滇獨蒜蘭提取物的藥效學研究

　　 摘 要：目的：研究滇獨蒜蘭浸膏的急性毒性及鎮咳、抗炎藥效作用。方法：采用小鼠單次灌胃給藥，觀察滇獨蒜蘭浸膏的急性毒性；氨水引咳法、耳廓腫脹法觀察滇獨蒜蘭浸膏對小鼠的鎮咳、抗炎作用。結果：滇獨蒜蘭浸膏3.00 g/kg能明顯減少氨水引咳小鼠的咳嗽次數，0.75、1.50 g/kg可顯著抑制小鼠耳廓腫脹，與陰性對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05）；滇獨蒜蘭浸膏以8.0 g/kg的最大給藥劑量單次給予小鼠，未見毒性反應。結論：滇獨蒜蘭浸膏具有明顯的鎮咳、抗炎作用，最大給藥量為8.0 g/kg，無毒性。[KG)]
　　關鍵詞：滇獨蒜蘭浸膏；止咳；抗炎；急性毒性
　　中圖分類號：R284 文獻標識碼：A
　　文章編號：1007-2349（2011）08-0077-02
　　
　　滇獨蒜蘭（Pleione yunnanensis Rolfe）為蘭科獨蒜蘭屬植物，別名云南獨蒜蘭、獨葉白及、糯白及、蒜白及，藥用其假鱗莖。味辛，麻，性涼；有平喘止咳、消炎、鎮痛、止血的功效，用于矽肺、肺結核、氣管炎、百日咳、熱性哮喘、咳血、消化道出血、外傷出血、癤腫、跌打損傷、化膿性骨髓炎、燙火傷、刀傷［1］。本實驗觀察了滇獨蒜蘭對小鼠的抗炎、鎮咳作用和急性毒性，為滇獨蒜蘭的進一步研究提供實驗依據。
　　1 材料
　　1.1 動物 昆明種小鼠，雌雄各半，體重18~22 g，由昆明醫學院實驗動物中心提供，動物生產許可證號SCXK（滇）20050008，飼料生產許可證號SCXK（滇）20050009，動物使用許可證號SYXK（滇）20050001。
　　1.2 藥物與試劑 滇獨蒜蘭浸膏：先后加10、8、4倍量水提取，每次1 h，提取率56.50%，深褐色。滇獨蒜蘭藥材產地為云南昆明團結鄉，由云南省藥物研究所資源中心鑒定為滇獨蒜蘭（Pleione yunnanensis Rolfe）的干燥假鱗莖。
　　復方甘草片：每片含甘草浸膏粉0.1125 g，福州海王福藥制藥有限公司生產，批號：1101231；氨水：湖南省湘江氮肥廠九州化學試劑廠生產，批號20020609；阿司匹林腸溶片：每片含阿司匹林0.1 g，拜爾醫藥保健有限公司生產，批號：BJ02247；二甲苯：廣東汕頭市西隴化工廠，批號040115。
　　1.3 儀器 電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司，型號：AL204；超聲霧化器，北京亞都科技股份有限公司，型號：YC-Y800；秒表；6 mm打孔器；手術剪刀；鑷子。
　　2 方法與結果
　　2.1 滇獨蒜蘭浸膏對小鼠的急性毒性［2］ 選體重為18~22 g的小鼠40只，雌雄各半，隨機分為給藥組和陰性對照[HJ2.6mm]組，禁食不禁水16 h后，以0.2 g/mL的最大濃度和0.4 mL/10 g的最大給藥容量，小鼠24 h內灌胃給予滇獨蒜蘭浸膏1次，給藥劑量為8.0 g/kg。陰性對照組同法灌胃給予純水。給藥后連續4 h觀察各組動物出現的毒性癥狀，以后每天觀察1次，連續14 d，期間于給藥第3、7、14 d稱重。給藥后連續觀察14 d，結果，所有動物外觀、行為活動、精神狀態、食欲、大小便、被毛、膚色及呼吸等均正常，未見毒副反應和死亡。各組動物體重持續增長，與陰性對照組比較無顯著性差異（P>0.05），給藥后第14 d脫臼處死并解剖，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等內臟組織，未見明顯異常。對灌胃小鼠體重的影響見表1。
　　 試驗結果表明，小鼠以8.0 g/kg的劑量單次灌胃給予滇獨蒜蘭浸膏混懸液，無毒性反應。小鼠單次灌胃給藥的最大給藥量為8.0 g/kg。
　　2.2 滇獨蒜蘭浸膏對氨水致小鼠咳嗽的影響［3］ 將體重為18~22 g的小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組：陰性對照組（純水），陽性對照（復方甘草片0.5 g/kg）組和滇獨蒜蘭浸膏3.00、1.50、0.75 g/kg組，每組10只。各組動物0.2 以mL/10 g 的給藥容量灌胃給予小鼠，1次/d，連續給藥3 d，末次給藥1 h后，各組動物平行實驗，將每只小鼠分別置于玻璃鐘罩內，以流速25%通入氨水5 s，觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期(從開始噴霧到引起小鼠第1次咳嗽的時間)和2 min內咳嗽次數(以小鼠腹肌收縮，張大口并同時伴有咳嗽聲為準)。結果見表2。
　　從表2可以看出，滇獨蒜蘭浸膏3.00 g/kg組可明顯減少氨水誘導的小鼠咳嗽次數，與陰性對照組比較有顯著性差異（P＜0.05）。[KG)]
　　2.3 滇獨蒜蘭浸膏對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響［2］ 將體重為18~22 g的小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組：純水對照組，阿司匹林0.30 g/kg組和滇獨蒜蘭浸膏0.75、1.50、3.00 g/kg組，每組10只。各組動物以0.2 mL/10 g的給藥容量灌胃給予小鼠，1次/d，連續給藥4 d，末次給藥1 h后，將二甲苯0.05 mL/只均勻涂抹于小鼠右耳耳廓兩面致炎，左耳不涂抹為對照，致炎1 h脫臼處死小鼠，用手術剪刀將小鼠雙耳剪下，用直徑6 mm的打孔器將雙耳同部位等面積沖下，用電子天平稱量左右各只耳朵重量，以兩耳片重之差作為腫脹度。結果見表3。
　　從表3可以看出，滇獨蒜蘭浸膏1.5、3.0 g/kg劑量能明顯抑制二甲苯致炎小鼠耳廓腫脹度，與陰性對照組比較有顯著性差異（P＜0.05）。
　　3 討論
　　為探討滇獨蒜蘭的藥效作用，本研究采用了經典動物實驗模型即氨水引咳和二甲苯致炎，結果表明滇獨蒜蘭有較好的鎮咳及抗炎效果；結果證明滇獨蒜蘭具有抗炎、鎮咳作用，其作用的活性成分及其作用機理有待進一步研究。滇獨蒜蘭的最大給藥劑量為8 g/kg（折合成生藥量3.54 g/kg）。
　　參考文獻：
　　［1］江蘇省植物研究所.新華本草綱要［M］.上海：上海科學技術出版社，1990：610~611.
　　［2］陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京：人民衛生出版社，1994：70~71.
　　［3］張大方，金若敏，李儀奎.藥理與中藥藥理實驗［M］.上海：上海科學技術出版社，2007：51.
　　（收稿日期：2011-06-20）