CCR2-64I在中國29個民族群體中的分布情況分析

馮 磊，年士艷，張興鋒(綜述)，徐文波(審校)

(玉溪市人民醫院檢驗科，云南玉溪653100)

艾滋病的全球流行已得到世界的高度關注，1996年首次發現CXCR-4是人類免疫缺陷病毒1(human immunodeficiency virus-1，HIV-1)合胞體誘導型株感染和進入靶細胞的協同受體，CCR-5是HIV-1非合胞體誘導型株感染和進入靶細胞的協同受體。隨后發現某些毒株還能利用CCR2b和CCR3作為輔助受體。現已基本闡明，CCR5和CXCR4是HIV-1感染的主要協同受體，CCR2和CCR3是次要協同受體。雖然，CCR2作為HIV-1感染協同受體功能可能沒有CCR5和CXCR4重要，但CCR2等位基因的突變和多態性顯著影響著艾滋病的進程，在此意義上，盡快查清各民族人群中CCR2等位基因多態性的特點將有助于艾滋病的診斷和防治。

1 概述

HIV-1感染和艾滋病的發病過程除了由病毒本身的侵襲力決定外，人體(宿主)因素同樣是不可忽視的重要方面。在HIV-1感染靶細胞的過程中，病毒不僅與CD4細胞結合，還必須和協同受體結合，才能進入靶細胞。這意味著協同受體等位基因發生缺失突變，將使機體在基因水平上對HIV-1感染及其病程的發展產生天然的阻抗［1-3］。HIV-1相關的協同受體有趨化因子受體CCR5、CXCR4、CCR2、CCR3等。近年來研究表明，CCR2-64I、CCR5-Δ32 和SDF1-3'A等位基因是抗HIV-1感染的3個主要遺傳因子，直接與HIV感染和艾滋病發病、病程進展相關［2-4］。其中，CCR2是HIV感染靶細胞的次要受體，CCR2-64I突變可產生一定的保護作用，可延緩HIV感染發展為艾滋病的時間，延長患者的生存時間。CCR2-64I是指 CCR2基因ORF起始位點ATG后的第190位點上發生的保守性突變，變異產生G到A堿基轉換，使翻譯的多態第64位(位于第1個穿膜功能區)纈氨酸被異亮氨酸所替代［1］。目前認為CCR2-64I突變對HIV-1感染產生抗性機制是間接的，推測其機制為:①CCR2-64I可能通過減少血漿中病毒血癥和 CD4細胞損失率發揮作用;②CCR2的濃度和生理學變化可能間接地影響HIV-1與靶細胞上CCR5協同受體的結合;③CCR2協同了系列突變［5］。研究表明，CCR2-64I等位基因突變明顯有利于個體存活，表現為延緩2～3年發展成為艾滋病或死亡。進一步分析還發現，HIV感染者中CCR2-64I雜合子或純合子個體血清病毒負荷量較野生型個體偏低，兩者之間差異顯著［6-8］。但國內外學者研究發現，CCR2-64I等位基因頻率在世界上不同區域和人種中變化較大［6-9］。研究不同人群中HIV感染相關基因突變頻率和多態性規律，有助于判斷人群對HIV-1的遺傳易感性和艾滋病的流行病學特點。

2 CCR2-64I在中國不同民族中的分布情況

通過檢索近年來國內外關于不同地域不同民族種族CCR2-64I等位基因頻率的相關研究，對所檢索到的結果進行匯總，其中國內對29個民族群體22個民族作了相關研究報道，國外對5大種族作了相關報道，有關結果匯總見表1［10-16］。因我國少數民族多集中在西南、西北等邊遠省份，這些省份少數民族分布較為集中，民族代表性較強，而中東部地區少數民族多為個體散在分布，除漢族外其他民族多不具有代表性，故對少數民族的研究多集中在各邊疆省份。從匯總表中可見，中國南方和北方人群總體看來沒有明顯差異，趨勢性變化不明顯，但不同民族間差異較大，其中突變頻率最高的民族為云南的傈僳族，最低的為海南的黎族，兩者突變頻率相差接近15倍，且這兩個民族均為當地特有的土著民族，代表性較強。相同民族不同采樣點在相關研究中涉及6個民族，除佤族(突變頻率分別為 0.15000、0.16327)和傈僳族(突變頻率分別為0.30357、0.25000)不同采樣點間結果無顯著性差異外，怒族(突變頻率分別為0.18000、0.08654)、傣族(突變頻率分別為 0.13571、0.21300)、壯族(突變頻率分別為0.01579、0.257)和漢族(突變頻率分別為 0.13750、0.1913、0.261)不同采樣點間或不同研究結果間存在較大差異，具體誰的結果更符合實際還值得進一步商榷。其中漢族人群表現出明顯的從南到北(0.261 ＞0.1913 ＞0.13750)逐漸降低的變化趨勢。與世界上其他種族的結果比較發現，中國多數民族CCR2-64I突變頻率明顯高于美國白人和高加索人，而分布于北方的土族和塔吉克族與高加索人有著比較接近的突變頻率，他們之間可能具有較為相似的遺傳背景。與美國黑人和西班牙人的突變頻率比較，除少數幾個民族外，多數與他們比較接近，但絕大部分民族明顯低于亞洲黃種人水平。

表1 CCR2-64Ⅰ等位基因在29個民族群體中的頻率分布

3 情況分析

疫苗免疫接種是控制傳染病最經濟有效的措施，世界各國對艾滋病疫苗的研究也日益重視，希望通過研制安全、有效、經濟的艾滋病疫苗預防艾滋病病毒的傳播。自1987年第一個艾滋病疫苗進入臨床試驗以來，大量的精力和時間都投入到了包括亞單位疫苗、核酸疫苗、重組病毒載體疫苗等的研究之中。但迄今為止，未能研制出有效的疫苗。影響疫苗成功的原因很多，其中包括病毒變異度高，不同人群的遺傳背景不同等。近年來，大量關于社會因素、行為因素和不同群體流行病學特征的異質性與HIV-1疫苗設計的研究正在進行中［17，18］。然而，群體內或群體間的基因異質性所導致的易感異質性以及免疫應答差異都未被考慮在其中。而且，在大多數病理模型的建立以及HIV疫苗的三期臨床有效性實驗中，不同群體的遺傳易感性都沒被考慮在設計之內［19-24］。主要是因為目前關于HIV易感性差異或者抵抗感染的基因多態性分布在全世界范圍內還不清晰。特別是在中國，對于艾滋病易感性的遺傳背景研究工作相對于國外的研究來說還較為薄弱。另外，中國是一個民族群體眾多的國家，不同民族群體之間存在遺傳差異，這就使得中國人群遺傳易感性差異工作相對于國外民族群體較少的國家而言更加繁雜［25］。通過對已有關于中國人群CCR2-64I突變頻率的研究結果匯總分析，發現存在如下問題:①結果的可靠性。關于中國人群CCR2-64I突變頻率的各研究中，在測定方法上均為經聚合酶鏈反應擴增后，利用聚合酶鏈反應/限制性片段長度多態性技術檢測是否發生突變，但基因組DNA提取試劑盒、引物、內切酶等來源較為多樣，特別是研究對象的采樣數及采樣地點均無明確標準。另外，有的研究組樣本量偏小，僅30～40份樣本，結果的代表性較差。導致不同研究者對同一省份同一民族所得出的結果差異性較大，甚至同一研究中也存在較大差異，缺乏可比性，降低了結果的參考價值。②突變頻率的地域趨勢性變化。從表1中可見除漢族人群表現出明顯的從南到北逐漸降低的變化趨勢外，其他民族并未表現出與地域分布有明顯的關聯，也即其他少數民族的突變頻率呈散在分布，不存在明顯的從南到北、從北到南等方向上的趨勢性變化，但突變頻率多集中在10%～20%。

從以上結果可見，我國各民族CCR2-64I基因多態性有著各自的特點，但多高于美國白人和高加索人，總體趨勢上中國人群可能以CCR2-64I為主。由于目前許多研究者已開始利用CCR5和CCR2作為靶點進行藥物研究，試圖找到預防和治療艾滋病的突破口，并已有重大突破。因此對中國人群HIV-1感染輔助受體基因多態性研究很必要，這不僅可以了解我國人群宿主遺傳因素與其他人種的差異，獲得我國不同人群有關遺傳因素的背景資料，為感染者的用藥選擇提供合理的參考依據。但目前的一些研究結果缺乏可比性，研究結果的準確性及代表性較差，導致研究資源的浪費。建議相關部門制定相應的規范，通過整合資源，加大合作力度，早日得到全面、準確的數據，為HIV的預防、診斷與治療提供準確可靠的數據。

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