果酒中鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯檢測方法研究

吳繼軍， 徐玉娟， 肖更生， 劉學銘， 唐道邦， 溫 靖

(廣東省農業科學院蠶業與農產品加工研究所/廣東省農產品加工公共實驗室，廣東廣州 510610)

果酒中鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯檢測方法研究

吳繼軍， 徐玉娟， 肖更生， 劉學銘， 唐道邦， 溫 靖

(廣東省農業科學院蠶業與農產品加工研究所/廣東省農產品加工公共實驗室，廣東廣州 510610)

鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯是使用最廣泛的增塑劑鄰苯二甲酸二-2-乙基己基酯在體內的主要代謝產物，對人體有一定的危害.建立了一種鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯的氣相色譜－質譜聯用檢測方法，并采用該方法對荔枝酒中鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯的含量進行了檢測.

鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯;鄰苯二甲酸二-2-乙基己基酯;檢測方法;增塑劑

人們在生活中廣泛使用塑料，鄰苯二甲酸酯類是PVC塑料中應用最多的一類增塑劑，約占增塑劑總產量的85%，其中鄰苯二甲酸二-2-乙基己酯(簡稱DEHP，結構式如圖1)因增塑性能優良，是鄰苯二甲酸酯類增塑劑中用量最大的一種.據1995年全國第三次工業普查數據，全國PVC塑料樹脂產量141.48萬噸，其中DEHP產量16.31萬噸.

鄰苯二甲酸單-2-乙基己基酯(簡稱MEHP，結構式如圖2)是DEHP在人體內的主要代謝產物［1－3］.DEHP進入人體后代謝的第一步是在胃腸道水解成為單酯，未水解部分在肝臟、腎臟、胰腺、肺、血液、睪丸組織中也可水解為單酯［4］.只有在肝臟內，DEHP可被完全水解成鄰苯二甲酸［5］，而DEHP對人體的危害基本上是通過MEHP實現的.

圖1 DEHP結構式Fig.1 Molecular Structure of DEHP

據估計，塑料及其制品在城市垃圾中所占的比例為10%，DEHP大量存在于城市垃圾中的塑料及其制品中.在PVC塑料中，DEHP的主要作用是軟化塑料.DEHP與樹脂分子通過氫鍵和范德華力作用，彼此保持相對獨立的化學性質，隨著時間的增加，DEHP很容易從塑料中轉移到環境中［6－7］.環境中的DEHP可通過呼吸、飲食及皮膚接觸等多種途徑進入人體［8－9］.

圖2 MEHP結構式Fig.2 Molecular Structure of MEHP

DEHP和MEHP對人體具有一定的毒性，DEHP及MEHP有類似環境雌激素的作用，能干擾內分泌;對人及嚙齒類動物的生殖發育有影響，具有胚胎毒性;在動物實驗中發現，DEHP及MEHP對小鼠肝、腎、心臟等臟器有損傷，有致癌、致畸、致突變作用，能引發哮喘和過敏癥狀，對人類危害較大［10－16］.

目前對DEHP的研究較多，如蔡全英等［17］對廣州(含增城、花都)和深圳地區的9個代表性蔬菜基地土壤中的6種鄰苯二甲酸酯類化合物進行研究，發現DEHP在全部土壤樣品中均被檢出，質量濃度達2.82～25.11 mg/kg.Petersen等［18］檢測了29種成人食品，22種嬰兒食品(其中11種嬰兒配方食品)，發現 DEHP的平均質量濃度為0.11～0.18 mg/kg.日本發現奶瓶的奶頭、食品包裝、加工食品用手套和火腿中均含 DEHP［19］.蔡智鳴等［20］對杭白菊中的2種酞酸酯類化合物進行檢測，發現樣品中DEHP的質量濃度為8.52±0.46 mg/kg.2000年，Blount等［21］對目標人群中鄰苯二甲酸酯類物質的代謝物進行了研究，結果表明大于75%的受檢對象體內存在MEHP，并且生育期的婦女要高于男性和其他年齡段的女性.Latini［22］所做的一項針對新生兒的調查表明，88.1%的新生兒的臍帶血中可以分別檢測到DEHP和MEHP，而兩者可以同時檢測到的樣本數占全部被調查樣本數的77.4%.迄今為止，對MEHP的研究報道較少，因此本文開展了MEHP檢測方法的研究，并以荔枝酒為例檢測了其中MEHP的含量.

1 材料與方法

1.1 材料與設備

MEHP，德國Dr.Ehrenstorfer GMBH公司;荔枝酒，市場上采購;其他試劑，分析純;6890/5973型氣質聯用儀，HP－5MS型毛細管柱，美國Aglient公司.

1.2 樣品前處理方法

樣品60 mL與二氯甲烷60 mL等體積混合，裝入500 mL三角瓶中，在14℃控溫搖床中，以200 r·min－1萃取4 h，二氯甲烷層經微濾后采用旋轉蒸發儀在35℃條件下進行濃縮，濃縮到3 mL左右.將濃縮后的樣品直接進氣質聯用儀進行分析.

1.3 氣質聯用條件

在35℃保持6 min，以3℃/min的速度升至180℃，保持2 min，以5℃/min的速度升至270℃，保持3 min.

2 結果與討論

2.1 MEHP檢測標準曲線

用二氯甲烷將標準品稀釋到質量濃度為50～600 mg/kg，直接進樣進行檢測，標準品在71.2 min出峰，標準品色譜圖如圖3，對譜圖中標準品峰面積進行積分，得到峰面積與標準品質量濃度的關系，回歸方程是 y=2.68 ×10－6x+33.3，R2=0.992.

2.2 市售荔枝酒MEHP檢測

某市售荔枝酒經樣品處理后，采用GC/MS檢測，重復5次，典型譜圖如圖4所示，NIST2005譜庫檢索匹配度為91%，采用標準曲線計算MEHP平均質量濃度為 35.95 mg/kg，標準偏差(RSD)為6.3%.加內標300 mg/kg，檢測3次，檢測平均回收率達到93.6%，方法準確度較高.

圖3 MEHP標準品圖譜Fig.3 Chromatogram of MEHP standard

圖4 市售荔枝酒中MEHP檢測的色譜圖Fig.4 Chromatogram of MEHP in litchi wine

分析結果顯示荔枝酒中含有一定的MEHP，可能來自于荔枝產地的土壤、大氣、水中，也有可能是生產過程中包裝材料等使用了塑料，也有可能是在荔枝汁荔枝酒加工過程中產生，其產生途徑有待進一步研究.

3 結論

建立了一種MEHP的氣質聯用檢測方法，對一種市售的荔枝酒中的MEHP進行檢測，采用標準曲線計算出MEHP的平均質量濃度為35.95 mg/kg.其來源可能是荔枝產地的土壤、大氣、水，也可能是包裝材料的塑料，也有可能是加工過程中受到污染.如能采用其他方法同時檢測，可使準確度，可信度進一步提高.

［1］張蘊暉，陳秉衡，丁訓誠，等.DBP、DEHP及其代謝物MBP、MEHP的體內雌激素樣活性分析［J］.環境與職業醫學，2005，22(1):11 －12.

［2］朱正平，王玉邦，宋玲，等.鄰苯二甲酸單乙基己基酯對原代培養大鼠睪丸Leydig細胞睪酮合成的影響［J］.中華男科學，2005，11(4):247 －251.

［3］Davis B J，Maronpot R R，Heindel J J.Di-(2-ethylhexyl)phthalate suppresses estradiol and ovulation in cycling rats［J］.Toxicol Appl Pharmaco1，1994，128(2):216 －223.

［4］Yano R，Nakamura T，Aono H.The amount of the loss of cyclosporine a dose correlated with the amount of leaching di(2-ethylhexyl)phthalate from polyvinyl chloride infusion tube［J］.Yakugaku Zasshi，2001，121(2):139 －144.

［5］張蘊暉.鄰苯二甲酸二乙基己酯對環境和生物體的危害［J］.國外醫學衛生學分冊，2002，29(2):73－77.

［6］陳蕙，汪瑗，朱若華.兩種色譜法對塑料食品包裝袋中鄰苯二甲酸酯類化合物的分析［J］.分析試驗室，2006，25(4):45 －49.

［7］王連平，羅南，張春獻.塑料食品袋溶出酞酸酯DBP和DEHP的測定［J］.同濟大學學報(醫學版)，2005，26(1):15－17.

［8］Jennifer J，Adibi，Frederica P P，et a1.Prenatal exposures to phthalates among women in New York city and krakow［J］.Envkon Health Perspect，2003，111(14):1719－1722.

［9］楊左軍，王成云，張偉亞，等.PVC塑料中鄰苯二甲酸酯類增塑劑在體液中的遷移行為研究［J］.聚氯乙烯，2006，34(2):23 －27.

［10］Aldyreva M V，KIimova T S，Iziumova A S，et al.The effect of phthalate plastieizers on the generative function［J］.Gig Tr Prof Zabol，1975，19(12):25 －29.

［11］馬明月，張玉敏，裴秀叢，等.DEHP及MEHP對小鼠卵巢顆粒細胞分泌功能的影響［J］.癌變·畸變·突變，2010，22(2):104 －109.

［12］蔡曉輝，沈浣，鹿群，等.鄰苯二甲酸－單－乙基己基酯對人卵巢顆粒細胞活性及分泌功能的影響［J］.中國婦產科臨床雜志，2010，11(5):335 －339.

［13］Fredricsson B，Moller L，Pousette A.Human sperm motility is affected by plasticizers and diesel particle extracts［J］.Pharmacol Toxicol，1993，72(2):128 － 133.

［14］Kleinasasser N H，Harreus U A.Softeners in synthetic materials-are they harmiful to humans frist indication of genotoxic effect of phthalates［J］.Mmw Fortschr Der Med，1999，141(40):46 －49.

［15］Foster P M D，Cattley R C，Mylchreest E.Effects of din-butyl phthalate(DBP)on male reproductive development in the rat:implications for human risk assessment［J］.Food Chem Toxicol，2000，38(1):97 －99.

［16］Gary L E，Ostby J，Furr J，et al.Perinatal exposure to the phthalates DEHP，BBP，and DINP，but not DEP，DMP，or DOTP，alters sexual differentiation of the male rat［J］.Toxicol Sci，2000，58(2):350 － 365.

［17］蔡全英，莫測輝，李云輝.廣州、深圳地區蔬菜生產基地土壤中鄰苯二甲酸酯(PAEs)研究［J］.生態學報，2005，25(2):283 －288.

［18］Petersen J H，Breindahl T.Plasticizers in total diet samples，baby food and infant formulae［J］.Food Additives and Contaminants，2000，17(2):139 －141.

［19］姚衛蓉.食品中酞酸酯類污染物的研究概況［J］.食品研究與開發，2004，25(6):21 －23.

［20］蔡智鳴，王楓華，張前龍，等.杭白菊中酞酸酯類環境污染物的測定［J］.同濟大學學報，2004，25(4):388－390.

［21］Blount B C，Silva M J，Candill S P，et al.Levels of seven urinary phthalate metabolites in a human reference population［J］.Environ Health Perspect，2000，108(10):972－982.

［22］Latini G，De Felice C，Presta G.In utero exposure to di-(2-ethylhexyl)phthalate and uration of human pregnancy［J］.Environ Health Perspect，2003，111(14):1783－1785.

(責任編輯:葉紅波)

Method for Determining Mono(2-ethylhexyl)Phthalate in Fruit Wine

WU Ji-jun， XU Yu-juan， XIAO Geng-sheng， LIU Xue-ming， TANG Dao-bang， WEN Jing
(Guangdong Open Access Laboratory of Agricultural Product Processing，Sericulture＆ Farm Produce Processing Research Institute，Guangdong Academy of Agricultural Science，Guangzhou 510610，China)

Di(2-ethylhexyl)phthalate(DEHP)is the most commonly used plasticizer in polyvinyl chloride(PVC)products.Mono(2-ethylhexyl)phthalate(MEHP)is initial metabolism of DEHP in animals and humans，which is harmful to animals and humans.The method for determining MEHP was established using GC/MS in this paper.The yield of MEHP in litchi wine was detected using this method.

MEHP;DEHP;determination;plasticizer

TS207.3

A

1671-1513(2011)04-0039-03

2011－03－09

廣東省科技計劃項目(2007B080401019，2008B080401008).

吳繼軍，男，研究員，碩士，主要從事農產品加工方面的研究.