高黏樣品影響全自動生化分析儀加樣量

席文華， 李澤文，劉汝勝

(1、豐城市人民醫院，江西 豐城 331100；2、星子縣中醫院，江西 星子 332800；3、奉新縣人民醫院，江西 奉新330700)

高黏樣品影響全自動生化分析儀加樣量

席文華1， 李澤文2，劉汝勝3

(1、豐城市人民醫院，江西 豐城 331100；2、星子縣中醫院，江西 星子 332800；3、奉新縣人民醫院，江西 奉新330700)

高黏樣品；影響；全自動生化分析儀；加樣量

高黏度血清常見于血漿黏度增高型之高血黏滯綜合征[1]，如高脂血癥、原發性巨球蛋白血癥等。我們就高黏度血清對全自動生化分析儀加樣量的影響進行了試驗，將溴甲酚綠分別溶于不同濃度的甘油作為不同黏度的樣品，測定KT6HB560全自動生化分析儀非反應試驗的光密度，以探討高黏度樣品對全自動生化分析儀加樣量的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 KT6HB560全自動生化分析儀，H198103酸度計(上海精密儀器有限公司生產)，上海精科723PC紫外-可見分光光度計。

1.1.2 試劑及測試液 生理鹽水，配制含溴甲酚綠均為0.6 mol/L的不同黏度的4組檢測樣品A、B、C、D，其含甘油分別為 0%、50%、80%、90%。

1.2 方法

1.2.1 對生化儀進行常規保養維護，使儀器處于良好的狀態，每天用質控品測定，結果在控。

1.2.2 0.6mol/L溴甲酚綠溶液用生理鹽水作30、60、120、240倍稀釋，用 H198103酸度計，測得各稀釋度溴甲酚綠溶液pH值為4.5～5.4之間。用723PC紫外-可見分光光度計測定各稀釋度溴甲酚綠溶液光密度(OD)，測得第1峰值為612 nm，第2峰值為405 nm，以此確立檢測波長。

1.2.3 用A、B、C、D四組溴甲酚綠溶液作樣品，其含甘油分別為0%、50%、80%、90%，均測試3個加樣量：6、12、24μl，生理鹽水作試劑，加至 500μl，吸入量均為300μl，終點法10 min，主、副雙波長全程測試。根據上述光密度測試結果及KT6HB560波長設置，選擇主波長600 nm、副波長405 nm，光密度值為兩波長光密度之差。重復測定10次，計算生化儀非反應試驗變異系數。用積差法計算相關系數。用SPSS軟件12.0進行分析。

2 結果

2.1 不同樣品黏度不同加樣量在KT6HB560非反應測試OD值結果，見表1。

表1顯示，A組不含甘油，B組甘油含量低，兩組樣品黏度低；兩組各加樣量CV均較小，相同加樣量光密度均值接近，B組光密度均值稍大是甘油所致；兩組光密度均值與加樣量之間的直線關系呈正相關，相關系數r均為0.980，單側P<0.0005。C組甘油含量較高，樣品黏度較高，加樣量較少時(6μl)CV稍大，光密度均值為A組的94.9%；加樣量較多時(12、24μl)CV較小，但光密度均值分別為A組的72.2%、46.7%；光密度均值與加樣量之間呈較好的直線相關，r=0.9302，單側0.0250.25。

表1 各加樣量及樣品黏度的非反應測試結果(n=10)

3 討論

液體流過水平圓管時的黏度遵循Poiseuillie公式[1]，即 Q=πr4△P/8ηL，則生化儀加樣量 V=Qt。從公式可以看出，生化儀加樣量與樣品黏度(η)成反比。表1的數據表明，當樣品黏度增加到一定時，黏度相當于80%的甘油時，其影響加樣量已顯現，加樣量已開始減少；黏度相當于90%的甘油時，加樣量明顯減少。且隨黏度的增加，影響越大。

我們在工作中發現高脂血癥[2]，因其血清黏度增加而影響全自動生化分析儀的吸樣量。該患者血清在使用KT6HB560檢測時，樣品探針吸取血清后，生化儀異常停機并報警，清洗探針與傳感器后，重復測定還是如此，這時探針黏有濃稠血清，就像血凝塊，經查血清無凝固；試著將探針與傳感器間的距離加大后再測，儀器運行好似正常，但測試結果很低，就像無反應測試；再次清洗探針和傳感器，重做室內質控，結果在控，但該患者血清重測結果還是很低；最后該患者血清用生理鹽水稀釋成正常血清黏度后再測，儀器運行順暢，測試反應正常。該患者血清總蛋白高達120g/L，球蛋白高達82g/L；顯然上述異常是高黏度血清所引起。停機原因是高黏度血清黏在探針與傳感器之間致其隔開而引起。將探針與傳感器間的距離加大后，它們之間不再黏上高黏度血清后儀器能運行；但是，因高黏度血清，探針不能吸取血清致測不出結果。將患者血清稀釋成正常黏度血清后，探針就能正常吸取血清，測試結果正常[3]。

血液黏度的升高與諸多因素有關[1]，如紅細胞比積增高，紅細胞變形性降低，紅細胞聚集性增高，血漿蛋白增高，血脂增高等。血液黏度升高可能是上述某一原因的結果，也可能是幾種因素共同作用所致。血清成份較甘油復雜，其中的蛋白質尤其是球蛋白的量和質的改變對白清黏稠度的影響會更大。盡管黏稠血清對全自動生化分析儀加樣的影響要比單純甘油復雜得多；但溴甲酚綠易溶于醇[4]，是常用的試劑且顏色穩定；甘油具黏稠特性，能與水任意比例混合；甘油與血清均為牛頓液體。盡管測試時甘油也有光密度，但甘油為無色澄明黏稠液體[5]，其光密度可以忽略不計。故溴甲酚綠溶于甘油作為高黏度樣品代替黏稠血清在生化儀上作無反應測定有可比性。其檢測結果亦能表明臨床常見高黏稠血清對全自動生化分析儀加樣量的影響。

綜上所述，高黏度血清使全自動生化分析儀加樣量減少，甚至嚴重減少，致測定結果明顯減低，應引起足夠重視。在使用KT6HB560全自動生化分析儀測定高脂血癥樣品或其他高黏度樣品時，如出現測定結果不合理偏低，或生化儀異常停機并報警，應清洗探針與傳感器，將患者血清稀釋成正常血清黏度時再檢測，就能測出真實結果。

[1]張 翼.實用血液流變學[M].廣西師范大學出版社，2009:16-18.

[2]張新生,郭小春,朱宇椿,等.高脂血癥與血液流變學相關性研究報告[J].實驗與檢驗醫學，2008,26(3)：345.

[3]楊繼明.日立7180全自動生化分析儀使用過程中常見問題分析與處理[J].實驗與檢驗醫學，2011，29(6)：684.

[4]中國醫藥公司上海化學試劑采購供應站編.試劑手冊[M].第3版.上海：上海科學技術出版社，2011:216.

[5]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典[M].北京.化學工業出版社，2010:72-76.

R446.11+2

B

1674-1129(2012)05-0500-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.035