采用真空泵法快速獲取豬卵母細胞

摘要：試驗比較了真空泵法與傳統的手動抽吸法對豬卵母細胞成熟效果的影響，結果表明，真空泵法在平均使用時間、卵母細胞的收集效率及Ａ、Ｂ級卵母細胞所占的比例方面均優于手動抽吸法，在卵母細胞的成熟率方面稍低于手動抽吸法。表明真空泵法是一種有效的豬卵母細胞采集方法。

關鍵詞：豬卵母細胞；體外成熟；真空泵法；手動抽吸法

中圖分類號：Ｑ８１３．７；Ｓ８２８．３文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）21－4438-03

Ｒａｐｉｄ Ｃｏｌｌｅｃｔｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｗｉｎｅ Ｏｏｃｙｔｅｓ ｂｙ Ｖａｃｕｕｍ Ｐｕｍｐ

ＸＩＡＯ Ｈｏｎｇ－ｗｅｉ，ＺＨＥＮＧ Ｘｉｎ－ｍｉｎ，ＬＩＵ Ｘｉ－ｍｅｉ，ＱＩＡＯ Ｘｉａｎ－ｆｅｎｇ，ＬＩ Ｌｉ，ＺＨＡＮＧ Ｌｉ－ｐｉｎｇ，ＨＵＡ Ｗｅｎ－ｊｕｎ，

ＢＩ Ｙａｎ－ｚｈｅｎ，ＨＵＡ Ｚａｉ－ｄｏｎｇ，ＺＨＯＵ Ｊｉｎg－ｒｏｎｇ

（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ husbandry ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ， Ｈｕｂｅｉ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅs ／ Ｈｕｂｅｉ Ｋｅｙ Ｌａｂoratory ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｅｍｂｒｙｏ Engineering ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ，Ｗｕｈａｎ ４３００６４， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ａｉｍｅｄ ｔｏ ｓｅｔ ｕｐ ａ ｎｅｗ ｓｗｉｎｅ ｏｏｃｙｔｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗｉｔｈ ｖａｃｕｕｍ ｐｕｍｐ ｔｏ substitute for ｔｈｅ ｏｌｄ ｍａｎｕａｌ ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒａｉｓｅ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｓｗｉｎｅ ｏｏｃｙｔｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｖａｃｕｕｍ ｐｕｍｐ ｗａｓ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ｍａｎｕａｌ ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ ａｔ ａｖｅｒａｇｅ ｕｓａｇｅ ｔｉｍｅ， ｔｈｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｏｏｃｙｔｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ A，B ｑｕａｌｉｔｙ ｏｏｃｙｔｅｓ， ｂｕｔ ｉｎｆｅｒｉｏｒ ａｔ ｔｈｅ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ． Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ of ｏｏｃｙｔｅ ｗｉｔｈ ｖａｃｕｕｍ ｐｕｍｐ ｗａｓ ａ ｎｅｗ ａｎｄ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｍｅｔｈｏｄ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｓｗｉｎｅ ｏｏｃｙｔｅｓ； ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ； collection method ｗｉｔｈ ｖａｃｃｕｍ ｐｕｍｐ； manual aspiration method

自１９８９年Ｍａｔｔｉｏｌｉａ等［１］用體外成熟的卵母細胞獲得試管豬以來，卵母細胞的體外成熟培養已經取得了較大的進展［２］。而從屠宰場廢棄卵巢中抽取卵母細胞已為大多研究者所接受。但對于優良的種畜禽、珍稀野生動物以及人而言，通常所用的抽吸法會浪費掉許多小卵泡內的卵母細胞，對卵母細胞上卵丘細胞的完整性也有一定的影響。因此，如何進一步提高卵母細胞的采集效率，為胚胎工程技術準備更多優良的成熟卵母細胞就成為了研究者所關注的焦點［３，４］。

傳統的豬卵母細胞的獲取方法有剝離法、刺破法、刀片切割法、注射器抽吸法（以下簡稱抽吸法）等。現有的收集母畜卵母細胞的具體操作中，剝離法、刺破法、刀片切割法這三種方法操作繁瑣，耗時長，獲得的卵母細胞少。而采集者在使用注射器抽吸法時常用一只手握卵巢，另一只手拿注射器，采用注射器產生的負壓采集卵巢表面的卵泡，使卵母細胞和卵泡液一起采集到注射器中，再把采集得到的混合物從注射器中注入撿卵皿中，作業步驟多，耗時也多。……