贛州地區303例慢性肝病患者HBV基因型別檢測及意義

胡 蓉，劉文群 ，陳曉紅，許慶林，何顯龍，徐惠榮

(1南昌大學生命科學學院，南昌 330000;2贛南醫學院第一附屬醫院;3贛州市第二人民醫院)

據報道，HBV不同基因型的結構差異可影響慢性肝病患者的病情發展、轉歸、HBV標志物表達及抗病毒治療效果［1，2］，而 HBV 基因型又具有一定的地域分布特征［3］。2006年10月～2009年3月，我們對贛州地區303例慢性肝病患者進行了HBV基因型別檢測，并同時檢測其乙肝血清標志物、肝功能等指標，旨在了解本地區慢性肝病患者HBV主要基因型及臨床特點，為慢性肝病的防治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 303例慢性肝病患者，男205例，女98例;年齡 11～74(38.2±11.6)歲。均符合2000年《病毒性肝炎防治方案》［4］中診斷標準，其中乙肝攜帶者59例，慢性乙肝157例，肝硬化62例，肝癌(病理證實)25例。所有病例HBV-DNA均為陽性，排除其他肝炎病毒感染、藥物性肝損害、酒精性肝病、自身免疫性肝病等肝臟疾病。

1.2 HBV基因分型檢測 留取晨空腹靜脈血 5 ml，3 000 r/min 離心 10 min，吸取 1 ～2 ml血清于－70℃冰箱保存。采用PCR-反向點雜交法檢測HBV基因分型，儀器為ABI 9700，試劑盒由中山達安生物技術有限公司提供，嚴格按標準操作規程及試劑說明書操作。

1.3 HBeAg、HBV-DNA及肝功指標檢測 采集外周血3 ml，3 000 r/min離心10 min分離血清。檢測以下指標:①HBeAg。采用 ELISA法，儀器為安圖2010酶標儀，夏門新創公司試劑。②HBV-DNA。采用PCR-熒光探針法，儀器為ABI 9700，達安基因試劑。以HBV-DNA載量≥Ig5為高載量，＜Ig5為低載量。③肝功指標。采用HITACHI 7600型全自動生化分析儀檢測ALT、AST、總膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TBIL)、白蛋白(ALB)水平，嚴格按說明書操作。

1.4 統計學方法 采用SPSS14.0統計軟件，兩樣本均數間比較行單因素方差分析，率的比較采用χ2檢驗，兩獨立樣本比較采用t檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

303例慢性肝病患者HBV基因分型為B型249例(82.2%)，C 型39 例(12.9%)，B/C 混合型 10 例(3.3%)，D 型 3 例(1.0%)，未分型 2 例(0.6%)，B基因型所占的比例顯著高于C基因型(P＜0.000 1)。HBeAg陽性141例，其中B基因型114例，C基因型21例。B、C基因型 HBeAg陽性率分別為45.8%(114/249)、53.8%(21/39)，P ＞0.05。B、C 基因型HBV-DNA高載量率分別為 41.4%(103/249)、87.2%(34/39)，P ＜0.01。B 型、C 型肝功指標水平比較見表1。

表1 B型、C型肝功指標水平比較(±s)

表1 B型、C型肝功指標水平比較(±s)

注:與 B 型比較，*P ＜0.05

型別 n ALT(U/L) AST(U/L) TBA(μmol/L) TBIL(μmol/L) ALB(g/L)B 型 249 248.66 ±125.33 227.52 ±118.18 108.34 ± 66.21 46.12 ±26.35 36.26 ±9.14 C 型 39 380.84 ±148.60* 436.28 ±154.34* 212.23 ±112.76* 90.23 ±54.69*30.24 ±8.46

3 討論

據報道，我國乙型肝炎患病率呈逐年上升趨勢，且目前尚無有效治療手段。關于HBV基因型臨床差異研究的報道不一。較早的研究認為HBV基因型可能與HBeAg血清轉換、肝臟病變程度及抗病毒治療應答有關。目前，HBV已分為A～H 8個基因型，且HBV基因型呈地域性分布。我國發現有B、C、D基因型，偶有 A型［5］。其中以 B型和 C型為主，北方主要是 C型;南方多為B型，C型次之［6］。本組資料顯示，303例慢性肝病患者中HBV的B、C、D及B/C混合基因型均存在，且以B型和C型為主，符合贛州地區處于南方的地理特點。但B與C基因型的分布頻率與徐龍等［7］研究江西地區B基因型(73.1%)及 C基因型(10.4%)的分布頻率有較大差異，可能原因為徐龍等學者研究的病例主要來自南昌地區，且南昌地區流動人口較贛州地區大，而贛南處于閩、粵、贛交界處，為客家人群聚居地，主要人群為明中葉后至清前期由閩粵贛三省交界地遷出的移民，兩地人群類別存在差異。

研究發現，B基因型易在疾病早期出現前C區/C啟動子變異，常出現 HBeAg血清轉換，表現為HBeAg陰性［8］，C基因型則因病毒復制活躍易形成持續的病毒血癥，不易發生抗原e系統的血清轉換。本研究發現，B、C基因型HBeAg陽性率無明顯差異，且C基因型HBV-DNA高載量率明顯高于B型，提示C基因型HBV復制更為活躍，有更強的致病力。可能原因為C基因型病毒治療過程中易產生變異株，變異后的病毒可逃避免疫壓力，但不影響病毒在宿主體內復制效率，因此形成頑固性HBV感染及更嚴重的肝臟炎癥和纖維化［9］，抗病毒治療效果差［10］。另外我們發現，除ALB外，C基因型余四種肝功指標均明顯高于B基因型。表明C基因型HBV感染病例肝功能損害更嚴重。

綜上所述，贛州地區HBV感染以B、C基因型為主，尤以B基因型居高;C基因型更易發展為嚴重肝病，抗病毒治療效果差。此為慢性肝病的防治提供了理論依據。

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