廣西香蕉真菌性葉斑病病原菌種群結構分析

林善海， 黃思良， 覃麗萍， 付 崗，， 岑貞陸， 謝 玲

（1.廣西大學農學院，南寧 530005； 2.南陽師范學院生命科學與技術學院，南陽 473061；3.廣西農業科學院微生物研究所，南寧 530007）

廣西香蕉真菌性葉斑病病原菌種群結構分析

林善海1， 黃思良2＊， 覃麗萍3， 付 崗1，3， 岑貞陸3， 謝 玲3

（1.廣西大學農學院，南寧 530005； 2.南陽師范學院生命科學與技術學院，南陽 473061；3.廣西農業科學院微生物研究所，南寧 530007）

2009年2－3月對廣西香蕉主產區真菌性葉斑病病原進行抽樣鑒定。結果顯示，廣西香蕉真菌性葉斑病病原至少有10種，主要病原為Cordana musae，分布廣，檢出率為56.77%～92.19%；Corynespora cassiicola和Deightoniella torulosa為次，兩種病原菌均主要集中在南寧地區，檢出率分別為32.34%和22.61%；葉斑病類型以單一病原侵染為主，檢出率為78.13%～92.19%；復合侵染的葉斑病類型以2種病原共同侵染居多。

香蕉葉斑病； 病原菌； 調查； 復合侵染

香蕉葉斑病是多種病原真菌引起的一類世界性病害。據統計，其病原菌至少有50種［1－4］。香蕉葉斑病常由兩種或多種病原復合侵染所致，通過癥狀難以準確判斷病原種類，給香蕉葉斑病的有效防治帶來較大的困難。國內已有香蕉葉斑病病原種類和分布的相關報道［5－8，11］，但缺乏病原菌種群結構的系統研究。20世紀80年代，巫錫奎等［6］報道廣西真菌性香蕉葉斑病的主要病原菌為香蕉暗雙孢（Cordana musae），但調查區域僅限于廣西東南部（浦北、玉林、博白和南寧郊區）。近十幾年，隨著水果產業結構的調整和不斷深化，香蕉市場效益逐漸提升，廣西香蕉產業發展迅猛，特別是20世紀90年代之后，在氣候最適宜栽培香蕉的右江河谷一帶的百色市香蕉產業得到蓬勃發展［9］。種植結構、優良品種的更替及種苗的頻繁調運勢必造成香蕉葉斑病病原的擴散及群體的變化。此外，隨著香蕉連作年限的延長，病原菌的種群結構也可能發生變化。因此，在廣西開展更大范圍的香蕉葉斑病病原菌的調查，對指導香蕉病害防治具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 病害標本的采集

調查時間為2009年2－3月。廣西香蕉主產區隨機抽樣地點：南寧市金陵鎮（22°54′N，108°02′E）、古潭鎮（22°58′N，107°46′E）、南圩鎮（23°07′N，107°40′E）和寧武鎮（23°17′N，108°27′E）；百色市祥周鎮（23°35′N，107°03′E）、林逢鎮（23°35′N，107°12′E）和百育鎮（23°40′N，106°59′E）；北海市常樂鎮（21°50′N，109°25′E）和潿洲島鎮（21°02′N，109°06′E）；欽州市武利鎮（22°09′N，109°14′E）；玉林市福綿鎮（22°34′N，110°03′E）。每個地點隨機采集樣品100份以上，觀察和記錄典型病害癥狀，將新鮮樣品帶回實驗室。

1.2 病原真菌的鑒定

用干凈紗布去除葉面的灰塵和雜物，解剖刀刮取病健交界處葉肉組織，制成臨時玻片，在光學顯微鏡下觀察，記錄每一份樣品的病原種類。病原菌的鑒定參照《真菌鑒定手冊》［10］和《廣東果樹真菌病害志》［11］。對病斑組織上產生真菌較少的樣品噴灑無菌水，保鮮袋分裝，室溫保濕2～3d，再刮取病斑組織上的真菌進行顯微觀察。根據不同類型典型癥狀進行病原菌的分離、培養和純化，光學顯微鏡觀察分離物的形態特征，對不常見的或難確定的分離菌，通過柯赫氏法則驗證其致病性。

1.3 病原真菌組成分析

根據病原鑒定的結果，統計、比較每個調查點病原菌的檢出頻率以及所分離的單個病斑由單一病原侵染或兩種及多種病原復合侵染的頻率。

2 結果與分析

2.1 病原種類及分布

調查結果表明，廣西真菌性香蕉葉斑病病原至少有10種，分別為Alternaria musae、Cordana musae、Corynespora cassiicola、Curvularia fallax、C.lunata、Deightoniella torulosa、Exserohilum rostratum、Mycosphaerella fijiensis、Mycosphaerella musicola和Pestalotiopsis menezesiana。南寧檢出10種，百色7種，北海9種，欽州8種，玉林7種（表1）。在多種病原真菌中，以Cordana musae為主，檢出率達11.83%～94.49%，其所致的灰紋病發生較嚴重；Corynespora cassiicola和Deightoniella torulosa為次，兩個病原菌分布廣泛，但均以南寧市的檢出率較高（分別為32.34%和22.61%）。M.musicola引起的病害局部發生，在北海市常樂鎮發生較嚴重，病原菌檢出率達86.02%（表1，表2）。P.menezesiana主要危害西貢蕉，在南寧較常見。

表1 廣西香蕉葉斑病病原真菌檢出率1）

2.2 病原菌復合侵染情況

廣西香蕉主產區的葉斑病以單一病原獨立侵染為主，檢出率為78.13%～92.19%；復合侵染葉斑類型以兩種病原真菌共同侵染居多，最高比率達21.87%（表3）。

表2 幾種主要香蕉葉斑病菌在廣西不同市的檢出率比較

表3 廣西真菌性香蕉葉斑病復合侵染狀況

3 小結與討論

對廣西香蕉主產區葉斑病病原真菌進行了調查和鑒定。結果表明，廣西真菌性香蕉葉斑病病原菌至少有10種（表1），其中3種在廣西尚未見報道，分別為多主棒孢（C.cassiicola）、斐濟球腔菌（M.fijiensis）和嘴突臍孢（E.rostratum）。

20世紀80年代，廣西真菌性香蕉葉斑病的主要病原菌為Cordana musae［6］。經過多年種植模式、規模、品種等的調整后，病原群體勢必發生變化。本研究結果表明，Cordana musae在廣西各香蕉產區分布廣泛，檢出率56.77%～92.19%，是廣西香蕉葉斑病的主要病原真菌（表1）。近十多年來，百色市的香蕉產業發展迅速，但至今未見有該產區香蕉葉斑病病原菌調查的相關報道。通過調查發現，Cordana musae也是百色香蕉產區的主要病原真菌，與廣西其他種植時間長的香蕉產區基本一致。可能的原因是：（1）通過種苗調運將病原從其他發病嚴重產區帶入了百色香蕉產區，百色地區氣候與廣西其他香蕉產區差異不大，適合Cordana musae的發生、發展；（2）該地區一直有香蕉種植，但10年前種植規模較小，病害的發生情況未曾引起重視，隨著當地種植規模的不斷擴大并多年連作，病原基數不斷提高，使得該病也嚴重發生。

在世界香蕉主產區多種葉斑病病原真菌中，以Mycosphaerella屬的3個種M.fijiensis、M.musicola和M.eumusae為主要病原菌，其中以M.fijiensis對香蕉造成的損失最大［1］。國內報道認為Mycosphaerella屬引起的香蕉葉斑病病原菌為M.musicola［5－7，12］。巫錫奎等［6］報道，在 20世紀80年代中后期，該菌在廣西局部地區（欽州）出現。本研究結果顯示，廣西的Mycosphaerella香蕉葉斑病的主要病原為M.musicola，與前人報道一致，但在廣西分布廣泛，主要在北海和南寧地區，以北海市常樂鎮危害較嚴重，檢出率高達86.02%（表1，表2）。20世紀80年代，M.fijiensis傳播到我國臺灣［13］，90年代末，該菌出現在海南，屬次要病原菌［7］。幾年后，該菌引起的葉斑病已上升為海南島的主要香蕉葉斑病［14－15］。本研究結果顯示，M.fijiensis已在廣西零星出現。出現的可能原因有：1）香蕉苗和種質材料的引種將該病原菌從海南帶入廣西；2）沿海地區為我國西南窗口，進出口貿易的通道，貿易頻繁，M.fijiensis隨著包裝材料從相鄰香蕉種植國家進入廣西沿海地區。

雖然香蕉葉斑病存在多種病原真菌，且常發生復合侵染，但調查結果顯示，廣西的香蕉葉斑病主要是由Cordana musae獨立侵染引起（表2，表3）。復合侵染的香蕉葉斑病較少，在復合侵染中以兩種病原的復合侵染為主（表3）。Mycosphaerella葉斑病是香蕉的一個毀滅性病害，尤其是M.fijiensis引起的香蕉葉斑病對香蕉造成的損失最大，因此有必要對該菌在廣西所致的葉斑病進行病害流行學研究，為該病害的科學防控提供指導。

［1］ Crous P W，Groenewald J Z，Aptroot A，et al.Integrating morphological and molecular data sets onMycosphaerella，with specific reference to species occurring onMusa［C］∥Jacome L，Lepoivre P，Marin D，et al.Mycosphaerellaleaf spot diseases of banana：present status and outlook-proceedings of the 2nd International Workshop onMycosphaerellaLeaf Spot Diseases.Montpellier，France：INIBAP，2003：43-57.

［2］ 桑利偉，鄭服叢.我國香蕉的主要病害及防治［J］.安徽農業科學，2006，34（9）：1841-1845.

［3］ Surridge A K J.Fungi associated with banana leaf diseases in South Africa［D］.Pretoria：University of Pretoria，2006.

［4］ Huang S L，Yan B，Wei J G，et al.First report of plantain zonate leaf spot caused byPestalotiopsis menezesianain China［J］.Australasian Plant Disease Notes，2007，2：61-62.

［5］ 王璧生，劉慧怡，劉朝禎，等.廣東香蕉葉斑病的發生與鑒定［J］.廣東農業科學，1990（3）：33-36.

［6］ 巫錫奎，劉志均，陳君志，等.廣西香蕉葉斑病病原菌研究［J］.廣西農業科學，1990（4）：24-27.

［7］ 鄧曉東，張運強，張輝強，等.海南香蕉的葉斑病［J］.熱帶農業科學，1998（6）：28-32.

［8］ 黃朝豪，李增平，馬遙燕.海南島香蕉病害記述［J］.中國南方果樹，2000，29（3）：23-25.

［9］ 龐庭頤.廣西香蕉越冬氣候條件與香蕉氣候區劃［J］.廣西氣象，1991，12（1）：30-34.

［10］魏景超.真菌鑒定手冊［M］.上海：科學技術出版社，1979.

［11］戚佩坤.廣東果樹真菌病害志［M］.北京：中國農業出版社，2000：24-37.

［12］王璧生，羅啟浩.廣東香蕉的主要病害及其防治［J］.中國南方果樹，1997，26（3）：33-36.

［13］Chuang T Y.Chemical control of banana leaf spot caused byMycospherella fijiensisvar.difformis［J］.Plant Protection Bulletin（Taiwan），1981，23：87-94.

［14］謝藝賢，張欣，范鴻雁，等.海南香蕉褐緣灰斑病原菌的核酸分析鑒定［J］.熱帶作物學報，2004，25（2）：24-27.

［15］桑利偉.海南島香蕉真菌病害調查及彎孢霉的生物學特性研究［D］.海南：華南熱帶農業大學，2007.

Investigations on the fungal populations associated with banana leaf spot diseases in Guangxi

Lin Shanhai1， Huang Siliang2， Qin Liping3， Fu Gang1，3， Cen Zhenlu3， Xie Ling3
（1.College of Agriculture，Guangxi University，Nanning530005，China；2.College of Life Science and Technology，Nanyang Normal University，Nanyang473061，China；3.Microbiological Research Institute，Guangxi Academy of Agricultural Sciences，Nanning530007，China）

Investigations on banana leaf spot fungal pathogens were conducted in major banana production areas in Guangxi between February and March in2009.The results showed that at least 10 fungal pathogens were found in the banana leaf spot samples.Cordana musaewas the most frequently observed fungal pathogen with a detection rate of 56.77%－92.19%in the samples.Corynespora cassiicolaandDeightoniella torulosawere mainly observed in the samples collected from the plantations at Nanning City，with the detection rates of 32.34%and 22.61%，respectively.The banana leaf spots with only a single pathogen were predominant（78.13%－92.19%）compared to those with two or more fungal pathogens.

banana leaf spot disease； pathogen； investigation； complex infection

S 436.67

A

10.3969／j.issn.0529-1542.2011.05.036

2010-11-03

2010-12-14

廣西科學基金（桂科自0728071）

＊ 通信作者 E-mail：silianghuang＠126.com