非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)前血清中MMP-3和MMP-7檢測(cè)的意義

[摘要] 目的 應(yīng)用ELISA法分別檢測(cè)120例非小細(xì)胞肺癌患者和120例正常成人血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）和基質(zhì)金屬蛋白酶-7（MMP-7）的表達(dá)，并分析二者的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的關(guān)系，為術(shù)前判斷腫瘤的生物學(xué)行為提供理論幫助。 方法 選取我院確診的120例非小細(xì)胞肺癌需進(jìn)行手術(shù)治療的術(shù)前患者作為觀察組，選取120例體檢證實(shí)為健康的成人血清作為對(duì)照組，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩組血清中MMP-3和MMP-7的含量，分析其意義及相關(guān)性。 結(jié)果 觀察組患者血清中MMP-3和MMP-7的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，術(shù)前血清中MMP-3和MMP-7的表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)。結(jié)果顯示非小細(xì)胞肺癌中MMP-3和MMP-7的表達(dá)具有正相關(guān)性。 結(jié)論 非小細(xì)胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的表達(dá)升高，MMP-3和MMP-7在腫瘤的進(jìn)展中具有促進(jìn)作用，術(shù)前聯(lián)合檢測(cè)血清中MMP-3和MMP-7的表達(dá)可能有助于判斷預(yù)后。

[關(guān)鍵詞] 非小細(xì)胞肺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶-3；基質(zhì)金屬蛋白酶-7；酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

[中圖分類號(hào)] R734.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2012）06-0114-02

Serum expressions and significance of MMP-3 and MMP-7 in non-small cell lung carcinoma before operation

HU Tianjun

Department of Thoracic Surgery， Ningbo No.2 Hospital， Zhejiang Province， Ningbo 315010， China

[Abstract] Objective To investigate the expressions of MMP-3 and MMP-7 in 120 cases with non-small cell lung carcinoma and 120 cases normal adults for observing their clinical significance in neoplasm. Methods We detected the serum expressions of MMP-3 and MMP-7 by ELISA in the non-small cell lung carcinoma before opeartion and normal adults. Their expressions and clinical significance were analyzed in the non-small cell lung carcinoma. Results The serum expressions of MMP-3 and MMP-7 were higher in the neoplasm than in normal adults. Their expressions were correlated with differentiation， clinical stage and lymph node metastasis. Positive correlation between MMP-3 and MMP-7 was found in neoplasm before operation. Conclusion The higher serum expressions of MMP-3 and MMP-7 were found in non-small cell lung carcinoma before operation. The synergistic effect of MMP-3 and MMP-7 may promote the development of neoplasm. The expressions of MMP-3 and MMP-7 may be helpful to judge the prognosis in non-small cell lung carcinoma.

[Key words] Non-small cell lung carcinoma; MMP-3; MMP-7; ELISA

非小細(xì)胞肺癌是危害人類健康的重要疾病，近年來(lái)患者血清中相關(guān)蛋白的表達(dá)逐漸引起學(xué)者的關(guān)注。基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）和基質(zhì)金屬蛋白酶-7（MMP-7）是基質(zhì)金屬蛋白家族的重要成員，對(duì)腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)具有較強(qiáng)的降解作用，對(duì)腫瘤的進(jìn)展具有促進(jìn)作用[1，2]。本實(shí)驗(yàn)關(guān)注非小細(xì)胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的檢測(cè)情況，探討二者的表達(dá)與腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)系，旨在為術(shù)前非小細(xì)胞肺癌臨床情況提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年1月～2010年12月在我院確診為非小細(xì)胞肺癌的術(shù)前患者作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理學(xué)確診，并符合WHO關(guān)于非小細(xì)胞肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②術(shù)前未進(jìn)行放化療；③臨床資料完整。本組共觀察120例，其中男70例，女50例，患者年齡37～79歲，平均（57.9±7.9）歲。同時(shí)選取同期在我院進(jìn)行體檢并證實(shí)為健康的成人血清120例作為對(duì)照組。其中男69例，女51例，年齡36～78歲，平均（57.3±7.6）歲。兩組資料的性別、年齡構(gòu)成等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 血清中MMP-3和MMP-7的檢測(cè)

觀察組術(shù)前清晨抽取空腹靜脈血5 mL，分離血清后，置于-20℃的冰箱中待檢。對(duì)照組采血及保存方法同上。兩組血清標(biāo)本均在3 d內(nèi)集中檢測(cè)，檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，操作均由同一主管技師完成，嚴(yán)格操作過(guò)程，努力避免誤差。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié)果均經(jīng)SAS 6.12軟件進(jìn)行分析，兩組間的比較采用t檢驗(yàn)，并應(yīng)用線性相關(guān)分析計(jì)算其相關(guān)性，P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組中MMP-3和MMP-7的表達(dá)

兩組中觀察組患者血清中MMP-3和MMP-7的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組，見(jiàn)表1。

2.2 觀察組患者不同臨床特征中MMP-3和MMP-7的表達(dá)比較

MMP-3和MMP-7在低分化組中的表達(dá)量明顯高于高、中分化組，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)量明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，在臨床分期Ⅲ、Ⅳ期患者中的表達(dá)量明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者。見(jiàn)表2。

2.3 非小細(xì)胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7表達(dá)的相關(guān)性分析

對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的表達(dá)進(jìn)行線性相關(guān)分析，結(jié)果顯示MMP-3和MMP-7的表達(dá)呈正相關(guān)（r = 0.43，P ＝ 0.03）。

3 討論

非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程[3]。MMPs是一組結(jié)構(gòu)上具有極大同源性蛋白的內(nèi)肽酶的總和，可降解細(xì)胞外基質(zhì)中的多種成分[4]。MMP-3是基質(zhì)金屬蛋白酶家族的重要成員，主要通過(guò)降解絕大多數(shù)的細(xì)胞外基質(zhì)，使腫瘤細(xì)胞沿受損的基底膜向周圍組織浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。MMP-7屬于基質(zhì)溶解素，其基因定位于11q21-q22，其DNA長(zhǎng)1.6 kb，編碼267個(gè)氨基酸，由于其缺乏與血紅素結(jié)構(gòu)蛋白同源序列而成為金屬蛋白酶家族的最小成員，具有強(qiáng)大的基質(zhì)降解活性和廣泛的底物特異性[5，6]，包括Ⅳ型膠原、纖維蛋白結(jié)合素、層黏連蛋白和可溶性彈性蛋白等底物，同時(shí)受基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的調(diào)節(jié)較小，而且在研究中顯示其能有效地激活MMPs家族的其他成員，對(duì)基底膜及相關(guān)的屏障有廣譜的降解功能。同時(shí)也有觀點(diǎn)認(rèn)為其能破壞局部組織結(jié)構(gòu)，增加腫瘤誘導(dǎo)的血管形成[3，7]，而起到促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)120例非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)前的血清進(jìn)行ELISA法檢測(cè)，結(jié)果顯示MMP-3和MMP-7高表達(dá)，提示MMP-3和MMP-7在血清中的表達(dá)與組織中的表達(dá)具有一致性，MMP-3和MMP-7在肺癌的進(jìn)展中具有重要促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，術(shù)前血清中MMP-3和MMP-7的含量均與非小細(xì)胞肺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)，提示MMP-3和MMP-7在腫瘤進(jìn)展中具有直接作用，由于分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期均與非小細(xì)胞肺癌的預(yù)后相關(guān)，因此，術(shù)前聯(lián)合檢測(cè)MMP-3和MMP-7的表達(dá)可能對(duì)判斷患者的預(yù)后及指導(dǎo)治療有一定價(jià)值。相關(guān)分析顯示非小細(xì)胞肺癌血清中MMP-3和MMP-7的含量呈正相關(guān)，這不僅提示二種蛋白在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)展中起重要作用，又提示MMP-3和MMP-7具有正向協(xié)同效應(yīng)。當(dāng)MMP-3和MMP-7在細(xì)胞外基質(zhì)發(fā)生溶解時(shí)，可以引起黏附功能下降，使腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶，進(jìn)而發(fā)生轉(zhuǎn)移[8]。MMP-7還可能通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)NF-κB蛋白的活性，使其與MMP的啟動(dòng)子的結(jié)合增強(qiáng)[9]，增加其合成，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的機(jī)動(dòng)性、趨化性及侵襲性。非小細(xì)胞肺癌術(shù)前血清中檢測(cè)MMP-3和MMP-7的表達(dá)，由于血液標(biāo)本較組織標(biāo)本取材容易，且檢測(cè)方法簡(jiǎn)便可行，對(duì)患者的指導(dǎo)意義大，因此，臨床診斷和治療中可以積極應(yīng)用。

總之，MMP-3和MMP-7在非小細(xì)胞肺癌患者血清中高表達(dá)，提示二者可能在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用；術(shù)前聯(lián)合檢測(cè)MMP-3和MMP-7可能對(duì)判斷患者的預(yù)后及指導(dǎo)治療提供重要價(jià)值。

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（收稿日期：2011-11-09）