普羅布考對糖尿病心肌病患者血清8－羥基脫氧鳥苷酸水平及心功能的影響＊

趙林雙 向光大 廖玉華 樂 嶺 劉 曄 孫慧玲 朱廣平 詹輝濤

趙林雙，向光大，廖玉華，等

廣州軍區武漢總醫院內分泌科，武漢430070

糖尿病心肌?。―iabetic Car diomyopat hy，DC）是糖尿病（DM）引起的心臟微血管病變和心肌代謝紊亂所致的心肌廣泛灶性壞死，是排除了高血壓、冠心病及其它已知疾病所致的心肌損傷后診斷的一類獨立的特異性心肌病。其發病機制十分復雜。近年來研究發現，氧化應激與DM及其并發癥密切相關，而血清8－羥基脫氧鳥苷酸（8－Hydroxy－Guanin，8－OHd G）水平可作為反映自由基水平或氧化應激反應的標志物［1，2］。本研究探討抗氧化應激藥物普羅布考對DC患者血清8－OHd G水平及心功能的影響，為早期預防DM合并血管并發癥，尤其是減少心血管病相關死亡率提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

病例系廣州軍區武漢總醫院內分泌科和華中科技大學心血管病研究所2007年1月至2010年1月收治的97例DC患者，DC診斷參照實用內分泌學提出的診斷標準［3］。以上病例排除：（1）1個月內服用β1受體阻滯劑、血管緊張素II受體阻滯劑及激素者；（2）系統性紅斑狼瘡患者；（3）合并病毒性心肌炎患者；（4）合并風濕性、梅毒性心臟病患者；（5）合并甲狀腺毒性心肌病患者；（6）合并甲狀腺機能減低性心肌病患者；（7）合并其它自身免疫疾病者（皮肌炎、硬皮病類、風濕性關節炎）。正常組（n＝40）來自本院體檢中心體檢健康人群。所有受試者記錄空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血紅蛋白（Hb A1c）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿白蛋白排泄率、視網膜病變、心電圖改變及8－OHd G等資料及臨床基線情況如年齡、性別、病程、血壓、心率、體重指數（BMI）、吸煙史等。

1.2 DC患者分組及給藥方法

97例DC患者隨機分為治療組（61例）和對照組（36例），兩組均在常規飲食控制及胰島素降糖治療基礎上服用阿司匹林（100 mg／天，拜耳制藥有限公司）、消心痛（10 mg，3次／天）、纈沙坦（80 mg／天），將血糖控制在理想水平。治療組加服普羅布考片0.5g，2次／天（probucol，齊魯制藥有限公司，商品名：之樂，批準文號：國藥準字H10980054），療程6個月。治療前和治療后6個月分別檢測兩組血脂、血糖、8－OHd G、C－反應蛋白（CRP）水平以及左室形態、左室收縮功能和舒張功能指標、左室射血分數（LVEF）、心電圖ST－T改變情況。

1.3 樣本采集

兩組患者于入院次日清晨抽取空腹靜脈血，一部分分離血清，檢測血脂總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）血清肌酐、尿素氮等，將剩余血清保存于－40℃，以便同一批次檢測8－OHd G。另一部分EDTA抗凝全血用于糖化血紅蛋白（Hb A1c）的檢測。同時收集采血當天至次日清晨24h尿液（苯甲酸防腐）測定24h尿白蛋白排泄率（UAER）。正常組檢測相同指標。

1.4 檢查項目

1.4.1 體格檢查：包括心率、血壓、心電圖、BMI等。

1.4.2 血液和尿液檢查項目：包括8－OHd G、TC、TG、LDL－C、HDL－C、Cr、BUN、血糖、Hb A1c、CRP、UAER等。

1.4.3 視網膜檢查：由廣州軍區武漢總醫院眼科醫師行眼底鏡及眼底熒光造影。

1.5 主要試劑和儀器及相關指標檢測方法

人血清8－OHd G測定試劑盒購自美國Trevigen公司，采用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定；UAER檢測試劑盒由上海波佳生物技術有限公司提供ELISA測定；Hb A1c采用陽離子交換微柱層析法測定；CRP采用ELISA測定；血糖用葡萄糖氧化酶法測定；其它項目檢測采用Oly mpusⅡ型全自動生化分析儀及配套試劑。超聲心動圖儀（美國HP SONOS 2500型，探頭頻率2.5 MHz）測定左心室舒張末期前后內徑（LVDd，＞5.1～5.5cm為輕度擴大；5.6～7.0cm為中度擴大，＞7.1cm為重度擴大）、左室室間隔厚度（IVSd，＞1.1 cm 為增厚）、LVEF（正常參考范圍為50%～70%）；12導聯心電圖。

1.6 統計學處理

數據分析采用SPSS 10.0軟件進行統計，資料采用均數±標準差（±s）或構成比表示，均數間的比較用兩樣本t檢驗，率的比較采用卡方檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 DC組和正常組一般資料比較

DC患者心率、血壓、空腹血糖、餐后2h血糖、Hb A1c、Cr、UAER、吸煙、合并糖尿病視網膜病變、心電圖ST－T改變及8－OHd G含量與正常組比較，差異具有統計學意義（P＜0.05或P＜0.01），見表1。

表1 DC組、正常組一般資料比較

2.2 兩治療組治療前后血脂、血糖、Hb A1c水平比較

治療組經過6個月治療后，TC和LDL－C水平均較治療前下降，HDL－C水平較治療前升高，明顯優于對照組（P＜0.05或P＜0.01），而對照組較治療前改善不明顯，差異無統計學意義（P＞0.05）。兩組血糖和Hb A1c均較治療前明顯改善（P＜0.05），見表2。

表2 兩治療組治療前后血脂、血糖、Hb A1c水平比較（±s）

表2 兩治療組治療前后血脂、血糖、Hb A1c水平比較（±s）

注：與對照組比較，1）P＜0.05；與同組治療前比較，2）P＜0.05，3）P＜0.01

指標 對照組（n＝36）治療前 治療后治療組（n＝61）治療前 治療后TC（mmol／L） 4.99±0.20 4.95±0.23 5.01±0.17 3.94±0.31 1）2）HDL－C（mmol／L） 1.03±0.21 1.19±0.17 1.01±0.23 1.71±0.13 1）3）LDL－C（mmol／L） 4.01±0.03 3.89±0.05 4.91±0.07 2.41±0.061）3）空腹血糖（mmol／L） 9.97±0.60 5.71±0.65 2） 10.90±0.70 6.54±0.50 2）餐后2h血糖（mmol／L） 16.70±0.60 9.10±0.90 2） 17.20±0.60 7.60±1.00 2）Hb A1c（%） 9.61±0.80 7.01±0.40 2） 9.70±0.70 6.10±0.60 1）2）

2.3 兩治療組治療前后心電圖ST－T改變、8－OHd G、CRP水平比較

治療組治療后8－OHd G、心電圖改善及CRP水平較治療前顯著好轉，亦明顯優于對照組（P＜0.05或P＜0.01），而對照組較治療前改善不明顯，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

2.4 兩治療組治療前后左室舒張功能比較

兩治療組治療后均較治療前有明顯改善，治療組優于對照組（P＜0.05），見表4。

2.5 兩治療組治療前后左室形態指標、心臟收縮功能比較

治療前兩組左室形態指標、心臟收縮功能無統計學差異，治療后LVDd和LVEF均較治療前有所改善，但治療組優于對照組（P＜0.05），見表5。

表3 兩治療組治療前后臨床心電圖ST－T改變、8－OHd G、CRP比較（±s）

表3 兩治療組治療前后臨床心電圖ST－T改變、8－OHd G、CRP比較（±s）

注：與對照組比較，1）P＜0.05；與同組治療前比較，2）P＜0.01

組別 n ST－T改變（例）治療前 治療后8－OHd G （ng／ml）治療前 治療后CRP（mg／L）治療前 治療后對照組 36 36 25 2） 321.13±57.11 297.33±41.11 12.04±1.00 9.30±0.90治療組 61 61 21 1） 339.14±33.43 93.63±7.02 1）2） 11.74±2.00 5.10±0.30 1）

表4 兩治療組治療前后左室舒張功能的比較（±s）

表4 兩治療組治療前后左室舒張功能的比較（±s）

注：與對照組比較，1）P＜0.05；與同組治療前比較，2）P＜0.01

組別 n E峰（cm／s）治療前 治療后A峰（cm／s）治療前 治療后E峰／A峰比值治療前 治療后對照組 36 43.73±11.91 74.90±12.31 2） 79.24±10.84 53.14±0.25 0.73±0.11 1.09±0.05 2）治療組 61 44.14±12.32 77.61±13.13 2） 75.31±11.33 41.61±5.60 1）2） 0.71±0.12 1.71±0.06 1）2）

表5 兩治療組治療前后左室形態指標、心臟收縮功能比較（±s）

表5 兩治療組治療前后左室形態指標、心臟收縮功能比較（±s）

注：與對照組比較，1）P＜0.05；與同組治療前比較，2）P＜0.01

組別 n LVDd（cm）治療前 治療后IVSd（cm）治療前 治療后LVEF（%）治療前 治療后對照組 36 6.30±0.21 5.50±0.302） 1.20±0.04 1.30±0.05 39.03±2.00 43.01±4.042）治療組 61 6.11±0.33 5.40±0.21 2） 1.10±0.03 1.10±0.02 39.01±3.03 45.04±5.02 1）2）

2.6 不良反應的臨床觀察

6個月治療期間，治療組有6例出現胃腸道不適、惡心，5例短期給予對癥治療后癥狀消失，1例因服藥期間喝酒出現反復嘔吐、頭暈一周，經對癥治療改善，未發現過敏現象，治療過程每月復查心電圖，未發現Q－T間期延長患者。對照組未見不良反應。

3 討 論

氧化應激是引起胰島素抵抗（IR）、DM和心血管疾病的 “共同土壤”［4，5］，氧化應激作為源頭損傷B細胞，引起或加重DM，傷害肌肉及脂肪細胞，加重IR，損傷內皮細胞引起內皮細胞功能障礙，損傷心肌細胞引發DC，因此，氧化應激是DM及其血管并發癥的主要發病機制。根據氧化應激對DC應激損傷機制，探討DM及其并發癥的發生、以及與DNA損傷的相關性，應用抗氧化治療逆轉氧化應激對組織的損傷，對阻止或延緩DM及其并發癥的發生、發展有重要臨床意義。

本研究結果發現，（1）DC組8－OHd G水平明顯高于正常組（P＜0.01），因此認為，DC發病可能與8－OHd G水平有關。8－OHd G是羥自由基在DNA堿基的C－4、C－5或C－8位置上與脫氧鳥嘌呤核苷酸殘基結合并進一步氧化生成的，動物實驗表明該標志物可以作為反映自由基水平或者氧化應激反應的標志物［6，7］，且其檢測具有可行性。（2）普羅布考抗氧化應激對DC患者8－OHd G水平有影響。兩治療組治療前數據，如8－OHd G、TC、HDL－C、LDL－C、UAER、血糖、Hb A1c等均無統計學差異，治療組加用普羅布考6個月后復查上述指標，發現治療組8－OHd G明顯下降，治療前后比較，差異具有顯著統計學意義，而對照組無統計學意義。（3）兩治療組治療前左室形態、心臟收縮和舒張功能指標、ST－T改變、心率、CRP差異無統計學意義，兩組治療后上述指標得到明顯改善，治療組改善效果明顯優于對照組（P＜0.01）。（4）治療后，治療組TC和LDL－C明顯降低，HDL－C明顯升高，而對照組則無此作用。

普羅布考強大的抗氧化作用可能與普羅布考構效關系有關。普羅布考含14個親脂性甲基，是合成的抗氧化劑，具有更強的親脂性，與LDL－C結合能力遠大于其它脂溶性天然抗氧化劑［8，9］。結構決定其作用，普羅布考具有斷鏈抗氧化劑及氧離子捕捉劑之稱，顯著降低LDL－C，顯著抑制 HDL－C氧化?？寡趸瘧ぶ委熌苣孓D氧化應激對心肌組織細胞的的損傷，從而有效保護心功能，最大限度地改善心肌收縮和舒張功能。

綜上所述，氧化應激是DC的重要損傷機制，應用普羅布考抗氧化治療能逆轉氧化應激對組織的損傷，并聯合應用血管緊張素受體拮抗劑，可共同阻止或延緩 DM 及其并發癥的發生、發展［10，11］，是減少DC的根本措施。

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