非小細胞肺癌癌組織中DEK蛋白表達及意義

林黎娟，金 政，王 研，張曉燕，蔡英蘭*

(1遼東學院醫學院影像系，遼寧丹東 118002;2延邊大學醫學院;3沈陽市第五人民醫院)

肺癌的發病率較高，但目前對肺癌發生、發展的相關基因認識仍有限［1］。有研究表明，DEK蛋白與人類多種腫瘤的發生、發展有密切關系［2］，但目前國內有關肺癌組織中DEK蛋白的相關報道鮮見。2006年9月～2008年12月，我們采用免疫組化SP法檢測了48份非小細胞肺癌(NSCLC)組織中DEK蛋白表達，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 行手術切除的NSCLC標本48份，患者男37例，女11例;年齡23～76歲，平均47.3歲。術后病理證實為肺腺癌36例，鱗癌12例，其中高分化12例，中等分化33例，低分化3例;腫塊≤3 cm者23例，＞3 cm者25例;伴有淋巴結或/和胸膜、支氣管軟骨侵犯29例，所有患者術前均未經化療，無遠處臟器轉移。另選擇48份癌旁良性組織作對照。

1.2 DEK蛋白表達檢測及結果判定 采用免疫組化SP法。常規石蠟病理切片4 μm，脫蠟、水化，檸檬酸鹽抗原修復液中修復，PBS漂洗，置入30 ml/L H2O210 min，正常血清37℃孵育15 min，加入一抗(抗DEK單克隆抗體，1∶50稀釋;空白對照中以PBS代替一抗)4℃冰箱孵育過夜，加入二抗(生物素標記抗IgG抗體及辣根過氧化物酶標記抗IgG抗體)37℃孵育60 min，DAB顯色，蘇木精復染細胞核，中性樹膠封片。參考Mathew等［3］的分級標準進行結果判定，DEK陽性著色于細胞核。無著色為－;著色細胞數＜50%或染色較淺為+;著色細胞數＞50%且染色較深為++;+和++均為陽性表達。

1.3 統計學方法 應用SPSS11.0統計學軟件，率的比較行χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

DEK蛋白在癌組織及癌旁組織的陽性表達率分別為 84.4%(35/48)、6.7%(3/48)，P=0.000。DEK蛋白表達與NSCLC臨床病理學特征的關系見表1。

表1 DEK蛋白表達與NSCLC臨床病理特征的關系

3 討論

DEK蛋白是一種原癌蛋白，1992年其被首次從急性髓系白血病(AML)的一種亞型中以DEK-CAN融合蛋白形式分離出來［4］。在很多人類的侵襲性腫瘤如視網膜母細胞瘤、結腸癌、膀胱癌、宮頸癌、惡性膠質瘤、黑色素瘤以及成年人急性白血病中，DEK蛋白均出現過表達［2］。目前關于DEK蛋白與肺癌發生、發展的關系報道少見。

本研究結果顯示，DEK蛋白在NSCLC組織中陽性表達率明顯高于癌旁組織，說明DEK蛋白與NSCLC的發生、發展有一定關系，但DEK蛋白的具體作用機制仍不明了。有研究表明，DEK蛋白與染色質重構及基因轉錄有關，對細胞凋亡具有重要作用［4］;此外，DEK蛋白是一種核磷酸化蛋白，DEK蛋白磷酸化是DEK蛋白的一種重要的翻譯后修飾，DEK蛋白的磷酸化水平與細胞凋亡密切相關，誘導細胞凋亡時DEK蛋白的磷酸化水平降低［5］。有學者用攜帶DEK基因的腺病毒侵染HeLa細胞，侵染Ad-DEK組細胞凋亡的比例僅為對照組細胞的50%，提示DEK蛋白可能通過抑制細胞凋亡刺激HeLa細胞生長［6］;Carro 等［7］通過 DEK 與 Ki-67 表達相關性得出，DEK過表達與腫瘤細胞增殖率密切相關，國內學者亦證實DEK蛋白與宮頸癌細胞增殖密切相關［8］。故我們推測在NSCLC發生、發展中可能存在DEK蛋白的磷酸化修飾過程，從而抑制細胞凋亡、促進細胞增殖。另外本研究發現，DEK蛋白在NSCLC中的表達與腫瘤體積、組織分化程度有密切關系。因此我們認為DEK蛋白可能對NSCLC預后判斷有一定參考價值，但本研究樣本量較少、無臨床分期，且病理類型只有腺癌和鱗癌，DEK蛋白與NSCLC進展的關系有待進一步擴大樣本研究。

［1］譚明旗，張秀娟，周卓，等.Survivin、COX-2蛋白在肺腺癌中的表達及意義［J］.中國現代醫學雜志，2007，17(23):2924-2927.

［2］華穎，胡紅剛，彭向雷，等.DEK蛋白與細胞凋亡的研究進展［J］.中國科學 C 輯:生命科學，2009，39(5):434-440.

［3］Mathew J，Hines JE，Obafunwa JO，et al.CD44is expressed in hepatocellular carcinomas showing vascular invasion［J］.J Pathol，1996，179(1):74-83.

［4］Wise-Draper TM，Allen HV，Jones EE，et al.Apoptosis inhibition by the human DEK oncoprotein involves interference with p53 functions［J］.Mol Cell Biol，2006，26(20):7506-7519.

［5］Wise-Draper TM，Mintz-Cole RA，Morris TA，et al.Overexpression of the cellular DEK protein promotes epithelial transformation in vitro and in vivo［J］.Cancer Res，2009，69(5):1792-1799.

［6］Tabbert A，Kappes F，Knippers R，et al.Hypophosphorylation of the architectural chromatin protein DEK in death-receptor-induced apoptosis revealed by the isotope coded protein label proteomic platform［J］.Proteomics，2006，6(21):5758-5772.

［7］Carro MS，Spige FM，Quarto M，et al.DEK expression is controlled by E2F and deregulated in diverse tumor types［J］.Cell Cycle，2006，5(11):1202-1207.

［8］劉雙萍，金京春，韓艷，等.子宮頸病變中DEK和Ki-67蛋白過表達及其意義［J］.臨床與實驗病理學雜志，2010，26(2):187-190.