滑膜炎系列制劑的薄層色譜鑒別

趙艷普，李冬梅，馮 麗，趙振霞

(河北省藥品檢驗所，河北 石家莊 050011)

滑膜炎系列制劑包括滑膜炎顆粒、滑膜炎膠囊和滑膜炎片3個劑型。滑膜炎膠囊是在滑膜炎顆粒基礎(chǔ)上改劑型而來，滑膜炎片是由滑膜炎膠囊改劑型而來，三者處方相同，由夏枯草、女貞子、枸骨葉、黃芪等13味藥組成，制法也基本一致，但質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中檢測項目設(shè)置差異較大。滑膜炎顆粒只收載了女貞子、黃芪甲苷的薄層色譜(TLC)鑒別項[1]，滑膜炎膠囊檢測項目有女貞子、黃芪甲苷、夏枯草的薄層色譜鑒別、浸出物及原兒茶醛的高效液相色譜(HPLC)含量測定[2]。滑膜炎片目前有4個注冊生產(chǎn)企業(yè)，分別執(zhí)行各自的注冊標(biāo)準(zhǔn)，除均收載了浸出物及原兒茶醛的高效液相色譜含量測定外，鑒別項目設(shè)置各不相同，即使同一成分的鑒別檢測方法也不相同。筆者通過試驗研究，建立了適用于該系列品種的薄層色譜鑒別方法，采用同一供試品溶液，實現(xiàn)了對黃芪、豨薟草、川牛膝、枸骨葉的快速鑒別。

1 材料與試藥

滑膜炎顆粒、滑膜炎膠囊樣品(神威藥業(yè)〈張家口〉有限公司);滑膜炎片樣品(河南省洛正制藥廠，通化金愷威藥業(yè)有限公司、洛陽遠(yuǎn)洋生物制藥有限公司);黃芪甲苷對照品(批號為110781－200613)、奇壬醇對照品(批號為111726－200601)、川牛膝對照藥材(批號為121065－200503)均購自中國藥品生物制品檢定所;枸骨葉對照藥材(廠家提供的枸骨葉原料，經(jīng)我所中藥室鑒定為冬青科植物枸骨 Ilex cornuta Lindl.ex Paxt.的干燥葉);所用試劑均為分析純，水為去離子水。薄層板(硅膠G預(yù)制板，青島海洋化工廠分廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 黃芪

取片劑5片，除去薄膜衣，研細(xì);或取膠囊5粒的內(nèi)容物或顆粒12 g，研細(xì);片劑和膠囊劑加甲醇20 mL，顆粒劑加甲醇30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次15 mL，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20 mL，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取黃芪陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取對照品溶液、陰性對照品溶液和供試品溶液各10 μL，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點或熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾，見圖1－3。

圖1 滑膜炎顆粒黃芪薄層色譜圖

圖2 滑膜炎膠囊黃芪薄層色譜圖

圖3 滑膜炎片黃芪薄層色譜圖

2.2 豨薟草

取奇壬醇對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取豨薟草陰性樣品，按黃芪鑒別項下供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取黃芪鑒別項下的供試品溶液、陰性對照品溶液、對照品溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－丙酮－甲醇－甲酸－水(10∶10∶5∶1∶5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾，見圖4－6。

圖4 滑膜炎顆粒豨薟草薄層色譜圖

2.3 川牛膝

取川牛膝對照藥材0.5 g，加甲醇 5 mL，超聲處理 20 min，靜置，取上清液作為對照藥材溶液。再取川牛膝陰性樣品，按黃芪鑒別項下供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取黃芪鑒別項下的供試品溶液、陰性對照品溶液、對照藥材溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－三氯甲烷－丙酮(8∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾，見圖7－9。

圖6 滑膜炎片豨薟草薄層色譜圖

圖7 滑膜炎顆粒川牛膝薄層色譜圖

圖8 滑膜炎膠囊川牛膝薄層色譜圖

2.4 枸骨葉

圖9 滑膜炎片川牛膝薄層色譜圖

取枸骨葉對照藥材2 g，加水30 mL，煎煮 30 min，放冷，濾過，濾液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次15 mL，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20 mL，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為對照藥材溶液。再取枸骨葉陰性樣品，按黃芪鑒別項下供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取黃芪鑒別項下的供試品溶液、陰性對照品溶液、對照藥材溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－甲酸－水(30∶10∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點或熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾，見圖10－12。

圖10 滑膜炎顆粒枸骨葉薄層色譜圖

圖11 滑膜炎膠囊枸骨葉薄層色譜圖

圖12 滑膜炎片枸骨葉薄層色譜圖

3 討論

對系列品種制訂統(tǒng)一的檢測方法，有利于工藝控制及保證療效的一致性，可更科學(xué)有效地控制藥品質(zhì)量。制備同一供試品溶液同時用于4味藥的定性鑒別，有效提高檢測效率，更加經(jīng)濟(jì)、環(huán)保。曾采用不同品牌的薄層板進(jìn)行了耐用性考察，均得到滿意結(jié)果。

[1]WS3－B－3428－98，中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第十八冊)[S].

[2]WS－10619ZD－0619－2002，國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編·骨傷科分冊[S].