HPLC法測定通之舒膠囊中丹參酮ⅡA含量

譚玉龍 韓 苗

（1、哈爾濱親情制藥有限公司，黑龍江 哈爾濱 150029 2、哈爾濱仁皇藥業有限公司，黑龍江 哈爾濱 150300）

通之舒膠囊是以丹參、山楂、降香、柞蠶蛹為原料，經特殊制劑工藝制成。本產品活血通脈。適用于冠心病、心絞痛屬心血瘀阻證的輔助治療，可改善胸悶、胸痛等癥狀。丹參是通之舒膠囊中的君藥，而丹參酮ⅡA是丹參的重要有效成分之一，因此，本試驗用高效液相色譜法對該制劑中的丹參酮ⅡA進行了含量測定。本實驗建立了一種HPLC法測定其中丹參酮ⅡA含量，重現性好。可用于評價丹參酮ⅡA及制劑中該成分的指標。

1 儀器與試劑

美國Agilent 1100色譜儀；丹參酮ⅡA對照品 (中國生物制品檢定所，供含量測定用）；甲醇為色譜純；水為純化水。

2 方法與結果

2.1 檢測波長的選擇

取丹參酮ⅡA對照品適量，加甲醇溶解，在 200～400nm波長掃描，結果本品在270.0nm處有最大吸收，故選擇270nm作為檢測波長。

2.2 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18（4.6mm×250 mm，5μm）；流動相：甲醇―水（73:27）；流速：1.0ml/min；檢測波長：270nm；進樣量：5μl。理論板數按丹參酮ⅡA峰計算應不低于2000。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取丹參酮ⅡA對照品10.01mg，置50ml棕色量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。精密量取對照品貯備液5ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（每1ml中含丹參酮ⅡA 40.04μg）。

2.4 供試品溶液的制備

取本品10粒，傾出內容物，精密稱定，研細，取 1g，精密稱定，精密加入甲醇 25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.5 方法學考察

2.5.1線性關系考察

分別精密量取丹參酮ⅡA對照品貯備液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml置 25ml棕色量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，照高效液相色譜法,分別量取5μl注入液相色譜儀,測定。以濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標進行線性回歸,方程為 Y=75.506X+7.15，r=0.9995。結果表明,丹參酮ⅡA在8.008～72.072μg/ml范圍內呈良好線性關系。

2.5.2精密度試驗

取同一樣品溶液連續進樣6次，測得丹參酮ⅡA的峰面積RSD=1.1%。

2.5.3重復性試驗

取同一批通之舒膠囊，按2.4項下的方法操作，平行制備6份樣品溶液，依樣品測定法測定，計算丹參酮ⅡA的含量，結果RSD=1.5%。

2.5.4穩定性試驗

將同一樣品溶液室溫條件下放置，分別于 0、2、4、6、8、12h 按上述色譜條件測定樣品液峰面積，并計算相對標準偏差。結果RSD=1.6%。表明樣品溶液在12h內穩定。

2.5.5回收率試驗

采用加樣回收法，取已知含量的通之舒膠囊10粒，添加一定量的丹參酮ⅡA對照品溶液，按2.4項下的方法操作，制備成加樣回收供試溶液，依樣品測定法測定。結果，丹參酮ⅡA的加樣回收率為99.28%，RSD=1.1%（n=6）。

2.6 樣品測定

取三批樣品，按2.4項下的方法操作，制成供試品溶液，在上述色譜條件下，分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各5μl注入液相色譜儀，依法測定。結果三批樣品含量均符合規定。

3 討論

3.1通過比較甲醇、10%甲醇、15%甲醇、50%甲醇為提取溶劑，結果采用甲醇作為提取溶劑效果最好。同時考察了不同超聲處理時 間 20min、30min、40min， 結 果 表 明 超 聲30min后丹參酮ⅡA基本提取完全，故選擇提取方法為超聲30min。

3.2在測定丹參酮ⅡA含量時，曾分別考察了不同比例的甲醇―水（70：30）、甲醇―水（73：27）、甲醇―水（80：20）、甲醇―水―冰醋酸（70：29：1），結果以甲醇―水（73：27）為流動相時溶液分離效果最佳。

通過以上實驗測定通之舒膠囊中丹參酮ⅡA的含量，結果表明此方法簡便、準確、穩定性與重復性好，可有效控制產品質量。

[1]胡少娟，HPLC測定心可寧膠囊中丹參酮ⅡA 的含量，海峽藥學，2009，10（21）:69-70。

[2]黃烽，HPLC法測定丹舒膠囊中丹參酮ⅡA的含量，藥物鑒定，2009,18（3）:9。