白芍乙醇提取物對四氯化碳誘導的急性肝損傷的保護作用

金香男

白芍乙醇提取物對四氯化碳誘導的急性肝損傷的保護作用

金香男

目的觀察白芍乙醇提取物對四氯化碳誘導大鼠急性肝壞死的影響。方法將SD大鼠分為4組。分別用生理鹽水、EERP灌胃7 d，最后1 d腹腔注射CCl4，檢測血清中丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基酸轉移酶、堿性磷酸酶;黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分別檢測肝勻漿中超氧化物岐化酶、過氧化氫酶和丙二醛。結果與對照組比較，CCl4組血清中ALT、AST、ALP的含量顯著增加(P＜0.05)。與CCl4組比較，EERP+CCl4組血清中ALT、AST、ALP的含量顯著下降(P＜0.05);胞漿中SOD和CAT活性提高、MDA水平降低(P＜0.05)。結論白芍乙醇提取物能顯著減輕CCl4所致的大鼠鼠急性肝損傷具有一定的保護作用。

白芍;大鼠;四氯化碳;肝損傷

白芍為補血斂陰平肝柔肝止痛之品［1］。文獻報道其具有抗氧化、抗炎、抗過敏、等多種藥理學作用［2］。故本實驗通過觀察白芍乙醇提取物作用于CCl4肝損傷的急性動物模型，探討白芍乙醇提取物對CCl4急性肝損傷的影響及其機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SD大鼠。

1.2 試劑 CAT、SOD、MDA測定試劑盒、乙醚、四氯化碳，多聚甲醛等。

2 結果

2.1 白芍乙醇提取物對血清中ALT、AST、ALP含量的影響結果見表1。與對照組比較，CCl4組血清中ALT、AST、ALP的含量顯著增加，P＜0.05。與CCl4組比較，EERP+CCl4組ALT、AST、ALP下降，P＜0.05。

2.2 白芍乙醇提取物對肝勻漿SOD、CAT與MDA的影響結果見表2。與對照組比較，CCl4組胞漿和線粒體中的SOD、CAT活性降低(P＜0.05)，MDA的含量升高(分別P＜0.05)。與CCl4組比較，白芍乙醇提取物 +CCl4組胞漿中SOD、CAT的活性顯著增加(P＜0.05)，MDA的含量顯著降低(P＜0.05)，線粒體中的CCl4活性增加，MDA含量降低無顯著差異;白芍乙醇提取物 +CCl4組胞漿和線粒體中SOD、CAT活性均顯著增加(P＜0.05)，降低MDA含量無顯著差異。

表2 白芍乙醇提取物對CCl4誘導大鼠肝組織中SOD、CAT及MDA含量的影響(±s，n=10)

表2 白芍乙醇提取物對CCl4誘導大鼠肝組織中SOD、CAT及MDA含量的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較*P＜0.05

組別 SOD(U/ml) CAT(U/ml) MDA(nmol/ml) 81.3±9.3 102.3±17.3 4.5±0.1模型組 53.8±5.7 67.5±10.3 12.7±0.6 EERP 150 mg/kg 60.4±6.8 75.5±11.6 8.3±0.2 EERP 300 mg/kg 72.8±7.4* 92.8±15.3* 6.3±0.4正常組*

3 討論

四氯化碳小鼠急性肝損傷模型是目前肝病研究的重要模型之一。四氯化碳注射后可以使部分肝被膜的破壞，并可導致血纖維蛋白析出、以中性粒細胞和嗜酸性白細胞為主的炎癥細胞大面積浸潤，并導致小葉間結合組織周圍的肝細胞發生空泡變性和大量壞死。本研究HE染色病理切片證實了白芍乙醇提取物較四氯化碳組顯著改善肝細胞變性、壞死的范圍，表明白芍乙醇提取物對四氯化碳誘導的急性肝損傷有保護作用。本研究發現白芍乙醇提取物明顯增加SOD、CAT等的活性，而較顯著的抑制MDA等氧自由基的產生。因此，我們認為白芍乙醇提取物的干保護作用可能與增加了肝臟抗氧化的儲備有關。

［1］王飛，伍文彬，徐世軍，等.赤、白芍對血瘀證動物模型內皮功能及血液流變學的影響.中藥藥理與臨床，2009，25(4):40-41.

［2］朱家恩，白延斌，藺美玲，等.白芍對去卵巢大鼠體重、血脂及抗氧化能力的影響.中國老年學雜志，2009，25(2):135-137.

133400龍井中醫醫院內科病房

1.3 microfuge22R臺式冷凍離心機，酶聯免疫檢測儀，真彩色病理顯微圖像分析系統令自動生化分析儀。

1.4 白芍乙醇提取物的制備 取干燥的白芍500 g加3000 ml 70%乙醇，上清液在45℃減壓濃縮，經冷凍干燥得粉末，臨用前以蒸餾水或整理鹽水配置。

1.5 動物分組及給藥 動物分組及給藥:SD大鼠40只，隨機分成4組，每組10只。對照組、CCl4組、150 mg/kg白芍乙醇提取物+CCl4組、300 mg/kg白芍乙醇提取物+CCl4組，灌胃7 d，1次/d，0.5 ml/次，最后1 d，對照組腹腔注射生理鹽水，與各組腹腔注射CCl41 ml/kg。16 h后乙醚麻醉打開胸腔取血，取肝臟。

1.6 血清ALT、AST、ALP測定 大鼠打開胸腔后，從左心室直接抽血5 ml，37℃ 溫浴10 min，3000 r/min離心，10 min，取上血清1000 μl，參照試劑盒的說明書測定ALT、AST、ALP。

1.7 肝勻漿SOD、CAT與MDA檢測 4℃生理鹽水沖洗肝表面，稱取0.5 g肝組織，加入9 ml生理鹽水，剪碎，研磨，制備5%的肝勻漿，2000 r/min離心10 min，取上清1 ml，4℃10000 r/min離心15 min，上清為胞漿待測。沉淀加入1 ml生理鹽水，利用細胞超聲破碎儀，制備成10%的線粒體勻漿待測。

表1 白芍對CCl4所致肝損傷小鼠血清中ALT、AST及ALP活性的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較*P＜0.05

組別 ALT(U/L) AST(U/L) ALP(U/L) 45.7±3.8 51.5±5.3 102.5±6.3模型組 163.1±12.3 206.4±14.7 208.4±16.3 EERP 150 mg/kg 140.3±6.3 162.4±11.6 178.2±14.5 EERP 300 mg/kg 81.3±6.9*109.38±7.4*139.7±10.3正常組*