骨腫瘤患者血清細胞因子TNF-α和IL-6水平觀察及臨床意義

周 健 孫 昕

安徽醫科大學第一附屬醫院骨科，安徽合肥 230022

隨著腫瘤的研究進展，人們已初步認識到腫瘤的發生發展與細胞宿主免疫防御系統對腫瘤失去調控密切相關。本研究測定骨腫瘤患者及骨轉移患者（有遠處轉移的晚期骨腫瘤患者）血清中腫瘤壞死因子（TNF-α）和白細胞介素（IL-6）含量，研究與骨腫瘤發生發展、惡化轉移的關系，探討其在骨腫瘤惡化轉移中的作用，這對骨腫瘤的診斷、療效評估預后判斷及免疫治療具有一定的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 檢測對象

標本來源為經組織學或細胞學明確診斷的骨腫瘤患者45例（有遠處轉移的晚期骨腫瘤患者15例），年齡45～70歲，平均（60.1±10.2）歲。其中男27例，女18例。標本來源為健康體檢人員及部分本院健康醫護人員，正常對照組40例，年齡36～ 72歲，平均（53.5±8.7）歲。

1.2 標本處理

所有受試者均用一次性注射器取清晨空腹靜脈血1～2 mL，置預先處理好的清潔干燥無任何添加物的試管中，常溫下靜置后（嚴禁溶血）送腫瘤實驗室。為排除化療干擾的可能性，化療后血液在細胞毒藥物給予后1個月抽取，方法同上。

1.3 樣品處理

將樣品管編號后，置高速離心機中，以3000 r/min離心10 min，用預先經潔凈處理過的干燥吸管吸取上部清亮血清，置具塞塑料樣品管中。閉塞-70℃低溫冰箱中保存，待測。

1.4 細胞因子的檢測

細胞因子生物學活性檢測，是應用依賴于該細胸因子而增殖的細胞檢測方法，細胞因子的免疫學檢測方法通常用的是酶聯免疫吸附反應（enzyme-Linked immunosorbent assay，ELISA）的方法。本實驗檢測骨腫瘤患者血清中的TNF-α和IL-6含量水平，采用的就是ELISA方法。

1.5 統計學處理

2 結果

2.1 3組患者血清TNF-α和IL-6測定結果比較

骨腫瘤患者TNF-α和IL-6均高于健康對照組，統計學檢驗TNF-α差異有高度統計學意義（P＜0.01），IL-6差異有統計學意義（P＜0.05）。骨轉移組（遠處轉移者）TNF-α和IL-6均高于骨腫瘤組。統計學檢驗TNF-α差異有高度統計學意義（P＜0.01），而IL-6差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 TNF-α與IL-6的靈敏度和特異性

若以TNF-α正常值的3倍（45.45 pg/mL）、IL-6正常值的2倍（43.18）為診斷腫瘤截斷點[1]，則TNF-α的靈敏度為40/45=88.89%，特異性36/40=90.0%（對照組4例假陽性）；而IL-6的靈敏度為35/45=77.78%，特異性35/40=87.50%（對照組5例假陽性）。

表1 骨轉移（遠處轉移）與骨腫瘤組TNF-α和IL-6水平變化（± s，pg/mL）

表1 骨轉移（遠處轉移）與骨腫瘤組TNF-α和IL-6水平變化（± s，pg/mL）

注：與健康組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與骨腫瘤組比較，⊕P＜ 0.05，⊕⊕P ＜ 0.01

組別 n TNF-α IL-6骨轉移（遠處轉移） 15 96.71±33.12**⊕⊕ 57.43±19.74*⊕骨腫瘤組 45 69.04±35.59** 48.17±20.07*健康組 40 15.15±7.71 21.59±9.74

3 討論

近年國內外學者應用腫瘤細胞株，新鮮腫瘤組織進行研究，發現人細胞系和新鮮腫瘤結節中的IL-4、IL-6、IL-10等細胞因子占優勢[2]，血清中IL-6類細胞因子水平升高與進展期腫瘤患者的免疫抑制和惡液質相關[3]。本研究結果也證實了上述觀點，骨腫瘤組IL-6水平高于健康對照組，統計學處理差異有統計學意義（P＜0.05）。血清中IL-6水平與骨腫瘤臨床分期有關，分期越晚，腫瘤負荷越大，有遠處轉移的晚期骨腫瘤患者血清IL-6水平明顯高于無轉移的早期患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。同時研究報道也表明，有遠處轉移的晚期骨腫瘤患者，也能會產生較高水平的IL-6含量。

TNF-α可促進細胞的增殖和分化，對某些腫瘤細胞具有生長因子樣作用，并協同EGF、PDGF和胰島素的促增殖作用，促進EGF受體表達。TNF-α也可與細胞增殖密切相關的原癌基因的表達，引起細胞周期G0期向G1期轉變[4]。王昌才等[5]報道正常人血清和尿液存在一定量TNF-α，而腫瘤、艾滋病毒感染、紅斑狼瘡患者血清 TNF-α水平明顯升高。腫瘤患者血清TNF-α水平升高機制目前尚不清楚，可能與免疫反應有關。TNF-α升高往往提示腫瘤的發生。實驗中發現有遠處轉移的晚期骨腫瘤患者血清TNF-α平均值均高于正常值近6倍，而骨腫瘤組也高于正常值近3.96倍。且隨病變的加重水平亦愈高。故治療前后血清TNF-α水平的檢測可作為判斷療效的一個輔助性監測指標。

綜上所述，本研究結果顯示，IL-6、TNF-α與骨腫瘤的進展、預后有一定的相關性。應用ELISA方法測定血清中IL-6、TNF-α含量水平具有一定的臨床實用價值。在結合臨床資料的情況下，可作為臨床骨腫瘤的輔助指標之一。

[1]葉世柏.化學性食物中毒與檢驗[M].北京：北京大學出版社，1989：8-9.

[2]Asselin PC,Echchalir H,Carayol G,et al.Quantiative analysis of Th1 Th2 and TGF-beta 1 cyctokine expression in tumor.TIL and PBL of non-small cell lung cancer patients[J].Int J Cancer,1998,77(1):7-12.

[3]Wkjciechowska-Lacka A,Matecka-Nowak M,Adamiak E,et al.Serum levels of interleukin-6 in patients with lung cancer[J].Neoplasma,1996,43(3):155-158.

[4]Burger RA,Grosen EA,Ioli GR,et al.Spontaneous release of interleukin-6 by primary cultures of lymphoid and tumor cell populations purified from human overrian carvinoma[J].J Interfer-on cytokine Research,1995,15(3):255-260.

[5]王昌才，郭明戢.腫瘤壞死因子受體的生理作用及在疾病檢測中的意義[J].中外醫學（臨床生物化學與檢驗學分冊），1997，18（3）：110-112.