多種致病菌同步檢測方法的研究進展

孫秀蘭， 張 芳， 張銀志

（1.食品科學與技術國家重點實驗室，江南大學，江蘇 無錫 214122；2.江南大學 食品學院，江蘇 無錫 214122）

多種致病菌同步檢測方法的研究進展

孫秀蘭1，2， 張 芳1，2， 張銀志1

（1.食品科學與技術國家重點實驗室，江南大學，江蘇 無錫 214122；2.江南大學 食品學院，江蘇 無錫 214122）

概述了致病菌檢測的對象，包括細菌菌群的形態及細菌本身、細菌的DNA、細菌的代謝物；同時介紹了可同步檢測多種致病菌的方法，主要有電化學DNA傳感器、適配體電化學傳感器、免疫傳感器檢測技術、多重PCR檢測、表面增強拉曼光譜檢測；最后總結檢測方法未來的發展方向。

多種致病菌；同步檢測

多種致病菌相互混合存在于食品中，他們數量相差很大，難以分離，檢測困難。并且由于食品營養成分的不同，適宜生長的致病菌的種類也不同，如海產品中容易生長副溶血性弧菌。傳統致病菌檢測主要檢測食品中的主要致病菌，但是食品中數量極少的致病菌也可能對人體健康造成很大影響。牛奶中的主要致病菌是金黃色葡萄球菌［1］，但是2012年2月17日，在美國76人因飲用生奶感染彎曲桿菌［2］。因此，檢測食品中的主要致病菌已經不能保障食品安全，多種致病菌的同步檢測提上日程。目前多種致病菌同步檢測的方法主要有：多重PCR檢測、生物傳感器檢測、表面拉曼光譜檢測等方法。本文對多種致病菌同步檢測方法進行歸納，并對未來檢測技術的研究提供一定的參考［3－4］。

1 致病菌檢測的對象

致病菌是指能引起疾病或能造成損傷的微生物，一般所說的致病菌指的是病原微生物中的細菌。常見致病菌有沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌和致瀉大腸埃希氏菌，副溶血弧菌、李斯特菌等等。一般的檢測方法的檢測對象是細菌菌群的形態及細菌本身、細菌的DNA、細菌的代謝物［5］。

1.1 致病菌菌群的形態及細菌本身

單個細菌細胞在電鏡下的形態會有一定的差異，不同細菌形成的菌落也會形成不同的形狀。利用他們之間的不同可以對細菌進行初步的鑒定，其中按形態劃分有球菌、桿菌、弧菌等；在不同的培養基上培養，又會出現透明或不透明菌落，甚至產生不同顏色。如金黃色葡萄球菌在電鏡下，直徑約0.8μm左右，顯微鏡下排列成葡萄串狀，無芽胞、鞭毛，大多數無莢膜［6］。

1.2 致病菌的DNA

脫氧核糖核酸（DNA）是遺傳物質，以引導生物發育與生命機能運作，主要功能是長期性的信息儲存，同時指導細胞內其他的化合物，如蛋白質的合成；也指導其他代謝產物如各種細菌毒素的合成。以DNA為檢測目標物的方法，主要的依據是堿基互補配對原理，A－T，C－G。一般細菌都具有種屬DNA，也可檢測編碼特定代謝產物的堿基序列，如編碼金黃色葡萄球菌腸毒素B的基因［7－8］。

1.3 致病菌的代謝物

致病菌的代謝物有很多種，如分泌的毒素、蛋白質、酶類等。細菌的大多數產物具有抗原特性，有特定的抗體。代謝產物都具有一定的特性，能根據這些特性來檢測。如金黃色葡萄球菌分泌的凝血酶會產生凝血現象；適配體能與代謝分子特異性結合，如已經篩選出與黃曲霉毒素特異性結合的適配體［9－10］。

2 多種致病菌同步檢測的檢測方法

2.1 電化學傳感器

最早的電化學傳感器可以追溯到20世紀50年代，電化學傳感器主要是將各種信號轉化為電信號，通過檢測電流、電阻等的變化來反映檢測物的量。目前檢測致病菌的電化學傳感器主要有：DNA傳感器、適配體傳感器、免疫傳感器［11－12］。

2.1.1 DNA電化學傳感器DNA電化學傳感器是將單鏈DNA作為敏感元件固定在電極表面，加入可指示雜交信息的電活性物質，通過檢測修飾電極在待測溶液中電化學信號的變化，以確定靶DNA的濃度。主要過程：ssDNA的固定、雜交、雜交指示劑、電化學檢測［13］。

圖1 DNA電化學傳感器示意圖Fig.1 Schematic diagram of electrochemical DNA biosensor

Elaine Spain［14］等利用DNA傳感器成功的建立了檢測金黃色葡萄球菌的方法。成功的檢測了能引起奶牛發生乳房炎的金黃色葡萄球菌的的基因。Xue－Mei Li［15］等建立的金納米離子修飾的電極可檢測2個DNA，2個DNA的檢出限濃度都超過10～11μg／m L。Deng Zhang［16］等建立的傳感器能檢測2種來自不同細菌的DNA，磁性納米粒子修飾致病菌巰基探針能夠識別目標DNA的一端，用金納米粒子修飾致病菌巰基探針能識別目標DNA另一端，并將金納米粒子探針與NTs（硫化鉛、硫化鎘）結合，NTs的羧基與納米探針的氨基結合，通過磁場吸附，NTs游離，通過SWASV進行檢測。

DNA傳感器隨著ssDNA的不同，指示劑的不同就可檢測多種致病菌。DNA電化學傳感器具有快捷、靈敏度高、特異性強等優［17］，但電化學DNA傳感器還存在一定的局限，比如如何在電極表面固定多個不同探針，構建復雜基質環境使能夠同時檢測多個DNA，DNA的空間結構的變化，堿基錯配，同源致病菌DNA的相似性對檢測準確性的影響［18］。

2.1.2 適配體電化學傳感器電化學適配體傳感器是由固定了適配體的電極和電化學活性識別元素構成。首先在適當條件下將適配體固定到電極表面，將待測目標物加入與適配體作用，從而導致電極表面結構的變化；然后通過檢測電化學信號的變化來檢測目標物［19］。

圖2 適配體電化學傳感器示意圖Fig.2 Schematic diagram of electrochemical aptamers biosensor

Gustavo［20］組成員設計的適配體傳感器，適配體和靶分子的結合使電勢發生變化，能有效地準確檢測檢測大腸桿菌O157：H7，檢測下限26 cfu／m L，檢測時間短。曹曉曉［21］等利用獲得的一組能夠與金黃色葡萄球菌特異性結合的適配體，通過流式細胞儀和共聚焦顯微鏡檢測發現，組合適配體相對于單一的適配體能夠更好地區分金黃色葡萄球菌細菌和消減靶細菌及大腸。在電極表面固定一組適配體，可能會提高檢測的特異性。在電極表面固定不同的適配體，檢測不同的致病菌，是一個可行實驗方案［22］。

細菌細胞可以篩選到適配體，細菌的代謝物如毒素，也可篩選到特異性適配體。作為一類分子識別元件，適配體對其靶標具有嚴格的識別力和高度的結合力。因此適配體電化學傳感器具有特異性和選擇性，可實現對多種細菌的定性定量檢測。電化學適配體生物傳感器有一定的局限性，如篩選過程復雜，易于被剪切降解空間結構穩定性有待提高等，一般可對篩選出來的核酸適配體進行修飾。篩選的核酸適配體對靶標物的特異性還沒有達到100%，一個細胞由于表面的不均一性，可能具有多個適配體，對于檢測的特異性和準確性都會造成很大的干擾［23－24］。

2.1.3 免疫學傳感器檢測技術電化學免疫傳感器是生物技術和電化學技術相結合的產物，免疫學檢測技術利用了抗體與抗原的特異性結合的原理。1990年 Henr［25－26］等提出了免疫傳感器的概念：將高靈敏的傳感技術與特異性免疫反應結合起來，用以監測抗原一抗體反應的生物傳感器稱作免疫傳感器。有三個主要元件：感受器、轉換器和檢測器。

圖3 電化學免疫傳感器示意圖Fig.3 Schematic diagram of electrochemical immunosensor

周煥英，高志賢［27］制成的酶免疫傳感器，針對葡萄球菌腸毒素C檢測靈敏度可達到10μg／L，20 min即可完成。Tahir［28］等采用電化學免疫傳感器技術檢測大腸桿菌0157∶H7，可以在10min內完成分析，檢測精度可達10 cfu／m L。Faridah［29］等以辣根過氧化酶為標記酶，使用電化學免疫傳感器檢測鼠傷寒沙門氏菌，檢出下限為20 cfu／m L，表明該方法具有較高的靈敏性。

在表面固定不同的抗體，就可檢測不同的抗原。但有的細菌會分泌共同抗原，特別是同源的致病菌如腸道菌群，這種方法只能檢測區分能分泌不同抗原的致病菌。來源于不同致病菌的抗體他們的活性的保持，在小小的表面需要注意抗體之間的相互影響，檢測溶液環境的確定都會造成結果的差異很大。免疫學電化學傳感器檢測方法具有制樣簡單，測試時間短，成本低，靈敏度高的優點。應用電化學免疫傳感器對致病菌產生的抗原進行測定，需要解決的主要問題是：抗體的標記、抗體的活性保持、假陽性的排出、信號測定有一定難度等［30］。

2.2 表面增強拉曼檢測技術

當單色光照射至物質上，物質分子發生散射現象，出現與入射光頻率不同的散射光，所形成的光譜稱拉曼光譜。拉曼光譜較微弱，表面增強拉曼（SERS）就應運而生［31］。表面增強拉曼光譜要與其他技術結合，如與DNA、適配體技術的結合，才能更準確的檢測致病菌。SERS是將敏感元件固定在某表面，與修飾了量子點的靶標物結合，利用拉曼光譜照射產生的不同的光譜信號，以確定靶標物的量和種類。主要過程：敏感元件的固定、特異性和選擇性結合、拉曼光譜檢測［32］。

圖4 SERS檢測示意圖Fig.4 Schematic diagram of surface plasmon resonance biosensor

Nam Hoon Kim［33］等介紹了一種方法，適配體與SERS結合來檢測，檢測后可除去靶標物，可以反復使用。Do Kyun Kim［34］等建立的方法，DNA和拉曼光譜的結合，可檢測多個DNA序列，檢測下限達10 fmol／L（50 zmol）。Taejoon Kang［35］等把金粒子固定在金屬絲上，與DNA結合，在進行SERS分析，可檢測多個致病菌，并能在電鏡下觀察到。

目前SERS檢測細菌細胞的研究很少，主要原因是細胞的表面不均一性，表面積較大，所得的譜圖太復雜，沒有特異性。表面增強拉曼光譜具有方便快捷、檢測靈敏度高、多組分同時檢測等特點，這使得其在檢測樣品中致病菌含量較傳統方法有明顯的優勢，但是拉曼光譜的發生本身對待測物就有一定的要求，不是每種物質都適用［36］。

2.3 多重PCR檢測技術

多重PCR檢測技術的基本原理就是在體外適宜條件下，以提取得到的DNA為模板，以人工設計與合成的寡核苷酸為引物，特異性地擴增DNA片段。最后通過電泳技術與陽性對照進行比對，來判斷陰陽性結果［37］。PCR由加熱變性——退火加引物－升溫延伸，三個基本反應步驟構成［38］：

圖5 多重PCR技術檢測示意圖Fig.5 Schematic diagram of detection of multiplex PCR

余以剛，何秋彤［39］等以兩種食源性致病菌（沙門氏菌、單增李斯特菌）為模板，通過對多重熒光PCR緩沖液的成分、擴增所用酶、添加劑等進行研究，建立適用細菌DNA檢測的多重熒光PCR反應體系。Sharma［40］等建立了能在3～4 h內檢測出毒素基因多重PCR體系。

多重PCR技術在實際的檢驗工作還存在一些問題：提取得到的DNA的裂解得到的不完整DNA片段，多重PCR技術中多組引物之間相互干擾、高濃度模板對低濃度模板產生競爭性抑制等問題［41－42］。相對于傳統檢測方法，多重PCR檢測技術極大地縮短了檢測時間，提高了檢測靈敏度，且操作簡單、快速，特異度和敏感度較高，是快速檢測和鑒定常見致病菌的一種有效的手段［43］。

3 展望

DNA傳感器、多重PCR技術是以DNA為檢測目標的方法，他們的檢測限低、靈敏度高、時間短、花費少、勞動量少，是發展前景非常好的檢測方法。但是DNA的錯配，特異性檢測受到環境的干擾，同種屬細菌的基因序列的同源性，容易出現假陽性的結果。適配體傳感器與免疫傳感器相比，各有所長。適配體的廉價易得，易保存的優點，在檢測致病菌上，有明顯的優勢。致病菌可以有共同抗體，但是基本沒有共同的適配體。致病菌細胞可能有一組適配體。這兩原因對檢測的特異性和準確性造成很大影響。抗體和抗原結合的假陽性的出現。表面增強拉曼光譜檢測技術重復性強，敏感度高，不同結構的分子產生的拉曼光譜強弱差異很大，甚至有的分子不產生拉曼光譜現象，降低了表面增強拉曼光譜檢測方法的適用范圍。

目前多種致病菌同步檢測的方法還僅限于實驗室，繁雜前處理過程以及數據處理的復雜性是他們的缺點。研究宜攜帶的試紙條，在生產過程能檢測，提高檢測的時效性和方便性，不損壞產品的，降低食品損壞成本，檢測結果為不同顏色及顏色深淺，檢測過程的簡單化，是未來一段時間的研究發展方向［44］。

（References）：

［1］Bieke Van Dorst，Jaytry Mehta，Karen Bekaert，et al.Recent advances in recognition elements of food and environmental biosensors：A review［J］.Biosensors and Bioelectronics，2010，26：1178－1194.

［2］James Andrews.76 ill with campylobacter from raw milk dairy［N］.http：／／www.food safetynews.com，2012－02－15.

［3］Riikka M Karkka，inen，Mette Ryun Drasbek，et al.Aptamers for safety and quality assurance in the food industry：detection of pathogens［J］.International Journal of Food Scienceand Technology，2011，46：445－454.

［4］Lin Tang，Guangming Zeng，Guoli Shen，et al.Sensitive detection of lip genes by electrochemical DNA sensor and its application in polymerase chain reaction amplicons from phanerochaete chrysosporium ［J］.Biosensors and Bioelectronics，2009，24：1474－1479.

［5］鞠慧萍，宋白薇，石建華，葛晴穎，王 偉.PCR技術在常見食源性致病菌檢測中的研究進展［J］.上海畜牧獸醫通訊，2010，3：12－13.

JU Hui－ping，SONG Bai－wei，SHI Jian－hua，et al.Research advance study of detection of multiplex foodborne pathogens by PCR［J］.Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，2010，3：12－13.（in Chinese）

［6］楊蓉生，王小玲，唐俊妮.食品中金黃色葡萄球菌檢測方法的研究進展［J］.食品工業科技，2011，32：459－461.

YANG Rong－sheng，WANG Xiao－ling，TANG Jun－ni.Research progress on decetio method of staphylococcus aureus in food［J］.Science and Technology of Food Industry，2011，32：459－461.（in Chinese）

［7］Zelada－guillen G A，Bhosales V，Riu J，et al.Realtime potentiometric detection of bacteria in complex samples［J］.Ana－lytical Chemistry，2010，82：918－926.

［8］蘇明權，楊柳，馬越云，等.實時熒光定量PCR檢測金黃色葡萄球菌方法的實驗研究［J］.國際檢驗醫學雜志，2010，31：794－796.

SU Ming－quan，YANG Liu，MA Yue－yun，et al.Real－time fluorescence quantitative PCR detection of staphylococcus aureus in experimental study［J］.Int J Lab Med.August，2010，31：794－796.（in Chinese）

［9］Gergel Y L，Zsofia B，Viola B，et al.Aptamer－based biochips for label－free detection of plant virus coat proteins by SPRimaging［J］.The Analyst，2010，135：918－926.

［10］Farabullinif F，Lucarellf，Palchethi，et al.Disposable electrochemical gensensor for the simultaneous analysis of different bacterial food contaminants［J］.Biesenc Binelectmn，2007，22：1544－1549.

［11］毛 斌，韓根亮，馬莉萍，等.DNA電化學生物傳感器的原理與研究進展［J］.化學傳感器，2010，29：9－15.

Mao Bin，Han Gen－liang，Ma Li－ping，et al.Fundamenttals and progresses of DNA electrochemical biosensor［J］.Chemical Sensor，2010，29：9－15.（in Chinese）

［12］Katherine J，O denthal，Justin Gooding.An introduction to electrochemical DNA biosensors［J］.Analyst，2007，132：603－610.

［13］張愛春，周 存.電化學生物傳感器的研究進展［J］.天津工業大學學報，2010，29：66－70.

ZHANG Ai－chun，ZHOU Cun.Progresses of DNA electrochemical biosensor［J］.Journal of Tianjin Polytechnic University，2010，29：66－70.（in Chinese）

［14］Elaine Spain，Robert Kojima，Richard B.et al.High sensitivity DNA detection using gold nanoparticle functionalized polyaniline nanofibres［J］.Biosensors and Bioelectronics，2011 26：2613－2618.

［15］Xue－Mei Li，Pei－Yu Fu，Jin－Ming Liu，et al.Biosensor for multiplex detection of two DNA targate sequences using enzyme－functionalized Au nanoparticles as signal amplification［J］.Analytica Chimica Acta，2010，637：133－138.

［16］Deng Zhang，Michael C Huarng，Evangenlyn V Alocilja.A multiplex nanoparticle－based bio－barcoded DNA sensor for the simulataneous detection of multiple pathogens［J］.Biosensors and Bioelecteoics，2010，26：1736－1742.

［17］Xinghua Ding，Hua Li，Le Deng，et al.A novel homogenous detection method based on the self－assmebled DNAzyme labeled DNA probes with SWNT conjugates and its application in detecting pathogen ［J］.Biosensors and Bioeletronics，2011，26：4596－4600.

［18］劉 萍，任有良，狄燕清.DNA生物傳感器研究綜述［J］.商洛學院學報，2011，25：35－41.

LIU Ping，REN You－liang，DI Yan－qing.A review on DNA binsensors study［J］.Journal of Shangluo University，2011，25：35－41.（in Chinese）

［19］Sara，Tombelli，Maria Minunni，et al.Aptamers－based assays for diagnostics，environmental and food analysity［J］.Biomolecular Engineering，2007，24：191－200.

［20］Alan K H Cheng，Dipankar Sen，Hua－Zhong Yu.Design and testing of aptamer－based electro－chemical biosensors for proteins and small molecules［J］.Bioelectrochemistry，2009，77：1－12.

［21］CAO X X，LI S H，CHEN L C，et al.Combining use of a panel of ssDNA aptamer in the detection of staphylococcus［J］.Nucleic Acids Research，2009，37：4621－4628 .

［22］Juan Zhang，LihuaWang，Hua Zhang，et al.Aptamer－based multicolor fluorescent gold nanoprobes for multiplex detection in homogeneous solution［J］.Small，2010，6：201－204.

［23］FARABULLINI F，LUCARELLF，PALCHETH I，et al.Disposable electrochemical gensensor for the simultaneous analysis of different bacterial food contaminants［J］.Biesenc Binelectmn，2007，22：1544－1549.

［24］GERGELY L，ZSOFIA B，VIOLA B，et al.Aptamer－based biochips for label－free detection of plant virus coat proteins by SPRimaging［J］.The Analyst，2010，135（5）：918－926.

［25］劉繼超，姜鐵民，陳歷俊，等.電化學免疫傳感器在食品安全檢測中的研究進展［J］.中國食品添加劑，2010，1：216－222.

LIU ji－chao，JIANG Tie－min，CHEN Li－jun，et al.Research advance study of electrochemical immunosensor and its application in food safety［J］.China Food Additives，2010，1：216－222.（in Chinese）

［26］William E Lee，H Gail Thompson，John G Hall，et al.Rapid detection and identification of biological and chemical agents by immunoassay，gene probe assay and enzyme inhibitionusing a silicon－based biosensor［J］.Biosensors and Bioelectronics，2000，14：795－804.

［27］周煥英，高志賢 .免疫傳感器在葡萄球菌腸毒素檢測中的研究進展［J］.中國衛生檢驗雜志，2007，17：177－180.

Huan－ying Zhou，Zhi－xian Gao.Research advance study on detection of Staphylococus aureus enterotoxin by electrochemical immunosensor［J］.Chinese Journal of Health Laboratory Technology，2007，17：177－180 .（in Chinese）

［28］Tahir Z M，Aleilja E C.A disposable membaane strip immunasensor［C］.New York：Proceedings of Ieee Sensors，2002.12－14.

［29］Faridah S，Ibtisam E T，Detection of Salmonella typhimurium using an electrochemical immunosensor［J］.Biosensor and Bioeletronica，2009，24：2630－2636.

［30］Ciszkowska M，Stojek Z.Voltammetric and amperometric detection without added electrolyte［J］.Anal Chem，2000，72：755－760.

［31］Taejoon Kang，Seung Min Yoo，Ilsun Yoon.Patterned multiplex pathogen DNA detection by au particle－on－wire SERS sensor［J］.Nano Lett，2010，10：1189－1193.

［32］Christina Boozer，Jon Ladd，Shengfu Chen，et al.DNA－Directed protein immobilization for simultaneous detection of multiple analytes by surface plasmon resonance biosensor［J］.Anal Chem，2006，78：1515－1519.

［33］Nam Hoon Kim，Seung Joon Lee，Martin Moskovits.Reversible tuning of SERS hot ppots with aptamers［J］.Advanced Materials，2011，23：4152－4156.

［34］Do－Kyun Kim，Seung Min Yoo，Tae Jung Park，et al.Plasmonic properties of the multispot copper－capped nanoparticle array chip and its applicaton to optical biosensors for pathogen detection of multiplex DNAs［J］.Analytical Chemistry，2011，83：6215－6222.

［35］Taejoon Kang，Seung Min Yoo，Ilsun Yoo，et al.Patterned multiplex pathogen DNA detection by au particle－on－wire SERS sensor［J］.Nano Lett，2010，10：1189－1193.

［36］Rebeeea J，Riehard N .Analysis of biomoleeular interaetion using a miniaturized surface plasma resonnanee sensor［J］.Analytieal Chemistry，2002，74 ：4570－4576.

［37］楊玉軍，黃韋唯，王志云，等.多重PCR快速檢測金黃色葡萄球菌四型腸毒素基因的研究［J］.現代預防醫學，2009，36：1713－1715.

Yang Yu－jun，Huang Wei－wei，Wang Zhi－yun，et al.A study on fast detection of four kinds of staphylococcus aureus enterotoxins genes with a multiplex PCR method［J］.Modern Preventive Medicine，2009，36：1713－1715.（in Chinese）

［38］徐曉可，吳清平，張菊梅，等.食品中金黃色葡萄球菌多重PCR檢測方法的研究［J］.食品與生物技術學報，2011，30：84－89.

XUXiao－kel，WUQing－ping，ZHANGJu－meil，et al.Studies on detection of staphylococus aureus in foods by multiplex PCR ［J］.Journal of Food Science and Biotechnology，2011，30：84－89.（in Chinese）

［39］余以剛，何秋彤，劉千根，等.食源性致病菌通用型多重熒光PCR快速 檢測體系的建立［J］.現代食品科技，2010，26（8）：880－883.YU Yi－gang，HE Qiu－tong，LIU Qian－geng，et al.Development of universal multiplex real－time PCR reaction system for rapid detection of foodborne pathogens［J］.Modern Food Science and Technology，2010，26（8）：880－883.（in Chinese）［40］Sharma N K，Rees C E，Dodd C E.Development of a single－reaction multiplex PCR toxin typing assay for staphylococuus aureus strains［J］.Appl Environ Microbiol，2000，66（4）：1347－1353.

［41］R Osalees，R Asmussenhellber.Interlaboratory evaluation of a real－time multiplex polymerase chain reaction method for identification of salmon and trout species in commercial products［J］.Food Chem，2011，59：876－884.

［42］X S Qu，L A Wanner，B J Christ.Multiplex real－time PCR（Taq Man）assay for the simultaneous detection and discrimination of potato powdery and common scab diseases and pathogens［J］.Journal of Applied Microbiology，2011，110：1364－5072.

［43］N H Kwona，S H Kim，K T Park，et al.Application of extended single－reaction multiplex polymerase chain reaction for toxintyping of staphylococcus aureus isolates in south Korea［J］.International Journal of Food Microbiology，2004，97：137－145.

［44］Mohamed A，Robert H，Afroz M S，et a1.Detection of staphylo－coccus aurues enteretoxin A and B genes with PCR－EISLA and ahandheld electrochemical sensor［J］.Mol Cell Probes，2004，18：373－377.

Research Advance Study of the Synchronous Detection of Multiplex Foodborne Pathogens

SUN Xiu－lan1，2，ZHANG Fang1，2，ZHANG Yin－zhi1

（1.State Key Laboratory of Food Science and Technology，Jiang Nan University，Wu Xi 214063，China；2.School of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi 214036，China）

In this review，the detection targets such as bacteria colonies，bacteria cell i，DNA and bacteria metabolic products are firstly introduced.Then the detection methods which can synchronously indentify Multiplex Food－borne Pathogens electrochemical DNA biosensor，Aptamer biosensor，Electrochemical immunosensor，Surface plasmon resonance biosensor and Multiplex PCR were summarized.Based on the above progress，the the challenge and perspective of detection method were put forward.

detection targets，multiplex foodborne pathogens，synchronous detection

TS 201

A

1673－1689（2012）05－0449－06

2011－03－22

國家自然科學基金項目（20806033），2010年度公益性行業（農業）科研專項項目（201003008－08）。

孫秀蘭（1976－），女，山東聊城人，工學博士，教授，博士研究生導師，主要從事食品安全檢測方面研究。E－mail：sxlzzz＠yahoo.com.cn