不同劑量下黃連解毒湯中黃芩苷溶出率觀察研究

趙海峰 馬文龍 趙 錦 王陜西中醫學院(咸陽 712046)

近些年來,許多中草藥處方的劑量越來越大,尹利平[1]藥房調劑和煎藥工作多年發現,中草藥處方量越來越大,加大煎藥加水量,雖然提高了有效成分提取,但也增加了雜質的溶出,影響質量也給患者服用帶來困難,濃縮使有效成份流失,造成事與愿違的后果;張碧玉[2]從中藥處方中隨機抽取 1918張中藥處方,進行分析,認為中藥的超大劑量應用問題過去一直缺乏比較系統的研究,只是作為一種臨床現象長期存在;張福海,王景洋[3]抽取處方共計 19151張,發現單味藥的劑量偏大,大多數都超出了藥典規定的用量,近半數處方有藥味劑量偏大的現象,個別用量達到了藥典規定的 3～4倍;支持中藥超大劑量應用的主要依據仍然是古代及現代醫家的臨床用藥經驗,蘆柏震[4]認為中藥化學成分是中藥藥理效應的物質基礎,其化學成分在煎煮過程中,隨著內在的和外部的改變發生著一系列變化,各種化學成分的綜合作用直接影響藥物的效應。以“經方”作為切入點,研究中藥處方劑量大小必將具有重要意義,我們選擇以黃連解毒湯為切入點,以黃芩苷為指標,研究處方劑量大小對有效成分溶出率的影響。

1 儀器與試藥 高效液相色譜儀:DIONEX(戴安)P680 HPLC PUM P、UV D170U紫外檢測器、CHROMELEON(變色龍)軟件(美國戴安分析儀器有限公司);黃芩苷對照品(090226-200613)。甲醇、乙腈為色譜純,液相用水為超純水,其他試劑均為分析純。

2 方法與結果 2.1 黃連解毒湯中芍藥苷測定方法的建立

2.1.1 對照品溶液的制備:精密稱取黃芩苷 4.865mg,置 25mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成 0.1946mg/m L的對照品溶液,即得。

2.1.2 黃芩原藥材供試液制備 精密稱定黃芩中粉 0.3035g,加 70%乙醇 40mL,加熱回流 3h,放冷,濾過,濾液置 100mL量瓶中,用少量 70%乙醇分次洗滌容器和殘渣,洗液濾入同一量瓶中,加 70%乙醇至刻度,搖勻。精密量取 1mL,置 10mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,0.45um微孔濾膜過濾,即得[4],測得黃芩中每 g藥材含黃芩苷 84.1554mg。

2.1.3 樣品及溶液的制備:按黃連解毒湯處方量黃連、黃柏、黃芩、梔子 4種常用中藥按 9、6、6、9 g精密稱取,加水 250mL,浸泡 30min,煎煮 30min,濾液過濾,置250mL量瓶中,加水至刻度,搖勻;濾渣加水 200mL,煎煮 30min,過濾,濾液置 250mL量瓶中,加水至刻度,搖勻;精密量取 1mL濾液加甲醇稀釋至 25mL,過 0.45uL濾膜,備用。

2.1.4 黃連解毒湯中黃芩苷含量測定方法的建立。

2.1.5 測定方法確定:高效液相色譜法測定黃連解毒湯中黃芩苷含量,色譜條件:Kromasil C18色譜柱 5 μ m 150mm×4.6mm.(天津特納科學儀器有限公司),流動相:甲醇:水:磷酸(47:53:0.2)流速 1 mL/min,測定波長 280nm,進樣量 10uL。

2.1.6 方法學考察:黃芩苷在 0.1946～ 3.892ug之間峰面積與進樣量呈良好線性關系,計算得回歸方程Y=48174X-0.1729(R2=0.9999)。精密度、穩定性、加樣回收率實驗考查 RSD分別為 1.04%、1.3%、2.67%,平均回收率為 98.7%。

2.2 不同劑量下黃連解毒湯中黃芩苷溶出率測定

精密稱取原方處方量、原方(1.5、原方(2處方量的黃連解毒湯,按 2.1.3項下,制樣,測定黃芩苷含量,如表1。

表1 不同劑量下黃連解毒湯中黃芩苷溶出率測定

從上表可以看出黃連解毒湯劑量增加 50%倍,黃芩苷溶出量僅增加 12%,溶出率下降 20%,劑量增加100%,黃芩苷溶出量僅增加 28%,溶出率下降了30%。

2.3 不同劑量黃連解毒湯浸膏率測定 將不浸泡原方處方量、原方×1.5、原方×2處方量的兩次煎煮的濾液各精密量取 50m L,分別置入 6個已精密稱定的干燥蒸發皿中,干燥至恒重后,精密稱取此時六個蒸發皿的重量,并計算浸膏含量,如表 2。

表2 不同劑量黃連解毒湯浸膏率測定

從浸膏浸出率中可看出,隨劑量增加,浸膏的浸出量逐漸增加,浸出率微弱減小,但比例不大。

3 討 論 3.1 黃芩苷的溶出率隨劑量增加而減小 溶出量隨劑量增加而又較小的增加,表明了黃連解毒湯藥材的利用率隨劑量增加而減小,隨劑量增加藥材中有效成分的溶出僅僅有 50%左右,造成藥材的浪費嚴重。

3.2 與黃芩苷的溶出率相比,浸膏的溶出量隨劑量增加都比黃芩苷隨劑量增加而增加得快,溶出率減小的慢,表明隨劑量增加,藥液中的雜質也增加比有效成分增加得快。增加劑量則容易改變藥液成分比例,增加對人體的副作用,增加不良反應的可能性。

[1]尹利平.中草藥用量探討[J].山東醫藥工業,1999,18(2):24.

[2]張碧玉.中藥的劑量問題[J].海峽藥學,2010,22(2):148-149.

[3]張福海.綜合性醫院中草藥使用狀況分析[J].實用藥物與臨床,2010,13(6):444-445.

[4]蘆柏震.中藥處方藥味劑量大小探析[J].中華中醫藥學刊,2010,28(1):38-40.