細(xì)胞DNA定量分析結(jié)合液基細(xì)胞學(xué)診斷宮頸癌300例

摘 要 目的：探討細(xì)胞DNA定量分析結(jié)合液基細(xì)胞學(xué)診斷宮頸癌的臨床效果。方法：對(duì)診斷為宮頸癌的患者，采用液基細(xì)胞學(xué)初步診斷宮頸癌并用細(xì)胞DNA定量分析進(jìn)一步明確腫瘤分級(jí)，并與組織活檢情況比較，分析符合率。結(jié)果：TCT對(duì)宮頸癌檢出率100%，與病理學(xué)符合率99.7%。細(xì)胞DNA定量檢測(cè)漏診宮頸癌4例，誤診8例。對(duì)宮頸癌檢出率93.4%，與病理學(xué)檢測(cè)符合率97%。結(jié)論：采用TCT初步檢測(cè)為宮頸癌者，結(jié)合細(xì)胞DNA定量分析可明確腫瘤分級(jí)，取得較好的診斷效果，值得臨床推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞 細(xì)胞DNA定量分析 液基細(xì)胞學(xué) 診斷 宮頸癌

宮頸癌（Carcinoma of Cervix）是全球婦女惡性腫瘤中發(fā)病率僅次于乳腺癌的一種嚴(yán)重危害婦女健康的疾病。湯潔^［1］等篩查了2478例婦科門(mén)診就診患者，HPV感染率高達(dá)36.3%，其中高危型感染 81.0%。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，世界每年新發(fā)現(xiàn)的宮頸癌有45.9萬(wàn)例，我國(guó)每年新發(fā)現(xiàn)宮頸癌有13.5萬(wàn)例。臨床常用的診斷方法有碘試驗(yàn)肉眼觀測(cè)宮頸著色情況、巴氏涂片觀察宮頸細(xì)胞、液基細(xì)胞學(xué)檢查、陰道鏡檢查、宮頸及宮頸管的活組織、分子生物學(xué)檢查等。各種檢查方法均有一定的適用范圍。本研究采取細(xì)胞DNA定量分析結(jié)合液基細(xì)胞學(xué)診斷宮頸癌300例，取得良好的效果，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

一般資料：選取2005年5月～2009年8月我院婦科門(mén)診收治的300例進(jìn)行宮頸癌篩查的婦女，進(jìn)行宮頸液基細(xì)胞學(xué)（TCT）及細(xì)胞HPV-DNA定量檢測(cè)，受檢者受檢時(shí)無(wú)妊娠，30天內(nèi)無(wú)性生活，3天內(nèi)未進(jìn)行陰道沖洗或陰道用藥，均于非月經(jīng)期采樣。受檢者年齡19～70歲，平均38.4歲。

液基細(xì)胞標(biāo)本采集與處理：參照蔡麗玉^［2］方法進(jìn)行，略有改動(dòng)。采用特制的宮頸癌刷收集宮頸口和宮頸管的脫落上皮細(xì)胞，并將收集的細(xì)胞注入裝有Thinprep保存液的小瓶?jī)?nèi)，于切片機(jī)上制片，人工蘇木素染色，然后用光學(xué)顯微鏡觀察，以TBS分級(jí)系統(tǒng)行細(xì)胞學(xué)診斷：①正常范圍（WNL）；②意義不明確的非典型鱗狀細(xì)胞（ASCUS）；③低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；④高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）；⑤鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。報(bào)告為ASCUS、LSIL、HSIL、SCC者為液基細(xì)胞檢測(cè)（TCT）陽(yáng)性。

細(xì)胞DNA定量檢測(cè)：參考聶衛(wèi)^［3］等的方法進(jìn)行，略有改動(dòng)。采用Leitz MPVⅢ型顯微分光光度計(jì)掃描系統(tǒng)進(jìn)行DNA測(cè)定，工作波長(zhǎng)560nm，掃描計(jì)算因子165，掃描測(cè)量光粒0.1nm，物鏡放大63倍。隨機(jī)挑選細(xì)胞，明顯損傷細(xì)胞不予測(cè)量。

宮頸組織檢查：對(duì)TCT陽(yáng)性，HPV陽(yáng)性及臨床高度懷疑者行陰道鏡下可疑部位多點(diǎn)活檢，結(jié)合病理進(jìn)行分析。

結(jié) 果

TCT診斷結(jié)果與病理診斷結(jié)果比較：TCT診斷結(jié)果：300例患者中，非上皮細(xì)胞改變者141例，ASCUS 4例，LSIL 25例，HSIL 2例，SCC 3例，腺上皮細(xì)胞異常11例，基本正常者114例。病理診斷結(jié)果：非上皮細(xì)胞改變者140例，鱗狀上皮細(xì)胞改變者35例，腺上皮細(xì)胞異常11例，基本正常114例。TCT誤診1例。TCT對(duì)宮頸癌檢出率100%，與病理學(xué)符合率99.7%。

細(xì)胞DNA定量檢測(cè)與病理診斷結(jié)果比較：參考聶衛(wèi)^［3］等宮頸癌組織學(xué)分級(jí)與DNA含量、細(xì)胞核面積的關(guān)系，診斷為宮頸癌Ⅰ級(jí)（DNA含量1204.47±139.61，面積120.83±40.33）者18例，宮頸癌Ⅱ級(jí)（DNA含量1300.76±307.88，面積121.44±15.00）者19例，宮頸癌Ⅲ級(jí)（DNA含量1409.71±36.79，面積125.03±20.81）者6例。非上皮細(xì)胞改變者140例，基本正常者117例。細(xì)胞DNA定量檢測(cè)漏診宮頸癌3例，誤診6例。對(duì)宮頸癌檢出率93.4%，與病理學(xué)檢測(cè)符合率97%。

討 論

TCT應(yīng)用于宮頸癌早期病變檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)：①顯著提高對(duì)低度及其以上病變的檢出率，可提高與病理需診斷結(jié)果的一致性。②保存方便，可避免常規(guī)涂片所引起的細(xì)胞固定不及時(shí)，過(guò)度干燥所造成的假陰性結(jié)果。③可發(fā)現(xiàn)癌前病變，如微生物感染等。雖然TCT具備以上所述優(yōu)勢(shì)，但TCT可能由于病灶局限或?qū)m頸移行帶位于刮取范圍外，取樣刷未能刷到病灶處異常細(xì)胞而導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

細(xì)胞DNA定量分析應(yīng)用與宮頸癌檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)：有研究資料表明^［4］，DNA含量能反應(yīng)腫瘤惡性程度及生物學(xué)行為。細(xì)胞核面積值也隨細(xì)胞異型程度的加重而增大。因此，細(xì)胞DNA及形態(tài)的定量測(cè)定，可以更好的分級(jí)腫瘤。但細(xì)胞DNA定量分析對(duì)于非腫瘤樣變不易檢測(cè)出來(lái)。

綜上所述，采用TCT初步檢測(cè)為宮頸癌者，結(jié)合細(xì)胞DNA定量分析可明確腫瘤分級(jí)，取得較好的診斷效果，適于臨床推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

1 湯潔，馬向薇，張寧.2478例婦女宮頸人乳頭瘤病毒（HPV）普查結(jié)果分析［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2010，14（7）:1119-1120.

2 蔡麗玉.宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)對(duì)宮頸疾病的診斷價(jià)值［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9（18）:1417-1418.

3 聶衛(wèi)，紀(jì)遠(yuǎn)中，關(guān)景芳，等.宮頸癌細(xì)胞DNA定量分析與組織學(xué)分級(jí)的相關(guān)性［J］.天津醫(yī)藥，2001，29（11）:667-668.

4 胡云，劉穎，鄭建華，等.子宮內(nèi)膜腺癌中DNA含量和端粒酶活性的臨床分析［J］.實(shí)用腫瘤雜志，2000，14（3）:201-203.