不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價探討

【摘要】 目的 探討不同方法學(xué)及試劑檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物的一致性。方法 選取筆者所在醫(yī)院經(jīng)羅氏ECLIA檢測證實的100例乙型肝炎病毒（HBV）感染者以及50例健康體檢者的血清，選用ELISA、TRFIA和ECLIA三種方法對乙型肝炎血清標(biāo)志物進行檢測。結(jié)果 在檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物方面三種方法的結(jié)果具有高度以上的一致性，且ECLIA法在檢測中敏感性最高。結(jié)論 當(dāng)前實驗室使用的乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測方法均具有較高的一致性，有利于實驗室之間進行結(jié)果互認(rèn)。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎； 血清標(biāo)志物； 檢測； 評價

當(dāng)前我國乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的攜帶率約為10%左右，臨床上用于乙型肝炎病毒血清免疫學(xué)標(biāo)志物（HBV-M）檢測的方法很多，國內(nèi)傳統(tǒng)檢測手段主要使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），近年來諸如時間分辨熒光分析法（TRFIA）、微粒子酶免疫分析法（MEIA）以及電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）等新式檢測手段也逐漸應(yīng)用于實驗室檢測中。本次試驗選用ELISA、TRFIA和ECLIA三種方法對乙型肝炎血清標(biāo)志物進行檢測，旨在對不同方法學(xué)檢測結(jié)果之間的一致性進行評價。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取筆者所在醫(yī)院經(jīng)羅氏ECLIA檢測證實的100例乙型肝炎病毒（HBV）感染者的血清，患者均符合慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)^［1］，其中男65例，女35例；年齡16～50歲；另選取50例健康體檢者的血清。

1.2 方法

1.2.1 儀器試劑 ELISA檢測選用ALISEI全自動酶標(biāo)儀（意大利）以及科華生物試劑盒（上海）；TRFIA檢測選用WALLAC DELFIA-1235時間分辨免疫熒光分析儀（芬蘭）和新波生物試劑盒（上海）；ECLIA檢測選用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（德國）及其標(biāo)準(zhǔn)配置試劑。

1.2.2 檢測方法 檢測操作均按照儀器操作說明書以及試劑盒說明書進行。本組待檢血清樣本均用3種方法進行檢測，每次檢測時均帶陰、陽性質(zhì)控（質(zhì)控來源為上海市臨床檢驗中心以及羅氏公司）。檢測結(jié)果的判定以試劑說明書中規(guī)定的Cut-off值作為標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用夾心法檢測時，結(jié)果大于Cut-off值為陽性；應(yīng)用競爭法檢測時，結(jié)果小于Cut-off值為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 不同檢測方法結(jié)果的一致性采用Kappa檢驗，一致性的強弱程度按照Landis以及Koch參照Kappa系數(shù)的大小進行判斷，共分為6個區(qū)段，Kappa系數(shù)小于0時為極差；0～0.2為微弱；0.21～0.4為弱，0.41～0.6為中度；0.61～0.8為高度；0.81～1.0為極強^［2］；抽樣誤差的排除應(yīng)用μ檢驗。

2 結(jié)果

2.1 使用ELISA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較 見表1。

2.2 使用TRFIA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較 見表2。

3 討論

當(dāng)前實驗室對乙型肝炎血清標(biāo)志物的檢測方法中，ELISA法適用于定性檢測，TRFIA、ECLIA等適用于定量檢測，由于不同實驗室在應(yīng)用這些方法時的溯源性以及采用的單位各不相同，因此結(jié)果相差較大，給患者的就診以及臨床醫(yī)生對報告結(jié)果的正確解讀造成了不便，基于此，不同方法學(xué)檢測結(jié)果之間的相關(guān)性評價就顯得十分必要。本次研究所選用的3種檢測方法中，ECLIA法是當(dāng)前特異性和敏感性最好的檢測方法，故將其檢測結(jié)果與其他方法進行比較，以評價不同方法學(xué)檢測結(jié)果之間的一致性。

根據(jù)本次研究結(jié)果顯示，ELISA法和ECLIA法在HBeAg項目上顯示極強一致性，剩余4項均為高度一致性，顯示ELISA法在臨床應(yīng)用中檢測率良好^［3］，但HBsAg項目上有8例漏診，提示該法在敏感性方面尚有不足，在血站以及手術(shù)等對結(jié)果極為敏感的情況下不適合應(yīng)用此法，但是ELISA法試劑成本較低，因此適用于普通人群篩查或者經(jīng)濟狀況較差的患者。TRFIA法與ECLIA法檢測結(jié)果在HBsAg、HBeAg、抗HBe以及抗HBc這4個項目上具有極強的一致性，在抗HBs項目上具有高度一致性，這一結(jié)果亦與國內(nèi)文獻［4］報道基本一致。

綜上所述，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、時間分辨熒光分析法（TRFIA）以及電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）三種方法在乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測方面一致性較高，有利于實驗室之間進行結(jié)果互認(rèn)。

參 考 文 獻

［1］ 中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會、肝病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志，2010，（8）：324-329.

［2］ 夏邦世.時間分辨免疫熒光技術(shù)檢測HBV血清標(biāo)志物臨床應(yīng)用評價.臨床醫(yī)學(xué)，2006，33（3）：6-7.

［3］ 周迎春，陳輝，關(guān)平，等.3種方法測定低濃度乙型肝炎病毒表面抗原效果評價.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2007，4（11）：1070-1071.

［4］ 陳佑明，黃敬，熊符，等.時間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測HBsAg的對比分析.標(biāo)記免疫分析與臨床，2006，13（1）：50-51.

（收稿日期：2011-05-23）

（本文編輯：郎威）

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表1 ELISA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較

注：所有項目P<0.05，兩種檢測方法具有一致性

表2 TRFIA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果比較

注：所有項目P<0.05，兩種檢測方法具有一致性