黃蜀葵花紅外指紋圖譜的研究

徐柏頤，談獻(xiàn)和，朱華云*，池玉梅

(1.江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)有限公司，江蘇 泰州 225500；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210046)

黃蜀葵花紅外指紋圖譜的研究

徐柏頤1，談獻(xiàn)和2，朱華云1*，池玉梅2

(1.江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)有限公司，江蘇 泰州 225500；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210046)

目的：建立黃蜀葵花的紅外指紋特征圖譜，為其品種的鑒定及品質(zhì)評(píng)價(jià)提供新技術(shù)。方法：溴化鉀壓片，采用峰位、相對(duì)吸光度的定性分析方法。結(jié)果：通過(guò)對(duì)10批次樣品的分析，初步建立了黃蜀葵花的傅立葉變換紅外指紋圖譜，方法學(xué)考察結(jié)果顯示符合要求，但其反映黃蜀葵花花冠和花萼區(qū)別的特征不明顯。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、特征性強(qiáng)。

黃蜀葵；指紋圖譜；紅外

黃蜀葵花最早記載于《嘉佑本草》[1]，分布廣泛、資源豐富。《本草綱目》[2]記載：其花氣味甘、寒、滑、無(wú)毒，主治小便淋及催生，治諸惡瘡膿水久不瘥者，作末敷之即愈，為瘡家要藥，消疽腫，浸油涂湯火傷等。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，黃蜀葵花的黃酮類成分具有保護(hù)腦缺血、心肌缺血，消除鈉潴留、改善腎功能以及修復(fù)口腔黏膜潰瘍等作用[3]。近年來(lái)，隨著對(duì)黃蜀葵花化學(xué)成分[4]、提取方法、含量測(cè)定[5,6]及藥理作用等進(jìn)行的一系列研究，黃蜀葵花潛在的開(kāi)發(fā)價(jià)值日益體現(xiàn)。

傅里葉變換紅外光譜法(FTIR)不但具有專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，而且還具有制樣簡(jiǎn)單、操作方便等特點(diǎn)，因此紅外光譜法已被廣泛地應(yīng)用在多學(xué)科領(lǐng)域，尤其是在中藥材的快速鑒別、中成藥的定性、定量分析方面[7,8]。為研究黃蜀葵花的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，采用傅立葉紅外分光光度法研究建立黃蜀葵花藥材的指紋圖譜，為制定該藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、研究和開(kāi)發(fā)利用該藥材資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

IR-100紅外分光光度計(jì)，WS70-1型紅外線快速干燥器，YP-2壓片機(jī)；溴化鉀：光譜純SP。藥材采集于江蘇省3個(gè)產(chǎn)地，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)談獻(xiàn)和教授鑒定為錦葵科秋葵屬植物黃蜀葵Abelmoschusmanihot(L.)Medic.的干燥花冠和花萼，見(jiàn)表1。

表1 樣品編號(hào)表

2 方法與結(jié)果

2.1 藥材樣品制備

稱取藥材粉末(200目)1 mg，溴化鉀100 mg，置于瑪瑙研缽中，在紅外燈下研勻后，將混合粉末移入模具中，將模具移至壓片機(jī)上，抽真空，加壓(約20 MPa)約2 min，取下模具，將樣品架放入紅外分光光度計(jì)的樣品室，在4 000～400 cm-1波數(shù)范圍進(jìn)行掃描分析。

2.2 方法學(xué)考察

2.2.1 精密度試驗(yàn) 取2號(hào)藥材，按2.1項(xiàng)下的方法壓片后連續(xù)重復(fù)掃描測(cè)試6次，見(jiàn)圖1，所得紅外吸收光譜譜線具有一致性。

圖1 黃蜀葵花紅外光譜圖

2.2.2 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取2號(hào)藥材按2.1項(xiàng)下的方法壓

片后連續(xù)重復(fù)掃描，每隔1 h測(cè)定1次，結(jié)果表明樣品在6 h內(nèi)所得圖譜譜線具有一致性。

2.2.3 重復(fù)性試驗(yàn) 取2號(hào)樣品，按2.1項(xiàng)下的方法壓片后分別進(jìn)行掃描，重復(fù)操作6次,見(jiàn)圖2，所得圖譜共有峰峰位的RSD分別為0.14 %，0.029 %，0.091 %，0.23 %，0.11 %，0.028 %，0.084%，0.68 %，共有峰相對(duì)吸光度的RSD分別為1.93 %,1.30 %,2.20 %,0.00 %,0.529 %,1.47 %,2.35 %,2.18 %。

圖2 黃蜀葵花紅外光譜重復(fù)性試驗(yàn)

2.2.4 黃蜀葵紅外指紋圖譜測(cè)定 按2.1項(xiàng)下的方法對(duì)10批不同藥材進(jìn)行測(cè)試，對(duì)所得的紅外光譜圖譜的峰位和峰強(qiáng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得8個(gè)共有特征峰，其平均峰位分別為3 368.94，2 922.73，2 357.83，1 635.96，1 406.32，1 059.31，605.53 cm-1，RSD分別為0.46 %、0.020 %、0.13 %、0.62 %、1.45 %、0.10 %、0.23 %、2.77 %，均小于3 %，結(jié)果見(jiàn)表2。分別統(tǒng)計(jì)10批藥材相對(duì)于峰位1 648 cm-1吸收峰的吸光度值，得RSD分別為7.06 %,5.00 %,2.67 %,0.00 %，2.79 %，3.00 %，1.22 %，3.19 %，均小于10 %，相似度較高，符合指紋圖譜的評(píng)價(jià)要求，各產(chǎn)地藥材無(wú)明顯差異，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 結(jié)果

在4 000～400 cm-1，10批黃蜀葵藥材未見(jiàn)明顯的區(qū)別，結(jié)果見(jiàn)圖3。上述紅外指紋圖譜數(shù)據(jù)表明，不同產(chǎn)地黃蜀葵樣品的整體紅外指紋圖譜的峰形、峰位、相對(duì)峰高基本相同，其具有明顯的指紋圖譜特征：在1 040 cm-1附近有最強(qiáng)吸收；1 635 cm-1附近有次強(qiáng)吸收；另外還有6個(gè)特征峰。

表2 10批黃蜀葵藥材紅外指紋圖譜數(shù)據(jù)

圖3 黃蜀葵花紅外指紋圖譜

3 討論

紅外光譜分析具有速度快、特征性強(qiáng)的特點(diǎn)，本文試驗(yàn)了以藥材粉末與溴化鉀直接壓片的紅外分析方法，依據(jù)一定組成的物質(zhì)應(yīng)具有相對(duì)恒定的光譜參數(shù)的特性，分析黃蜀葵花的紅外光譜的峰位和相對(duì)峰強(qiáng)，結(jié)果表明黃蜀葵花的紅外光譜具有一定的特征，各產(chǎn)地不同采集時(shí)間及不同處理方法所得藥材的相似度較高，可作為鑒別黃蜀葵花藥材的方法，但方法不能很好地區(qū)別黃蜀葵花的花冠與花萼。由于所試藥材批次較少，特別是產(chǎn)地較少，不同產(chǎn)地的藥材間是否具有顯著差別，將有待進(jìn)一步研究。

黃蜀葵的主要成分是黃酮類化合物[4]，其中以金絲桃苷等為其主要藥效成分，C=O主要吸收峰在1 648 cm-1，峰強(qiáng)度的大小直接影響藥效成分的組成和含量，因此選擇此吸收峰作為指標(biāo)性吸收峰。

[1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].下冊(cè).上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1986：2075.

[2] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草[M].第五冊(cè).第14卷.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1998：331-333.

[3] 高雷,張平,程鋼.黃蜀葵花的研究進(jìn)展[J].安徽醫(yī)藥,2008,(3)：114-115.

[4] 周正華,杜安全,王先榮.黃蜀葵花中黃酮類成分的含量測(cè)定[J].中藥材,2004,27(11)：835-836.

[5] 楊志芳,王維娜,楊坤,等.HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地黃蜀葵花中金絲桃苷異槲皮苷及槲皮素-3′-葡萄糖苷含量[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2005,21(5)：388-390,393.

[6] 徐柏頤.HPLC法測(cè)定黃蜀葵花中金絲桃苷的含量[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究,2006,14(2)：32-34.

[7] 宿樹(shù)蘭,歐陽(yáng)臻,金曉勇.姜黃屬幾種藥材的紅外指紋圖譜鑒別研究[J].中成藥,2006,28(10)：1408-1410.

[8] 彭勇,孫素琴,趙中振,等.國(guó)產(chǎn)枸杞屬植物的紅外指紋圖譜無(wú)損快速鑒別研究[J].光譜學(xué)與光譜分析,2004,24(6)：679-681.

ResearchonInfraredFingerprintofAbelmoschlManihot(L.)Medic

Xu Bo-yi1, Tan Xian-he2, Zhu Hua-yun1, Chi Yu-mei2

(1.SZYYGroupPharmaceuticalLimited,Taizhou225500,China; 2.NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210046,China)

Objective:To establish the infrared (IR) fingerprints to identifyAbelmoschlmanihot(L.) medic and provide a new technique for their identification and quality estimation.Methods: Pressed with KBr , analyze the peak position and relative absorption.Results: Through to ten raid of sample analyses, established initially hadAbelmoschlmanihot(L.) medic’s Fourier transformation infrared fingerprint atlas, the methodology inspection result demonstrated conformed to the requirement, but it reflected the corolla and the calyx difference characteristic not obvious.Conclusion: The method of FTIR is simple, duplication good and characteristic value.

Abelmoschlmanihot(L.)medic; Fingerprint; IR

*朱華云，E-mail：zhuhuayun26@yahoo.com.cn

2010-12-01)