單硝酸異山梨酯緩釋膠囊（Ⅳ）中異山梨醇的薄層色譜雜質檢查

黃 雷 李 壯 閔 奇 張春宏

（1 錦州市食品藥品檢驗所，遼寧 錦州 121000；2 大連市食品藥品檢驗所，遼寧 大連 116021）

在檢驗過程中，發現的問題是：照原標準做（國家食品藥品監督管理局國家藥品標準73冊），對照品溶液不顯斑點。于是從：①對照品溶液配制；②顯色條件，這兩方面進行一些考察。

1 儀器與材料

硅膠GF254薄層板（青島海洋化工廠分廠，批號：20100525），紫外分析儀（WD-9403B），BP-211D型電子天平，異山梨醇對照品（批號：1352008）

2 試驗方法及結果

2.1 供試品溶液的制備

精密稱取本品內容物的細粉適量（約相當于單硝酸異山梨酯125mg），置25mL量瓶中，加無水乙醇適量，超聲處理10min，加無水乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取異山梨醇對照品10mg，置200mL量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 薄層檢查

照薄層色譜法（中國藥典2005年版二部附錄V B）[1]試驗，吸取上述兩種溶液各20μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯-無水乙醇（2∶1）為展開劑，展開后，晾干，噴以新鮮制備的堿性高錳酸鉀溶液（取高錳酸鉀0.25g，氫氧化鈉2g，加水100mL溶解，即得），置105℃加熱約5min，立即檢視。供試品溶液如顯與異山梨醇相應的雜質斑點，其顏色與對照品溶液的主斑點比較，不得更深（1.0%）。

試驗結果證明兩點：①點樣量（或者配制的濃度）至少是原標準的4倍，對照品溶液才可以得到確定清晰的斑點。②顯色條件，綜合進行254nm與顯色劑兩方面的考察，發現最佳顯色條件是噴顯色劑后，在105℃溫度下稍微加熱。而不是如標準規定，即噴顯色劑后，在105℃溫度下加熱5min。如果按照標準操作，不論多大濃度的標準品斑點都看不清楚。見圖1～圖4。

圖1 完全按標準操作，一倍量濃度，噴顯色劑，于105℃加熱5min，未顯對照品斑點

圖2 圖中顯示的是加大對照品溶液濃度，展開未噴顯色劑的情況。于254nm紫外燈下檢視。從圖中可以看出，異山梨醇對照液其濃度為標準規定濃度的二倍與四倍量時未出現斑點，八倍量斑點模糊，十六倍量斑點清晰。所有的供試品溶液斑點清晰

圖3 圖中顯示的是展開后，噴顯色劑，在白光下立即檢視的情況。從圖中可以看出，異山梨醇對照液濃度為標準規定的濃度的二倍點未出現，四倍、八倍、十六倍點清晰，在Rf=0.2處。所有的供試品溶液斑點清晰

圖4 圖中顯示的是噴顯色劑，于105℃稍稍加熱，在白光下立即檢視的情況。此時的各個斑點最為清晰。顯示出的對照液系列斑點已經用鉛筆做標注

在試驗中，點樣量的倍增是通過極大的增加溶液的濃度，極大的減小點樣體積來實現的。這樣做有兩點目的：①通過減少點樣的時間來防止氧化；②減少點樣體積來減少點的擴散。

3 討 論

由于按原標準方法檢驗，未能達到檢驗目的，經過反復實驗摸索其結果證明兩點：①點樣量（或者配制的濃度）至少是原標準的4倍，對照品溶液得到確定清晰的斑點，才可以作為供試品的對照和參考。②顯色條件，最佳顯色條件是噴顯色劑后，在105℃溫度下稍微加熱，呈清晰的斑點。此方法重現性好，簡單便捷[1]。

[1] 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典二部(2005年版)[S].北京:化學工業出版社,2005.