關于雞支原體病的研究

[摘要] 山東省高密市姜莊鎮鎮伊家長村伊文星所養肉雞出現了嚴重的慢性呼吸道疾病，其中2、3、6棚尤其嚴重。從患病雞只的外觀和剖檢癥狀推斷為支原體疾病，通過從病雞中分離病原微生物，進而進行分離培養和顯微鏡檢查，雞胚的接種、全血凝集實驗，最后確認為禽的支原體疾病。通過藥敏實驗，選擇了合適的藥物進行治療，有效的控制了疫情的發展和傳播，同時也加深了自己對雞的慢性呼吸道疾病的感性認識和理性認識。

[關鍵詞] 支原體疾病；藥敏實驗；抑菌直徑

一、病原

支原體是一種介于細菌和病毒之間的原核生物，在具有自體繁殖和合成自身大分子的微生物中，體積最小，結構也最簡單。支原體主要靠寄生生存，寄生于各種動物的體內。雞的支原體主要有敗血支原體（Mycoplasmaga1lisepticum，MG）和滑液囊支原體（Mycoplasma synoviae，MS），另外還有其他致病力較低的支原體如火雞支原體、雛雞支原體和禽支原體等。雞支原體病的病原體是禽敗血霉形體，屬于霉形體目霉形體科霉形體屬的一個致病種。一般呈細小球桿狀或卵圓形，大小約為0.25～0.5um，姬姆薩染色著色良好，革蘭氏染色呈弱陰性。

二、流行病史

雞對本病易感，病雞和隱性感染雞是本病的傳染源，本病既可以垂直傳播又可以水平傳播。病原體可以通過雞咳嗽，噴嚏的飛沫和塵埃經呼吸道傳染，被支原體污染的水，飼料，用具也能使本病有一個雞群傳至另一個雞群。垂直傳播可構成代代相傳，使本病在雞群中連續不斷的發生。本病在雞群中傳播較為緩慢，但在新發病的雞群中傳播較快。

三、臨床癥狀

病雞初期呈現精神不振，食欲減退或不食，腹瀉，鼻液增多，流漿液性鼻液，部分病雞鼻孔周圍和頸部羽毛沾污明顯，鼻孔堵塞，妨礙呼吸，頻頻搖頭或發出奇聲。如鼻甲骨或氣管粘膜發炎時，分泌液增多，呼吸困難，打噴嚏。嚴重時，病雞呼吸困難伸頸張口喘，呼吸是發出羅音，咳嗽。有時病初流淚，繼而眼瞼腫脹，眼瞼上下粘合，甚至失明。全身癥狀表現為體溫升高，生長發育遲緩，逐漸消瘦。

四、病理變化

單純感染敗血支原體的病例，可見輕度的鼻和眶下竇炎。自然感染的病例多為混合感染，可見到呼吸翻膜水腫，充血，肥厚，竇腔內充滿粘液和干酪樣滲出物。早期氣囊輕度渾濁，外觀呈灰白色，水腫，表層有增生的結節狀病灶。病情嚴重時，氣囊增厚，囊腔內含有大量干酪樣滲出物。眶下竇粘膜發炎，竇腔內積有混濁粘液或干酪樣滲出物，眶下竇勤膜充血腫脹。病理組織學可見被侵害的組織的勃膜顯著增厚，有單核細胞浸潤。該病菌容易產生抗藥性，而且各地的血清型和流行情況不一樣，結合實踐，我們做了藥敏實驗。

五、實驗室診斷

1.病料：伊文星的患病雞

在無菌情況下，取有典型癥狀的雞只的支氣管中下部的滲出液，加液體培養基磨碎制成懸液，接種于液體培養基，放于27攝氏度的恒溫箱中培養5d。

2.鏡檢

將接種環在酒精燈上火焰消毒，然后粘取雞的呼吸道下部的滲出液體，均勻的涂抹在玻璃片上，待其自然干燥或在酒精燈上晃動使液體干燥，然后放于過濾盆的兩條玻璃棒上，用滴管吸取姬姆薩染色液滴于玻璃片上5min后，傾斜玻璃片倒掉姬姆薩染色液，再在玻璃片上滴上相同劑量的酒精，3min后，用生理鹽水沖洗掉殘留的染色液，沖洗干凈后，自然風干或用濾紙吸千水分，放于顯微鏡下觀察。

3.雞胚的接種

取病雞的呼吸道無細菌污染的滲出液經卵黃囊接種于7日齡雞胚。接種在24h以內死亡的雞胚為細菌感染死亡；如果是霉形體，在5～7d可以引起雞胚的死亡，可見到雞胚的呼吸道有干酪樣的滲出物，關節膿腫，肝和脾腫大，心包炎，或全身水腫和肝臟壞死等癥狀。多次繼代后，死亡更加有規律且病變更明顯。

4.藥敏學實驗

將紅霉素，強力霉素，鏈霉素，慶大霉素，氯霉素，丁胺卡那霉素，新霉素，環丙沙星，蔥諾沙星的注射液10倍稀釋，取直徑大約5mm的無菌濾紙片分別浸泡于上述溶液中，制成藥敏濾紙片，再將這些藥敏濾紙片分別置于有雞血清的瓊脂培養基中，放于37攝氏度的恒溫箱中培養24h。多次重復試驗，觀察抑菌直徑，選用合適藥物。判定標準：抑菌圈直徑6mm以下為不敏感，9mm為低敏感，10～15mm為中敏感，16mm以上為高敏感。

六、試驗結果

1.細菌的分離與培養

可見到菌落，典型的菌落呈圓形，微小，透明如露滴狀。在40倍光學顯微鏡下觀察時，表面光澤閃光，如玻璃珠樣，菌落中心常深埋于培養基中，呈致密的圓形的突起，周圍環繞以透明的Him邊，陳舊后中心突起部分變為淡黃色乃至棕黃色。

2.顯徽鏡觀察

大部分呈球狀，但還有的呈絲狀，螺旋狀等不規則形態。小球狀是基本形態，直徑大約為125N250nm，姬姆薩染色良好呈淡紫色。血液滴入抗原中，如果藍紫色凝塊的為陽性；僅在液滴邊緣部分出現藍紫色帶，或超過２min僅在邊緣部分出現顆粒狀物，一可判為可疑；經過2min液滴無變化的為癮性。

通過了解觀察雞支原體的高發時期一般為4～7周齡，此時雞生長發育很快，對營養的需求造成雞只的抵抗力有所下降，加之飼養環境不好，此時雞容易得病。在飼養過程中，天氣的變化，晝夜的溫度差異很大，另外雨天也是細菌和病毒長發的時期，這些都是造成雞支原體爆發的很重要的因素。實踐證明，支原體和大腸桿菌常常同時爆發，此時更容易造成雞只的死亡。結合對支原體的診斷和藥敏試驗，還有臨床的實踐，我們采用了強力霉素和環丙沙星飲水治療，同時加入了一些抗病毒的中藥。一個療程以后，雞只的死亡率明顯的下降，采食量增加，支原體和大腸桿菌得到了有效的控制。通過對支原體的臨床癥狀的觀察，還有細菌的分離培養鑒定，自己對雞的支原體病有了一個全面的認識，為以后的學習和工作奠定了基礎，同時對于藥物的選擇和應用也有了進一步的認識，對疫病的流行和傳播的控制有了更大的把握。