血細胞分析儀與顯微鏡直接計數法檢測嗜酸性粒細胞的比較

陳佳利 鄭少麗 吳雪霞 張坤波

(廣東省饒平縣人民醫院 廣東饒平 515700)

手工法計數嗜酸性粒細胞,操作繁瑣,費時,費力,結果重復性差,已不能完全滿足臨床需要。血細胞計數儀近年來在國內各地各類醫院應用越來越多,本文對五分類血細胞分析儀與顯微鏡直接計數法計數嗜酸性粒細胞進行比較,以了解儀器對嗜酸性粒細胞計數的準確性,報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院住院及門診患者120例、空腹采靜脈血2mL,注入含EDTA·K2的真空管(由廣州陽普醫療科技股份有限公司提供)內,立即輕輕顛倒混勻(8～10次)。

1.2 儀器

中國邁瑞公司的BC5800;OLYMPUS CX21顯微鏡;美國雅培公司的CD3700;改良Neubauer血細胞計數板。

1.3 試劑

由珠海貝索生物技術有限公司提供CD3700試劑;BC5800為深圳邁瑞公司配套試劑,按《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)的方法配制[1]嗜酸性粒細胞稀釋液。

1.4 方法

1.4.1 準確度測定 采集抗凝靜脈血標本120例,先用CD3700和BC5800分別測定嗜酸性粒細胞絕對值,再用顯微鏡直接計數,計數由2名有經驗的檢驗技師進行,每人每份樣本分別計數2次。

1.4.2 精密度測定 選擇高、中、低值嗜酸性粒細胞值不同的抗凝靜脈血標本各1份,先分別用CD3700和BC5800將每份標本重復計數10次;顯微鏡直接計數法嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)由2名檢驗技師進行,每人每份標本重復計數10次,算出各自的CV。

表1 五分類血細胞分析儀與手工法測定不同值的嗜酸性粒細胞的結果比較(±s)

表1 五分類血細胞分析儀與手工法測定不同值的嗜酸性粒細胞的結果比較(±s)

方法 高值 中值 低值 平均CV(%)(×109/L) CV(%) (×109/L) CV(%) (×109/L) CV(%)CD3700 4.502±0.041 0.83 1.135±0.020 1.77 0.181±0.05 4.03 2.21 BC5800 4.332±0.042 0.96 1.112±0.022 1.95 0.186±0.03 3.91 2.27顯微鏡直接計數法 4.649±0.316 6.79 1.098±0.092 8.72 0.189±0.02 10.58 8.71

1.5 統計

數據采用SPSS 11.03統計軟件進行統計分析。數據以(s)表示,配對t檢驗,P＜0.05為有差異,P＜0.01為差異顯著。

2 結果

2.1 測定結果比較

精密度高、中、低值的3份標本精密度測定結果表明CD3700和BC5800對嗜酸性粒細胞絕對值計數的精密度明顯高于手工計數,見表1。

2.2 相關性

本組120例患者嗜酸性粒細胞結果CD3700、BC5800和顯微鏡直接計數法檢測分別是0.66、0.61、0.74×109/L;S分別是0.63、0.73、0.77×109/L。差異無統計學意義(P＞0.05);CD3700和BC5800的相關系數(r)為0.98,差異有統計學意義(P＜0.01),表明這2臺儀器的相關性較好。

3 討論

血液嗜酸性粒細胞計數是某些傳染性疾病、寄生蟲病、過敏性疾病、大面積燒傷及血液病等疾病診斷、治療及預后觀察的一項重要指標[2]。傳統的直接計數法操作費時費力,還受所用儀器的精密度與清潔度、稀釋液及樣本加樣量的準確性、樣本放置時間以及操作人員的技術熟練程度等諸多因素的影響。CD3700五分類全自動血細胞分析儀是利用0°和10°散射光將白細胞以胞漿內容物復雜性和細胞體積為X軸和Y軸繪制白細胞散點圖,同時利用90°消偏振光將嗜酸性粒細胞從WBC群中區分開來[3]。BC5800,采用半導體激光散射結合細胞化學染色技術,嗜酸性粒細胞特有的嗜酸性顆粒使它更易區別于其它白細胞;浮動聚類分類技術,提高散點圖邊界識別能力,使白細胞分類更準確,而自定義復檢規則,提高儀器對異常樣本的篩查效率。使嗜酸性粒細胞檢測更加準確。而本實驗這2種方法檢測的嗜酸性粒細胞結果比[4]略低,可能與所檢查的對象有關。由此可見,CD3700和BC5800方法具有良好的相關性,CV值較小,且嗜酸性粒細胞絕對值較低,其原因為全自動進樣方式,操作標準化,人為誤差得以減少。手工直接計數法CV值較大,其原因可能是儀器分析上萬個細胞與人工鏡檢計數200個細胞相比誤差較大,同時還受操作人員技術熟練程度的影響。五分類血細胞分析儀和顯微鏡直接計數測定的結果差異無顯著性,說明它們具有很高的準確度。CD3700和BC5800這2臺儀器計數嗜酸性粒細胞絕對值呈正相關,與文獻報道相符[5]。

由此可見,嗜酸性粒細胞五分類血細胞分析儀CD3700和BC5800所得結果與手工法直接計數密切相關,具有準確性高,重復性好,操作簡單,檢測速度快,便于大批量檢測等優點。在保證使用合格試劑和儀器性能穩定的條件下,五分類血細胞分析儀較高的精密度和高準確性是實驗室測定嗜酸性粒細胞可靠理想的儀器,可取代手工法,滿足臨床需要,值得推廣。

[1] 葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版,南京：東南大學出版社,2006：136.

[2] 王波,賴明,熊元,等.CELL-DYN3700全自動血細胞分析儀嗜酸性粒細胞絕對值的評價[J].檢驗醫學與臨床,2006,3(6)：143～144.

[3] 范華杰,凌勵,周道銀.全自動血液分析儀Sysmex X E -2100與Abbott CD-3700的比較分析[J].檢驗醫學,2006,21(2)：164～166.

[4] 徐金花,林賽玲,張麗娟,等.血細胞分析儀與顯微鏡直接計數法測定嗜酸性粒細胞的比較[J].檢驗醫學與臨床,2009,6(21)：1805～1806.

[5] 費中海,李君安,唐中,等.BC5500計數嗜酸性粒細胞絕對值的可信性分析[J].中國誤診學雜志,2008,28(10)：6854～6855.