肝細胞生長因子檢測在急性腦梗死中的臨床意義

杜貴勝 王金亭 趙誠 王明陽

肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)是一種內皮細胞特異性生長因子，不僅可促進血管再生、組織修復、抑制細胞凋亡、殺傷腫瘤細胞、抗纖維化，作為一種新的神經營養因子，還對神經系統的生長、發育發揮重要作用，被認為是目前在細胞培養中最強的DNA合成刺激物［1］。HGF mRNA在腦中分布很廣，包括大腦皮質、嗅球、主嗅覺皮質、海馬CA1區和小腦的神經元等［2］。研究發現急性腦梗死的梗死灶周圍可見HGF表達上調［3］，從而推斷HGF可能參與了腦梗死的發生發展。本研究以2010年1月至2010年12月入住我院的ACI患者為研究對象，通過檢測患者血清HGF水平，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 ACI組：2010年1月至2010年12月在我院神經外科住院的ACI患者30例，男28例，女2例;年齡46～79歲，平均(58.2±7.6)歲;均符合全國第四屆腦血管病學術會議修訂的診斷標準［4］;并經頭顱CT或MRI證實，發病時間≤24 h，均為首次發病。對急性腦梗死患者根據臨床神經功能缺損程度評分標準［4］;按病情輕重分為輕度組(0～15分，11例)、中度組(16～30分，11例)和重度組(31～45分，8例)。所有患者均行血常規、尿常規、凝血常規、生化等檢查，排除腦出血、嚴重心肺疾病、顱內及全身腫瘤、自身免疫疾病、血液系統疾病、近期感染、輸血、嚴重肝腎功能不全，無近期使用免疫抑制劑治療等。健康對照組：均為我院同期健康體檢者，30例，男27例，女3例;年齡41～78歲，平均(57.6±8.1)歲，神經系統檢查及頭顱CT檢查無異常。兩組一般情況差異無統計學意義(P＞0.05)。

1.2 檢測方法 ACI組分別于發病后1、7、14、21、30 d各采血1次;對照組采血1次，均采取清晨抽空腹肘靜脈血6 ml，經3000r/min離心10 min，取上清液，置于-20℃冰箱保存待測。所有標本在2個月內采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法測定HGF，全部標本均為平行雙孔實驗，實驗步驟嚴格按說明書要求進行。

1.3 統計學方法 使用SPSS 16.0統計軟件進行統計學分析，檢測數據用均數±標準差(±s)表示，應用t檢驗，以P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者不同時期血清HGF比較 與正常對照組相比，腦梗死組在病程1、7、14、21 d血清HGF濃度均顯著增高(P＜0.05)。腦梗死組恢復期前各時間點之間差異無統計學意義(P ＞0.05)，(見表1)。

2.2 ACI組不同神經功能缺損程度血清中HGF水平的比較不同程度神經功能缺損腦梗死患者，急性期神經功能缺損程度越重，血清HGF水平越高，差異有統計學意義(P＜0.05)。(見表2)。

表1 兩組患者不同時期血清HGF水平(±s)

表1 兩組患者不同時期血清HGF水平(±s)

注：與對照組比較，*P＜0.05。

0.19±0.11對照組1 d 7 d 14 d 21 d 30 d ACI組 30 0.84±0.17* 0.66±0.16* 0.57±0.16* 0.49±0.15*組別例數 HGF水平(μg/L)0.16±0.08 30

表2 ACI患者不同神經功能缺損程度血清中HGF水平(±s)

表2 ACI患者不同神經功能缺損程度血清中HGF水平(±s)

注：與相鄰的上一組比較，*P＜0.05。

1 d 30 d輕度組組別例數 HGF水平(ug/L)11 0.36±0.15 0.19±0.10中度組 11 0.89±0.18* 0.20±0.10重度組 8 1.44±0.61*0.21±0.11

3 討論

急性腦梗死時由于局部腦血流減少或供血中斷，腦組織缺血缺氧，出現神經元死亡，被認為是腦梗死病理改變的主要病變過程。Tsuzuki等［5］研究發現，大多數HGF陽性細胞為能分泌多種營養因子的反應性星形膠質細胞，因此HGF作為神經營養因子可能在腦缺血后的修復和重塑中起重要作用。我們的研究結果顯示腦梗死組急性期HGF水平較正常組顯著升高，在病情進入恢復期后逐漸恢復正常水平，也提示HGF可能作為腦梗死血管內皮損傷后的一種保護機制代償性升高，參與腦梗死的發病與修復過程。尤志珺等［6］將人肝細胞生長因子基因直接轉染至大腦中動脈閉塞模型大鼠腦缺血半暗帶區探討人HGF對腦梗死后學習記憶功能恢復的機制，結果顯示轉染質粒組的半暗帶區HGF蛋白表達水平和血管計數顯著高于轉染空質粒組和假手術組，而轉染質粒組的梗死面積顯著小于轉染空質粒組，同時轉染質粒組的梗死后學習和記憶功能明顯提高，說明人HGF基因蛋白能夠在缺血半暗帶區表達，通過增加梗死區的血管數量，明顯縮小腦梗死體積，對腦梗死有良好的治療作用，同時對腦梗死后學習和記憶功能的恢復也有較好作用。這一方法為基因治療缺血性腦血管病及血管性癡呆探索新的途徑。

［1］Honda S，Kagoshima M，Wanaka A，et al.Localization and functional coupling of HGF and c-Met/HGF receptor in rat brain：implication as neurotrophic factor.Mol Brain Res，1995，32(2)：197.

［2］Nagayama T，Nagayama M，Kohara S，et al.Post-ischemic delayed expression of hepatocyte growth factor and c-Met inmouse brain following focal cerebral ischemia.Brain Res，2004，999：155.

［3］Nagayama T，Nagayama M，Kohara S，et al.post-ischemic delayed expression of hepatocyte growth factor and c-Met in mouse brain following focal cerebral ischemia.Brain Res，2004，5(2)：155.

［4］中華神經科學會.各類腦血管疾病診斷要點.中華神經科雜志，1996，29(6)：379.

［5］Tsuzuki N，Miyazawa T，Matsumoto K，et al.Hepatocyte growth factor reduces the infarct volume after transient focal cerebral ischemia in rats.Neurol Res，2001，23(4)：417.

［6］尤志珺，劉勇.人肝細胞生長因子基因轉染治療腦梗死的實驗研究.中風與神經疾病雜志，2010，27(12)：1064.