ3是其主要受體。OPN主要參與細胞的增殖、分化、遷移及黏附。本次實驗結果顯示,塵肺患者肺泡灌洗液OPN水平均明顯高于接塵人群,具有統計學意義。近年來研究發現，在呼吸系統，OPN在損傷上皮、肺泡與間質巨噬細胞、T細胞以及肺血管內皮呈現高表達[2]。在肺纖維化的過程中，活化的成纖維細胞可能是OPN主要來源之一[3]，反過來OPN作為一種多功能細胞因子和細胞外基質，能夠協同多種炎癥細胞分泌的細胞因子激活成纖維細胞，使OPN呈現高表達。OPN可上調成纖維細胞中金屬蛋白酶1組織抑制劑(T1MP-1)和I型膠原蛋白表達，下調基質金屬蛋白酶-1(MMP-1)的表達，從而導致細胞外基質(ECM)蓄積[4]，而細胞外基質蓄積是所有纖維化疾病的最大特征。

表1 4組一般臨床資料比較(±s)

表1 4組一般臨床資料比較(±s)

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表2 塵肺組與對照組各指標比較(±s)

表2 塵肺組與對照組各指標比較(±s)

注：與正常組比較◇P＜0.01。

例數 OPN水平(ng/ml)對照組塵肺組組別20 60 35.62±9.53 90.87±22.77◇

表3 各期塵肺組與對照組各指標比較(±s)

表3 各期塵肺組與對照組各指標比較(±s)

注：與對照組比較△P<0.01；與Ⅰ期塵肺比較＊P<0.01；與Ⅱ期塵肺比較 ＃P<0.05。

組別 例數 OPN(ng/ml)對照組Ⅰ期塵肺組Ⅱ期塵肺組Ⅲ期塵肺組20 18 22 20 35.62±9.53 65.41±12.01△96.01±13.46△＊108.13±17.95△＊＃

在對塵肺灌洗液OPN的檢測中發現，塵肺Ⅱ期患者肺泡灌洗液中OPN水平高于Ⅰ期;差異有統計學意義。提示OPN水平隨肺纖維化的出現分泌增加,且隨疾病嚴重程度有升高趨勢。Ⅰ期、Ⅱ期組OPN水平高于Ⅲ期組(P<0.01)，推測可能是塵肺Ⅰ期、Ⅱ期主要病變是彌漫性間質纖維增生，塵肺Ⅲ期主要病變是結節形成。

綜上所述,本研究結果表明,OPN介導并參與塵肺的纖維化過程，且與疾病的嚴重程度有關聯，可以作為一拮抗靶點，采取干預措施，可能改善塵肺患者的預后，延緩肺纖維化的發生。有關OPN在塵肺患者血清和灌洗液中水平有無相關有待進一步研究。

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R135.2，R446.19

B

1674-1129(2012)04-0367-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.04.020