CIK細(xì)胞治療中晚期消化系惡性腫瘤的免疫功能變化

【摘要】 目的 探討CIK細(xì)胞治療中晚期消化系惡性腫瘤患者治療前后免疫功能變化。方法 選擇筆者所在醫(yī)院2010年6月~2011年4月收治的中晚期消化系惡性腫瘤患者42例和35例健康體檢者，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者外周血中免疫指標(biāo)變化。并比較應(yīng)用CIK細(xì)胞治療前后免疫指標(biāo)的表達(dá)。結(jié)果 治療前后CD4、CD19、CD3/CD16+CD56比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 CIK細(xì)胞治療中晚期消化系腫瘤，能夠減輕患者化療不良反應(yīng)， 提高患者免疫功能，為患者提供了一種可以延長(zhǎng)生存期、提高生活質(zhì)量的新途徑。

【關(guān)鍵詞】 CIK細(xì)胞； 中晚期消化系惡性腫瘤； 流式細(xì)胞術(shù)

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近年來(lái)，中晚期消化系惡性腫瘤的發(fā)病率越來(lái)越高，嚴(yán)重影響到患者及其家人的身心健康和生活質(zhì)量。中晚期消化系惡性腫瘤病程發(fā)展快，患者就診時(shí)往往已屬中晚期，失去了手術(shù)治療的機(jī)會(huì)［1］。目前治療細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine induced kil1ers，CIK）已經(jīng)成為治療惡性腫瘤的一個(gè)全新的領(lǐng)域。CIK可在體外可大量擴(kuò)增，并具有一定的抗腫瘤效應(yīng)。特別適用于那些對(duì)手術(shù)、放療、化療已無(wú)適應(yīng)證的患者，因而成為治療惡性腫瘤的重要輔助治療方法［2］。本文選取筆者所在醫(yī)院2010年6月~2011年4月共有42例中晚期消化系惡性腫瘤患者接受CIK細(xì)胞治療，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞的一些表面抗原在中晚期消化系惡性腫瘤患者外周血中的表達(dá)，并研究CIK細(xì)胞治療前后患者免疫功能改變，為臨床治療惡性腫瘤提供科學(xué)的依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組消化道惡性腫瘤患者共42例（觀察組），均經(jīng)影像學(xué)、細(xì)胞學(xué)及病理學(xué)檢查等確診；其中男25例，女17例；年齡28~75歲，平均（56.7±4.2）歲，其中40～60歲者占92.4%；根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟（UICC）分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期，其中Ⅰ~Ⅱ期5例(11.9%)，Ⅲ~Ⅳ期38例(90.48%)；病程最長(zhǎng)2年。腫瘤分布：食管癌12例，肝癌9例，結(jié)腸癌7例，胃癌11例，胰腺癌3例。對(duì)照組35例為健康體檢者，其中男性17例，女性13例；年齡27~60歲，平均（41.6±3.9）歲。兩組患者在年齡和性別上比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 主要試劑及儀器 小鼠抗人單克隆抗體CD4/CD8/CD3、CD19、CD3/CD16+CD56及同型對(duì)照，紅細(xì)胞裂解液均為廣州長(zhǎng)瑞生物有限公司。流式細(xì)胞儀為美國(guó)Beck-man Coulter公司產(chǎn)品。

1.3 CIK細(xì)胞制備及流式細(xì)胞檢測(cè) 參照有關(guān)文獻(xiàn)［3］對(duì)CIK 細(xì)胞進(jìn)行制備及回輸。靜脈血均于清晨空腹抽取2 ml， EDTA 抗凝。取不同熒光標(biāo)記的單克隆抗體CD4/CD8/CD3、CD3/CD16+CD56、CD19各20 μl放入試管中，分別加入100 μl抗凝外周血，室溫下孵育15 min，加入紅細(xì)胞裂解液500 μl，以1500 r/min的速率離心5 min，棄上清液，PBS 洗滌2 次。上流式細(xì)胞儀，每個(gè)樣品檢測(cè)5000個(gè)以上的細(xì)胞，用Cellquest軟件分析計(jì)算淋巴細(xì)胞中各標(biāo)記細(xì)胞的比例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組免疫指標(biāo)比較 與對(duì)照組比較觀察組各免疫指標(biāo)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說(shuō)明中晚期消化系惡性腫瘤患者的免疫功能下降。見(jiàn)表1。

2.2 CIK細(xì)胞治療前后惡性腫瘤組各免疫指標(biāo)變化 CIK細(xì)胞治療前與CIK細(xì)胞治療后比較，CD3、CD4、CD19、CD3/CD16+CD56免疫指標(biāo)明顯升高，治療前后比較差異性顯著（P<0.05）；而CD8卻有所降低，治療前后比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

目前CIK細(xì)胞已應(yīng)用于部分臨床惡性腫瘤的治療，并取得了較好的效果。體外及動(dòng)物研究證實(shí)CIK細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)在于增殖速度快、殺瘤活性高、殺瘤譜廣、對(duì)正常骨髓造血前體細(xì)胞毒性小等。國(guó)內(nèi)外制備的用于過(guò)繼免疫治療的CIK細(xì)胞實(shí)際是體外擴(kuò)增出的異質(zhì)性細(xì)胞群，以CD3+CD56+、CD3+D8+T淋巴細(xì)胞為主。采用CIK細(xì)胞治療，可以在不損傷機(jī)體免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的前提下，將腫瘤細(xì)胞直接殺傷，并且對(duì)機(jī)體的免疫功能起到調(diào)節(jié)和增強(qiáng)的作用［4］。本研究結(jié)果顯示，CIK細(xì)胞治療后觀察組各免疫指標(biāo)比治療前除CD8外，均有不同程度的升高，說(shuō)明患者免疫功能在提高。

綜上所述，采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)外周血免疫指標(biāo)的變化進(jìn)行檢測(cè)為臨床觀察中晚期消化系惡性腫瘤患者C1K細(xì)胞治療前后免疫功能的變化提供了有效的依據(jù)；CIK細(xì)胞治療中晚期消化系統(tǒng)惡性腫瘤，可激活T淋巴細(xì)胞而改善免疫功能；外周血免疫指標(biāo)可用于治療效果的評(píng)價(jià)。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 關(guān)紅梅.自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)過(guò)繼性免疫治療惡性腫瘤的臨床觀察［J］.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2011，5(6)：68-69.

［2］ 李星逾，孫志為，莫一我.自體CIK細(xì)胞聯(lián)合胸腺素α1治療消化系統(tǒng)統(tǒng)惡性腫瘤療效觀察［J］.山東醫(yī)藥，2010，50(18)：67-68.

［3］ 楊軒璇，蔣敬庭，石亮榮，等.自體CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌［J］.蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2008，28(2)：237-239.

［4］ 鄧笑偉，徐銘寶，高錦，等.自體和異體CIK細(xì)胞聯(lián)合樹(shù)突狀細(xì)胞治療原發(fā)性肝癌研究［J］.科技導(dǎo)報(bào)，2008，26(7)：51-53.

（收稿日期：2011-10-12）

（本文編輯：梅宏偉）