鹿角膠工藝和穩定性研究

閆 晗,劉 靜,趙 璨,鞏新玉,張艷偉,李 蕾

(1.駐馬店市食品藥品檢驗所,河南 駐馬店 463000;2.駐馬店市偉鑫藥業有限公司,河南 駐馬店 463000)

鹿角為鹿科動物馬鹿或梅花鹿已骨化的角或鋸茸后翌年春季脫落的角基,分別習稱“馬鹿角”、“梅花鹿角”、“鹿角脫盤”[1]。本次實驗所用鹿角為馬鹿角,無臭、味微咸。阿膠是將驢皮漂泡、去毛、切成小塊,再漂泡、分次水煎、濾過,合并濾液,用文火濃縮(加入適量的黃酒、冰糖和豆油)至稠膏狀,冷凝,切塊陰干[2-3]。鹿角膠、阿膠同屬膠劑,工藝相似,藥性相仿,所含組分相似。目前藥典標準中僅加入適量的黃酒、冰糖和豆油作為輔料。從歷史上、文獻上都有加阿膠的記載[4],不加阿膠,難以成型,影響醫療上的使用[5],而加少量阿膠,較易成型,藥性相仿且藥效穩定,不影響藥物療效。

本文通過采用確定的添加少量阿膠制備鹿角膠實驗工藝進行了連續多批次的實驗,對樣品進行了工藝參數研究和穩定性實驗。經過加速試驗和長期試驗考察,結果表明樣品性狀、水不溶物、含量測定和微生物限度均符合規定,表示所制備的鹿角膠比較穩定,質量合格。

1 實驗部分

1.1 實驗材料

試劑:硫酸鉀(天津永大化學試劑開發中心),硫酸銅(天津博迪化工有限公司),硫酸(開封芳晶化學試劑有限公司),硼酸(淮南化學試劑廠),甲基紅(上海遠航化學試劑廠),氫氧化鈉(天津市永大化學試劑開發中心),氯化鈉(天津市博迪化工有限公司),磷酸二氫鉀(廣東汕頭西隴化工廠),磷酸二氫鈉(上海市試劑一廠),溴甲酚綠(天津市化學試劑研究所),孟加拉紅(虎紅)瓊脂培養基(杭州市微生物試劑有限公司),營養瓊脂(杭州微生物試劑有限公司),蛋白胨(臺灣基隆化學試劑有限公司),麥康凱瓊脂(北京奧博星生物技術有限公司),4-甲基傘型酮葡糖苷酸培養基(北京三藥科技開發公司)。

對照品:甘氨酸(中國藥品生物制品檢定所);樣品:河南偉鑫藥業生產鹿角膠及試制添加阿膠樣品。

1.2 實驗設備

電子天平:上海菁海儀器有限公司 FA2004A型;調熱電熱套、電熱恒溫鼓風干燥箱電阻爐:北京中興偉業儀器有限公司ZDHW 型;萬用電子爐:北京永光明儀療儀器廠;電動離心機:江蘇金壇城西曉陽電子儀器廠800型;霉菌培養箱、生化培養箱、超凈工作臺:上海浦東榮豐科學儀器有限公司;不銹鋼手提式壓力滅菌鍋:寧波鎮海金鑫醫療器械有限公司。

1.3 實驗步驟

1.3.1 試驗工藝

鹿角鋸段,漂泡洗凈,分次水煎,濾過,合并濾液,靜置,濾取膠液,濃縮(可加適量黃酒、冰糖、豆油和阿膠)至稠膏狀,冷凝 ,切塊,晾干 ,即得。

1.3.2 具體實施步驟

漂泡:將稱好的鹿角段置于清水池中,每料一池,并懸掛狀態標記;加入飲用水,水面高出鹿角 5～10cm。春秋季浸泡2～3日,冬季浸泡3～5日。每日換水1～2次,將鹿角段中含有的血質洗凈,否則收膠時易產生沉淀,保持水清潔無臭味,直至鹿角段徹底浸透。鋸段:取出鹿角,用刀鏟除腐肉及毛;鋸成20～30cm的段。洗:將鹿角投入轉鼓中,沖洗3～4h,至水清潔無泥沙為止。第一次提取:加飲用水1200L,密封,打開蒸汽進汽閥加熱,使蒸球內壓力控制在0.15～0.20MPa,轉動蒸球使其溫度在105℃～115℃,保溫4h,將膠汁加壓經過濾器打入貯液罐。第二次提取:加飲用水1000L,密封,打開蒸汽進汽閥加熱,使球內壓力控制在0.15～0.20MPa,轉動蒸球使其溫度在105℃～115℃,保溫2h,將膠汁加壓經過濾器打入貯液罐。提沫:吸取儲液罐膠汁經200目篩過濾,轉入夾層鍋中;加熱至沸騰,保持表壓0.10～0.15MPa,繼續添加膠汁并不斷提出漂沫,每次提沫后加水約10kg,每1～1.5h提沫一次,至膠汁表面呈氣泡并有少量黃沫泛起,且膠汁呈清亮透明狀時結束提沫。將冰糖用1.5倍水溶化后過200目篩備用,可增加膠塊透明度和硬度,并有矯味作用;將大豆油過200目篩備用,可促進鍋內氣泡的逸散,起消泡作用,及后期便于切膠。依次加入上述備用大豆油、冰糖,攪拌使全部溶解。加入生產中傳遞的膠頭和阿膠,同時通入加熱蒸汽進行濃縮。保持微沸,濃縮至膠液量為原膠液量的1/2時,合并夾層鍋。將混合后的膠汁攪拌均勻,加熱至微沸,保持氣壓0.1MPa,繼續濃縮3～4h,鍋底產生大氣泡(發鍋)時,攪拌下將黃酒加入濃縮的膠液中,可促進濃縮過程中蛋白水解生成的大量胺類物質的揮散,起矯臭味作用,同時利于氣泡逸散。繼續濃縮至膠液中水分在 25.0%～28.5%之間(冬季偏向26.0%～28.5%,春、秋、夏季偏向25.0%～27.0%),用鏟挑起膠液呈片狀而不墜落,俗稱“掛鏟”時出膠汁。

2 結果與討論

2.1 鹿角膠提沫時間對水不溶物的影響

對試制樣品的不同提沫時間進行水不溶物項目檢測,結果見表1。

表1 樣品提沫時間對水不溶物的影響

總結:提沫15h以前水不溶物達不到內控標準要求,18h以后水不溶物趨于穩定,除增加能源和人力消耗外無實際意義。因此把鹿角膠提沫時間定為15.0～18.0h。

2.2 質量分析

(1)鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)含量測定結果比較:按照中國藥典進行檢驗,取我公司生產三批鹿角膠樣品與試制三批鹿角膠(含阿膠方)樣品,對上述試品進行含量測定,結果見表2。

表2 鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)含量測定結果比較

結論:在鹿角膠(加入阿膠方)中經檢驗三批試制樣品含量測定項均達到藥典標準和企業內控標準。

(2)鹿角膠與鹿角膠加阿膠方質量檢驗對照,見表3。

結論:鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)各項檢驗結果均符合《中國藥典》之規定。

表3 鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)質量檢驗對照

2.3 鹿角膠的穩定性研究

2.3.1 穩定性研究方法和考察項目

根據中國藥典2010年版附錄XIXC藥物穩定性試驗指導原則,對樣品進行加速試驗和長期試驗,以研究制劑穩定性,除衛生學檢查按照中國藥典2010年版附錄XⅢC微生物限度檢查法規定外,其余項目均按照藥物制劑穩定性試驗指導原則,對三批中試樣品(擬市銷售包裝)進行穩定性加速試驗和穩定性長期試驗?？疾祉椖?性狀(外觀和色澤)、含氮量、微生物限度、水不溶物。

2.3.2 加速試驗

取三批本品模擬市售包裝(試驗用包材質地、結構與擬上市藥品包裝質地、結構一致),置(40±2)℃,相對濕度(75%±5%)的條件下放置6個月。試驗期間分別于第1、2、3、6月末各取樣1次,進行相關項目的考察,結果見表4。

表4 鹿角膠加速試驗結果

結論:本品經(40±2)℃,相對濕度(75%±5%)的條件下考察6個月,在試驗用包裝下質量穩定,直接接觸藥品的內包材對藥品質量不造成影響,結果三批樣品各項指標均符合規定,表明本品質量比較穩定。因此將有效期暫定為3年。

2.3.3 長期試驗

取三批本品模擬市售包裝(試驗用包材質地、結構與擬上市藥品包裝質地、結構一致),置(25±2)℃,相對濕度(60%±5%)的條件下放置36個月。試驗期間分別于第0、3 、6 、9、12、18、24 、36 個月末各取樣1 次,進行相關項目的考察,結果見表5。

結論:本品經(25±2)℃,相對濕度(60%±5%)的條件下考察6個月,各項指標與0月比較,基本一致,直接接觸藥品的包裝材料對藥品質量穩定性無影響,表明本品質量比較穩定。因此將有效期定為3年。

3 結論

鹿角膠是以祖國醫學理論為依據,溫補肝腎,益精養血,用于血虛頭暈,腰膝酸冷,虛勞消瘦。鹿角膠原制法載于《中國藥典》2005年版一部,根據實驗研究和古典文獻,本文在原工藝中加入阿膠,不加阿膠難以成型,影響醫療上的使用,加少量阿膠,二者藥性相仿,不影響藥物療效。本文在鹿角膠中添加5%的阿膠作為輔料,不收入處方,收入制法項下。

表5 鹿角膠長期試驗結果

工藝上重點考察二次濃縮提沫工序,檢測水不溶物,將膠液提沫時間控制在16.5～19.5h,水不溶物即可達到內控標準,同時膠液水分控制在25.0%～28.5%,便于切膠。

含量測定:藥典標準要求鹿角膠含總氮(N)量不得少于10.0%,所用阿膠含總氮量不得少于13.0%,本制劑制定內控標準含氮(N)量不得少于11.0%。在試制三批樣品中,含量測定項均達到藥典標準和企業內控標準。

穩定性試驗:鹿角膠工藝中加入阿膠的樣品,經過6個月的加速試驗和36個月的長期穩定性試驗,鹿角膠的各項檢測均保持穩定,符合《中國藥典》標準要求。

總之,本試驗結果表明,鹿角膠工藝設計合理,制備方法簡便,制劑穩定性好。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:化學工業出版社,2005:225-226.

[2]明?李時珍.本草綱目[M].北京:人民衛生出版社,1982.

[3]明?李時珍,著.王育杰,整理.本草綱目[M].北京:人民衛生出版社,1999:2222.