黑莓RuMYB10基因的克隆和表達

摘要： 【目的】從黑莓中克隆RuMYB10的編碼區全長序列，并分析其在黑莓果實發育過程中的表達情況與果實花青素苷積累的關系。【方法】以黑莓基因組DNA為模板，通過同源克隆和SON—PCR技術獲得了RuMYB10基因全長編碼序列（Accession No.：JQ359611）；并以黑莓果實mRNA為模板進行驗證。采用實時定量PCR技術檢測該基因在果實不同發育階段的表達水平。【結果】結果表明，該基因編碼區全長共1 837 bp，編碼216個氨基酸，推導蛋白分子質量為24 863 Da。具有MYB轉錄因子家族特有的R2R3保守序列。含有兩個內含子，第2個內含子長度為750 bp，占全長40.8%；在R3重復單元中存在與bHLH因子互作的‘[DE]Lx2[RK]x3Lx6Lx3R’序列；而促進花青素苷合成的MYB轉錄因子3個特征氨基酸殘基中的丙氨酸（A）被絲氨酸（S）取代。RuMYB10基因在黑莓果實發育后期，即果實變紅到最后變黑的過程中大量表達，與花青素苷的積累相一致。【結論】從黑莓中克隆到包含完整ORF的轉錄因子基因RuMYB10，具有MYB因子家族結構特征和bHLH因子結合域，且在果實花青素苷積累高峰期表達量最高。

關鍵詞： 黑莓； RuMYB10； 全長克隆； 序列分析； 表達模式

中圖分類號：S663.2 文獻標志碼：A 文章編號：1009—9980（2012）05—0747—08