宋力,沈久明,金紫荷,施剛偉,張克立
(1.信陽師范學院化學化工學院,河南信陽464000;2.武漢大學化學與分子科學學院,湖北武漢430072)
花生仁中抗氧化成分的研究與分析
宋力1,2,沈久明1,金紫荷1,施剛偉1,張克立2
(1.信陽師范學院化學化工學院,河南信陽464000;2.武漢大學化學與分子科學學院,湖北武漢430072)
采用恒溫水浴法﹑回流提取法﹑微波提取法﹑超聲波提取法探討花生仁的抗氧化性,通過對羥自由基的清除作用比較各種方法的優缺點。結果表明:以氫氧化鈉作溶劑,采用恒溫水浴法的提取效果較佳,其最佳工藝條件為:以0.1mol/L氫氧化鈉溶液為溶劑,溫度為37℃,時間為60min。
花生仁;抗氧化成分;提取
花生果具有很高的營養價值,內含豐富的脂肪和蛋白質,并含有硫胺素、核黃素、尼克酸等多種維生素。花生種子富含油脂,多數含油45%~55%,少數品種可達60%左右,從花生仁中提取油脂呈淡黃色,透明、芳香宜人,是優質的食用油。在紡織工業上用作潤滑劑,機械制造工業上用作淬火劑。為了提高花生的綜合效益,花生的開發和利用受到了越來越多的重視。臨床試驗表明,利用花生米為原料制成的寧血片、止血寧注射液和寧血糖漿等,對于消化道出血、肺結核及支氣管擴張咯血、泌尿系統出血、齒齦出血及外傷性滲血等均有良好的止血作用。此外,花生仁還可以用來制取花生色素,產品既可用于食品的調色,又具有明顯的抗氧化作用,有利于食品的保存[1,2]。
花生的以上功用都與花生中的抗氧化成分有著密切關系。與發達國家相比,我國花生資源的開發和利用程度還相距甚遠,并未形成產業優勢。因此,綜合利用花生仁功能成分,提高其經濟效益,是我國花生生產的一項重要任務[3]。
本文采用四種方法研究和分析花生仁中抗氧化成分,通過它們的提取物對羥自由基的清除率來探討提取花生仁中抗氧化成分的最佳工藝條件,以期為花生的綜合利用提供科學依據。
供試材料為生花生,市售,將其干燥后粉碎,在干燥箱中60℃下烘干備用。
立鶴牌102型電熱恒溫干燥箱(山東濰坊醫藥集團股份有限公司醫療器械廠);DZKW-4電子恒溫水浴鍋(北京中興偉業儀器有限公司);Galanz牌名秀光波GB023CT-K3(佛山市順德區格蘭仕微波爐電器有限公司);VIS-7220型分光光度計(北京第二光學儀器廠);KQ2200型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);FA2004型電子天平(上海上平儀器公司);SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)。
試劑:95%乙醇(天津市化學試劑三廠);硫酸亞鐵(天津市凱通化學試劑有限公司);30%過氧化氫(天津市永大化學試劑開發中心);水楊酸(中國五聯化工廠上海);氫氧化鈉(天津市凱通化學試劑有限公司);所用試劑均為分析純。
將新鮮的花生剝殼,取花生仁,研碎,60℃烘干待用。分別用恒溫水浴法﹑回流提取法﹑微波提取法﹑超聲波提取法等四種方法提取其中抗氧化成分并且通過測定吸光度分析其對羥自由基的清除率。在試管中依次加入3mL的2mmol/L FeSO4溶液、3mL的6mmol/L水楊酸溶液、3mL的1mmol/LH2O2溶液、1mL待測液、待測液溶劑,做三組平行試驗。將試管中溶液在37℃下恒溫水浴1 h后,用VIS-7220型分光光度計在2 cm比色皿中510 nm下測定三組溶液的吸光度。
2.1.1恒溫水浴法
稱取12.5g研碎花生樣品3份,分別置于錐形瓶中,各加入250mL蒸餾水95%乙醇0.1mol/L氫氧化鈉溶液,搖勻后,于37℃溫60min后取出,測其吸光度值[4~7]。表1、2、3分別是以蒸餾水、95%乙醇、氫氧化鈉溶液為溶劑采用恒溫水浴法測得的吸光光度值。

表1 恒溫水浴法測得的吸光度數據(蒸餾水為溶劑)

表2 恒溫水浴法測得的吸光度數據(95%乙醇為溶劑)

表3 恒溫水浴法測得的吸光度數據(0.1mol/L氫氧化鈉溶液為溶劑)
2.1.2回流提取法
回流提取法是用乙醇等易揮發有機溶劑加熱回流提取原料成分,直至回流提取完全的方法。稱取12.5 g研碎花生樣品1份,置于燒瓶中,加入250mL 95%乙醇,于37℃恒溫水浴鍋中回流10 h,測其吸光度值。表4是采用回流提取法測得的吸光度數值。

表4 回流提取法測得的吸光度數據
2.1.3微波提取法
稱取12.5 g研碎花生樣品1份,置于小燒杯中,加入250mL 95%乙醇,在40w火力下,7.5min后取出,靜置,于37℃水浴恒溫60min后取出,測其吸光度值[8,9]。表5是采用微波提取法測得的吸光度數值。

表5 微波提取法測得的吸光度數據
2.1.4超聲波提取法
該法是利用超聲波的振動力破碎細胞壁和細胞器,加速植物有效成分的浸出提取,同時超聲波的次級效應,如乳化,擴散,化學效應等作用加速細胞內有效成分的溶出[10]。稱取12.5g粉碎干燥花生樣品,置于小燒杯中,加入250mL 95%乙醇,2 h后取出,靜置,于37℃溫60min后取出,測其吸光度值。表6是采用超聲波提取法測得的吸光度數值。

表6 超聲波提取法測得的吸光度數據
鑒定提取物抗氧化活性的方法很多,通過對羥自由基清除率來計算提取物的抗氧化能力是很常用的一種方法[11,12]。
測得的數據代入下列公式計算清除率(P)。
P(%)=[1-(Ax-Ax0)/A0]×100%
式中:P——清除率;Ax——510 nm下加入樣品和羥自由基的吸光度值;Ax0——510 nm下樣品本身的吸光度值(不加H2O2溶液而用水代替);A0——510 nm下空白吸光度值。
以上各種方法對羥自由基清除率數據見表7。

表7 各種方法對羥基自由基清除效果的對比
將以上各個實驗得到的結果進行比較,可以看出:采用乙醇浸制法、水浸制法和微波法測定的結果計算得出的清除率數據不合實際;回流提取法不適合使用與受熱易破壞的原料成分的浸出。
采用超聲波法效果較好;以NaOH溶液做溶劑采用水浴提取法效果最佳。
4.1以氫氧化鈉作溶劑,采用恒溫水浴法,對花生仁中抗氧化物質的提取效果較佳。
4.2花生仁中抗氧化活性物質恒溫水浴法提取的最佳工藝條件:0.1mol/L氫氧化鈉溶液為溶劑,于37℃恒溫水浴60min。
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Study and analysis on the antioxidant activity of the peanut kernels
SONG Li1,2,SHEN Jiu-m ing1,JIN Zi-he1,SHIGang-wei1,ZHANG Ke-li2
(1.Department of Chemistry and Chemical Engineering,Xinyang Normal University,Xinyang Henan 46400,China;2.College ofChemistry and Molecular Sciences,Wuhan University,Wuhan Hubei,430072,China)
By thermostatic baths,refluxing extraction,microwave extraction,ultrasonic extraction research antioxidant content of peanut kernels,discusses its comparative advantages and disadvantages of various methods through the determination of free radical scavenging effect.The results indicated that the optimum solution extraction Sodium hydroxide by thermostatic baths,resonable technological conditions are the thermostatic water sodium hydroxide solvent extraction method,the temperature is 37 d℃,the time is 60min.
peanut kernel;antioxidant content;extraction
10.3969/j.issn.1008-1267.2011.02.007
TQ314.249
A
1008-1267(2011)02-0016-03
2010-11-18
國家自然科學基金資助項目(20071026).
宋力,女,副教授,現從事材料化學、固體化學和天然產物的提取研究。