淺談生化儀的應用

賀旭東(遼寧省 中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科 110032)

目前，隨著全自動生化分析儀的應用的普及，對全自動生化儀器的應用越來越顯得重要，一般情況下，廠家在裝機后只進行簡單的應用培訓，或者，有時有些功能即使廠家在培訓時已經(jīng)講解了，但，我們的工作人員很難在極短的時間內把廠家工程師所講解的大量的學習內容完全的吸收、消化、理解、并應用。一般情況下只能掌握比較重要的基礎操作和一般的儀器的日常保養(yǎng);并且有時有些功能廠家工程師因為時間關系或某些特殊原因，只能做演示性的講解。同時，當儀器的數(shù)據(jù)達不到某種量時，無法真正展示某些功能，這就要求我們的工作人員在廠家工程師培訓結束后，能夠詳細的看廠家配給的儀器說明書，把一些功能開發(fā)、完善起來。但，看說明書就像看教科書一樣，有時沒有一本好的輔導書，教科書上的某些問題很難理解，很多情況下，很多人因此無法把說明書通讀，有時即使通讀了廠家的說明書，但對于書中所說的某些關鍵的技術問題卻無法理解，更不用說融會貫通，以及應用了。因為說明書就像教科書一樣，不可能編寫成讀書筆記的樣式，所以，對于生化儀器的操作，很多檢驗科的工作人員一直希望拿到一本類似讀書筆記一樣的操作詳解，就好像一個自學的人希望能拿到一本同期某名校的尖子生的課堂筆記一樣，特別是對那些在儀器裝機時，不在生化室工作，但因檢驗科工作是輪轉的，幾年后輪轉到生化室工作的老師，尤其更加顯得重要，因為，說明書寫的太生硬，SOP文件又寫的太簡單;而在輪組工作交接班時，一般情況下，老人帶新人時，一般只能把儀器的基本操作介紹給新人，所介紹的內容一般情況下僅限于最基本的操作，有時，某些醫(yī)院會找儀器廠家派工程師再次培訓儀器的操作及保養(yǎng)。但更多的時候是僅僅老帶新僅僅會操作能進行檢驗標本發(fā)報告，關于儀器的保養(yǎng)一般情況下是經(jīng)過幾次換班后保養(yǎng)基本不做了，更不用說儀器的各種獨特的功能的開發(fā)利用，以及儀器故障的處理了，目前我們職稱晉級考的是理論知識，要得是論文的數(shù)量及級別;沒人會考你儀器的操作，保養(yǎng)，故障的排除，結果的分析(儀器或試劑原因導致的非正常結果)。甚至有人說，生化只要定標通過了，質控合格了就可以發(fā)報告了。其實，這只說對了一部分，因為定標通過、質控合格僅是發(fā)報告的必要條件，而不是充分條件。在臨床工作中我們經(jīng)常會遇到因為試劑交叉污染，儀器故障等導致結果無法正確發(fā)出。這就要求我們的工作人員，能夠正確選擇試劑，熟悉機器的性能，清楚儀器的正常工作狀態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)不正常的儀器狀態(tài)，避免不正確的結果的錯誤的發(fā)出，誤導臨床。

本人結合自己十多年的生化工作經(jīng)驗，總結了OLYMPUSAU全自動生化儀的一些操作，保養(yǎng)，以及一些故障的處理，在這里介紹給那些初學者，同時也希望有高水平的老師批評指正。

本文以AU400為例，原因是AU400是OLYMPUS最小的機型(恒速400TEST/小時)，它面對的是基層醫(yī)療單位，數(shù)量多，而AU640與AU400相差非常小，AU2700和AU5400雖與AU400差的大一點，但大體相同，并且應用 AU2700和 AU5400的用戶一般是大型醫(yī)院，均有高水平的老師在操作儀器。

儀器安裝好后，首先要對空機進行參數(shù)設定(OLYMPUS機器試劑通道是全開放的，無論原廠試劑還是非原廠試劑均使用相同的通道，通常試劑廠家只要不是特小的，均會提供上機參數(shù)，我們只需如何把參數(shù)輸入儀器即可。

在介紹輸入?yún)?shù)之前，首先要把儀器的開機以及工作版面介紹一下。

1 開機

1.1 開機前準備工作

1.1.1 檢查水源

AU400生化儀器一般廠家安裝時均配有去離子水機，我們要看一下水機的貯水容器中是否有水，出水閥門是否打開。

1.1.2 檢查電源

一般情況下AU400安裝時會配備容量5KVA的不斷電不間斷電源(UPS)。

檢查UPS電源應該處在斷電保護(Inverter)及AC燈亮的工作狀態(tài)。

1.1.3 檢查清洗液量

檢查A、B清洗液桶內液面，如不足請加滿。一些新款的機器只有B清洗液桶。同時檢查W1位有否清洗液。

1.1.4 檢查樣品、試劑分配器及樣品針、試劑針、攪拌棒是否正常。

1.1.5 檢查樣品架收集槽內有無樣品架，如有樣品架請移空。

提示:儀器在收集槽內里端有一個傳感器，如果里端有架子，儀器會報收集槽內架子滿。經(jīng)常有的老師說，收集槽內只有一個架子，沒滿呀，怎么報滿呀?其實是因為僅有的一個架子正好在里端的傳感器位置上。

1.1.6 放試劑盤

請在開機前將放有試劑瓶的試劑盤放入相應的試劑倉中。如果開機后再放試劑盤，

將無法使用選擇性查試劑方式，僅可使用ALL(全查)。

1.2 開機

AU640有三種開機方式:總關機后開機、待機狀態(tài)下開機和自動開機。

1.2.1 總關機后開機總關機是指按“EM STOP”鍵關機后再開機。此狀態(tài)下開機需先按儀器右側的白色(RESET)鍵，按鍵后可聽見冰箱啟動聲音。

再按白鍵旁邊的綠色(ON)按鍵，儀器及計算機將啟動。

1.2.2 待機狀態(tài)下開機(絕大多數(shù)用戶采用此方式)

用END關機后保持冰箱繼續(xù)開啟為待機狀態(tài)。

此狀態(tài)下開機僅需要按“ON”按鍵，儀器及計算機將啟動。

1.2.3 自動開機

AU400可以在系統(tǒng)參數(shù)內或者在關機窗口內預先設定每天或第二天的自動開機時間。自動開機必須在待機狀態(tài)下才可以執(zhí)行。

在設定的時刻儀器及計算機將自動啟動。

1.2.4 儀器初始化

在任一種方式下開機啟動后，計算機屏幕出現(xiàn)＜Program download to the analyzer＞(程序下載)后將自動進入到AU400程序的＜Start Condition＞(起始菜單)。同時儀器將自動運行＜INITAL＞(初始化)程序使儀器各部分做復位動作后，儀器轉到＜WARM UP＞(預熱)狀態(tài)。

1.2.5 強制結束預熱狀態(tài)

因某種原因操作者需要盡快開始工作，可以執(zhí)行菜單(A)—(B)Standby Set

操作，使儀器馬上結束預熱并轉到＜STANDBY＞狀態(tài)。

1.3 起始條件設定

在任何一種開機方式下啟動后程序都會自動進到并停留在 ＜Start Condition＞(起始)

菜單。AU400的數(shù)據(jù)管理方式有歷史數(shù)據(jù)存儲功能的。它可以儲存90個工作表。

每次進入時，在Start Condition菜單的Data Index(數(shù)據(jù)索引)處默認最近一個工作表，如果我們不做選擇，直接按兩次F2，機器將認為你繼續(xù)使用目前的工作表，樣品號碼接在此時工作表的尾部。一般每天首次開機時選擇“1.Current Time”，將建立一個空的數(shù)據(jù)文件。鼠標點擊兩次“Exit”或按(F2)鍵，可以退出此菜單。進入主菜單屏幕。

退出起始菜單的同時，試劑盤將自動檢查試劑瓶位置。

1.2.6 24 小時連續(xù)開機

如果儀器用在24小時連續(xù)工作方式，建議用戶在每天的第一次測定開始前，從主菜單進入＜Start Condition＞(起始)菜單，將Data Index(數(shù)據(jù)索引)設置為當天的日期索引。同時“Serum Start No”(起始樣品號)復位到0001號。開機過程結束。

2 主屏幕顯示及系統(tǒng)狀態(tài)圖標的功能介紹

2.1 如何觀察屏幕顯示–主屏幕顯示名稱

下圖顯示屏幕上的基本顯示模型

2.1.1 狀態(tài)顯示

用狀態(tài)名稱顯示系統(tǒng)操作狀態(tài)。STANDBY是待機狀態(tài)，WARM UP是溫度上升狀態(tài)，前面已經(jīng)介紹了如何強轉到待機狀態(tài)。MEAS1是連續(xù)測定狀態(tài)，指樣品是處于連續(xù)測定狀態(tài);MEAS2是指沒有新的樣品架了，可以按F9開始新的標本號測定了，MEAS3指所有標本均已經(jīng)加樣結束，如果有新標本可以按F9進行新的標本測定了，MEAS4是指機器已經(jīng)進入清洗狀態(tài)，本批結果均已經(jīng)報出，STOP是停止，可用F12功能鍵在STANDBY和STOP之間切換，如果STOP不能切換到STANDBY，機器會有相應的報警信息。

2.1.2 系統(tǒng)日期和時間顯示系統(tǒng)內置日期和時間。

2.1.3 菜單條

顯示屏幕操作的6個菜單項目:［Routine］，［Parameters］，［Auxiliary］，［Maintenance］，［User］，和［Logout］。每個菜單的前面的小括號內的字母是快捷命令，工程師電話指導時經(jīng)常用到，我們學習記筆記時也非常方便。［User］裝機時是空的，是后建立的用戶菜單，(P)—(S)—(U)中進行設定。

2.1.4 下拉菜單

如果選擇菜單項目的一條，將顯示下拉菜單。每個下拉菜單的前面的小括號內的字母也是快捷命令

2.1.5 子菜單

有些下拉菜單內的菜單包括進一步的多種功能，如果選擇下拉菜單內的菜單項目，將出現(xiàn)子菜單。

2.1.6 指南信息顯示區(qū)顯示主要操作的說明。

2.1.7 報警信息顯示區(qū)顯示發(fā)生錯誤或系統(tǒng)改變操作狀態(tài)的信息。

2.2 系統(tǒng)狀態(tài)圖標的功能介紹，按系統(tǒng)狀態(tài)鍵出現(xiàn)系統(tǒng)菜單。

2.2.1 菜單下方八個圖標分別代表F1―F8，F(xiàn)9－F12代表左上方四個圖標。

2.2.2 F9―開始測定，F(xiàn)10―試劑暫停，F(xiàn)11―樣本架暫停，F(xiàn)12―總停。

2.2.3 (0)Reagent Status－試劑管理 (1)ISE ―電解質(2)Data Display―實時數(shù)據(jù)顯示(3)Alarm List―報警表(4)Cuvette Status―比色杯檢查(5)Analyzer Status―分析儀狀態(tài)顯示(6)DPR Status―數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)狀態(tài)顯示 (7)STAT Table Status―急診臺狀態(tài)顯示。

2.2.4 F5 W1 Start―用水清洗比色杯(沖洗 1)。2.2.5F6 W2 Start―用酸或堿清洗比色杯(沖洗2)。(周保養(yǎng)項目)

2.2.6 F7Photocal Start―比色杯水空白測定。(周保養(yǎng)項目)

2.2.7 F8One Touch － 固定模式操作。

3 設定實驗參數(shù)(這里僅簡單介紹)

3.1 設置項目名稱:(P)—(Y)－(A)－F4–選位置–F5(Edit)－輸入名稱。

3.2 設置 ROUND(P)—(Y)—(C)—F4—F5選中所設項目。

3.3 設置試劑參數(shù)(P)—(I)—F4輸入試劑參數(shù):如樣品量，試劑量，波長，讀書點等。

3.4 設置校正參數(shù) (P)—(B)—(I)—F4分別設置:校正類型(AB或 MB)校正品位置(Cal.No.);濃度值 (CONC)

3.5 設置試劑位置 進入菜單“儀器狀態(tài)”－(0)－F6

4 查試劑量

4.1 看剩余量，進入“儀器狀態(tài)”，－(0)－F7按項目顯示(或F8按試劑位置顯示)，可以看到前一天剩余的試劑量。

4.2 加試劑將剛剛檢查不夠量的項目，添加足量。4.3查試劑加入新試劑，蓋好倉蓋后，按F5(Start Check)將彈出一個窗口，第一項是復位，最后一項是將所有試劑全查一遍。其他選項略。

5 編定標工作表

(U)－(C)－F4–選項目 －F4－F2

6 編工作表

進入菜單(U)－(N)－F4(Start Entry)開始編輯。用鼠標依次選擇要做的項目，全部選好后，按F4(Entry確認)，此時樣品號(S.No)處將自動加1，再重復上面的操作，編第二個標本的工作表…，直至所有的標本編完。(批量，組合錄入略)

7 放架(藍水標，黃標準，綠質控，白標本)

定標，質控如果不做可不放，直接放白架，架子條碼向前，從左開始依次放入進樣臺中。

8 開始工作

以上工作都準備好后，按F9(開始)選“YES”儀器將開始測量。

提示:此時可以修改開始號碼，我們輸入的號碼，儀器將認為是最左白架的第一孔位置上的標本號(即便此位空)，然后下一孔依次加1。

9 檢查結果

9.1 實時監(jiān)測結果

在＜System Status＞(儀器狀態(tài))點擊＜(2)Data Display＞彈出數(shù)據(jù)顯示屏幕。每一個樣品的項目全部測量完成后，在此屏幕將顯示該樣品的測量數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)后面會有一些結果標志，例如:HL#D等都有相應的含義，有的操作者不看這個版面直接把結果傳到中文報告機，就會漏掉很多有用的提示信息。導致一些不正確的結果無法及時發(fā)現(xiàn)。此處結果是實時結果，無存儲功能。

9.2 編輯測量結果

在(U)—(E)菜單內選擇相應的樣品號，按F5或點擊＜Data Display＞，可顯示測量結果。

在此菜單下可以對測量結果進行編輯。被編輯過的數(shù)據(jù)后面會有一個“e”標記。

提示:在此版面下我們可以查到所檢測的標本是在具體哪個架第幾個孔上測定的(RACK NO項)，曾有工作人員把架前后順序放反，導致結果錯誤。

9.3 校正測量結果

如果一個項目的測量結果產(chǎn)生了“系統(tǒng)誤差”，可以在 (R)—(D)—(C)Data Correction數(shù)據(jù)修正菜單，用公式:Y=AX+B對結果進行批量校正。注意:對測量結果進行“編輯”或“校正”有可能引起數(shù)據(jù)輸出錯誤。因此必須在可靠質控結果對照下，對測量結果進行“編輯”或“校正”。

10 打印及傳輸結果

進入菜單(U)－(O)－輸入所需樣品號后按F5－YES可將數(shù)據(jù)傳輸?shù)街形挠嬎銠C中。

11 關機

11.1 待機關機

儀器在Standby或Stop狀態(tài)下按鍵盤的＜End＞鍵，將彈出“關機”窗口。在此窗口可以預制下次自動開機的時間。點擊“Yes”儀器將自動關閉ANL主機及 PC(DPR)機，儀器進入“待機關機”。在此狀態(tài)儀器試劑倉保持制冷(冰箱運轉)，試劑可以在試劑倉內不用取出。在此狀態(tài)ISE將自動做電極的定時沖洗。

11.2 總關機

在儀器轉為“待機關機”后，按ANL主機上的＜EM Stop＞鍵，將關閉試劑倉冰箱電源，使儀器完全關閉。在此狀態(tài)必須將試劑從試劑倉中取出保存。在此狀態(tài)ISE將停止做電極的定時沖洗，停機時間過長會對ISE電極有影響。

注:只有特殊情況下才總關機。

11.3 保養(yǎng)部分

11.3.1 每日維護，看樣品和試劑分配器及泵管有否滲漏，W1及主洗液量是否充足，針及攪拌棒是否有損壞。

11.3.2 每周維護，清洗樣品探針、試劑探針和攪拌棒(1)進行W2(自動沖洗比色杯、攪拌棒、試劑探針和廢液管路)將－60ml試劑瓶加滿清洗液放入在77號位上。(注:一星期用堿性，一星期用酸性)在STAT(急診臺)W2位置放一杯相同的清洗液。進入儀器狀態(tài)菜單、選擇F6(W2)可進入比色杯清洗程序。(2)進行光校正(PHOTOCAL)。

進入儀器狀態(tài)菜單、選擇F7(PHOTOCAL)可進入光度計校正。

提示:W2和PHOTOCAL做好后，要在儀器狀態(tài)菜單下進入(4)Cuvette Status，然后按 F5(CheckStart)和F6(Save)檢測和存儲光度計數(shù)據(jù)。

11.3.3 每月維護

(1)清洗樣品探針和試劑探針沖洗池和清洗攪拌棒沖洗池提示:由于日常工作時，洗針用的是純水，所以保養(yǎng)時，可以用清洗液手工清洗。

(2)清洗空氣過濾片，用清水洗去灰塵，晾干即可。如果空氣過濾片長時間不洗，很容易因散熱問題導致一些部件受損。

(3)清洗去離子水過濾片和樣品探針過濾片提示:如果過濾片過水少了，將直接導致交叉污染增大。

(4)每三個月清洗去離子水桶清洗沖洗管嘴，一定把內外全洗了，特別要注意自刷的連接管。

(5)每六個月，清洗比色杯和比色杯輪盤，比色清洗后要做光度計校正。

(6)更換光源燈 換燈泡時要關機，燈位置在樣品針和比色盤之間，一手掌大小的不規(guī)則的小蓋下，兩個接線不分正負極，松開固定燈的大螺絲扭，燈即可拿出，安裝時燈座上的開口對好定位楔，然后作W2和PHOTOCAL即可。

上面把基礎操作和基礎保養(yǎng)介紹了一下，下面介紹幾個應用:

(1)(R)－(R)實時反應曲線

觀察反應曲線可以解決很多問題，例如:燈泡要壞時的尖峰反應曲線，反應盤漏水時的拋物線反應曲線，變質試劑的反應曲線。定標報警時的原因分析。

(2)(R)－(C)－(T)定標監(jiān)測

進入后可以看到每個項目有個K值，這個值，如果試劑穩(wěn)定應該是基本在一個很小的范圍內變化，根據(jù)它的變化，可以幫助我們分析試劑，定標和質控及儀器問題。例如:當某個項目K值變化很大，我們一般考慮試劑和定標液問題，如果多個項目的K值有問題，我們一般考慮儀器的問題。

(3)(R)－(C)－(S)－F5和(R)－(D)－(W)－F6組合應用的后定標功能

前者可以手工修改定標曲線，后者可以把老的試驗結果按新的定標曲線重新?lián)Q算結果，大大方便臨床。因為以前我們都是先定標質控，質控合格后檢測數(shù)據(jù)，如果某項目失控，需要定標，又沒定標液了，我們只能等定標液到了，才能定標，檢測標本。而OLYMPUS獨特的后定標功能可以讓我們上午先檢測標本，下午標準液到后，定標出結果。如果定標液較長時間不能采購到，前者還可以把歷史的比較好的定標曲線拉回，供我們使用，當然使用此功能時一定要慎重。

(4)(A)－(C)相關分析，在對照兩組數(shù)據(jù)分析時，非常方便，例如:我們分析兩個廠家的同一項目時。

(5)(A)－(S)和(A)－(H)用于統(tǒng)計分析臨床結果的均值，分布等情況。例如二氧化碳均值一般應該在25左右，如果偏離很大，我們就應查找原因。

(6)(M)－(M)－(A)在這個版面下我們經(jīng)常應用的是，看針位是否正，攪拌棒是否直。

(7)(P)－(B)－(I)和(R)－(C)－(T)的聯(lián)合應用，前者可以設定試劑的K值范圍，某個試劑的K值一般穩(wěn)定在一定范圍，通過范圍的設定我們可以及時發(fā)現(xiàn)試劑是否變質，或儀器是否有故障，機器工作時的實際K值可以在后者中查到。以上，是本人的一點心得，供大家分享，同時也希望同行批評指正。