三分群血細胞分析儀檢測后按復審標準進行血涂片復審的臨床意義

林芳輝，劉玲麗，梁 鋒

(海南省人民醫院醫學檢驗部，海南 海口 570311)

臨床實驗室工作之所以如此重要，其原因之一是由于所提供的檢驗信息占患者全部診斷、療效等醫療信息的60%以上，而血細胞分析則是每個患者必須檢測的常規組合，和其他常規一樣至今仍然是最經典、最直接、最有效、最經濟的初診或鑒別診斷項目，有時甚至是金標準。現在一般認為，血細胞分析儀能夠準確地進行細胞計數和成熟白細胞(WBC)分群，并提供了一系列紅細胞(RBC)和血小板(PLT)形態學新指標，因而自動化的RBC、WBC和PLT計數及成熟WBC分群檢測結果已被廣泛接受。但眾所周知，血細胞分析儀白細胞分類計數功能僅體現在血細胞形態和比率大致正常的情況下，其結果可作為臨床參考，然而當存在形態異常的細胞時，如嚴重感染、白血病及某些遺傳病的各類白細胞變化以及各類貧血的紅細胞變化，儀器非但不能報告這些具有臨床意義的細胞還會影響其他系列細胞的檢查。所以此時我們必須進行涂片復檢。而要涂片復審必須制定嚴格的復審標準，國際上非常重視[1-3]復檢工作，2005年國際血液學復檢專家組經詳細分析后，提出了41條指導性自動血細胞分析和分類復審標準[1]。由于三分群血細胞分析儀在中國具有一定的普遍性，且考慮到該儀器的白細胞、紅細胞、血小板檢測通道的特性和性能，需要制定嚴格的復審標準，才能使結果更加可靠。海南省人民醫院秀英門診用的是三分群血細胞分析儀，因此根據我院門診的實際情況和參考有關文獻制定了初步復審標準和制度。現將我院近半年的血常規標本按制定的復審標準進行復檢的情況進行歸納分析，總結如下：

1 資料與方法

1.1 材料儀器與試劑 Sysmex公司提供的KX-21三分群血細胞分析儀及其配套試劑和校準物。Olympus雙筒顯微鏡用于血涂片顯微鏡檢查。瑞氏-姬姆薩染液染色。

1.2 標本來源 2010年1～5月本院秀英門診就診的患者血液標本共21 528份。采用EDTA-K2抗凝管采集標本，采血后2 h內完成檢測。

1.3 方法 儀器每日均用全血質控物進行嚴格的室內質量控制。工作人員根據《全國臨床檢驗操作規程》[4]制定的血涂片檢測操作程序制片和閱片。參照文獻[1，5-7]并結合本院門診實際工作制定復審標，見表1。

1.4 鏡檢陽性判斷標準[4](1)RBC明顯大小不等，中空淡染(指1/2淡染區的紅細胞)多于30%；且只要發現瘧原蟲均認為是紅細胞有陽性形態學改變；(2)巨大PLT＞15%；(3)見到PLT聚集；(4)存在Dohle小體的細胞＞10%；(5)中毒顆粒中性粒細胞＞10%；(6)空泡變性粒細胞＞10%；(7)原始細胞≥1%；(8)早幼/中幼粒細胞≥1%；(8)晚幼粒細胞＞2%；(9)桿狀核粒細胞＞5%；(10)異常淋巴細胞＞5%；(11)嗜酸粒細胞＞5%；(12)嗜堿粒細胞＞1%；(13)有核紅細胞(NRBC)＞1%；(14)槳細胞＞1%；(15)單核細胞＞10%。

表1 根據實際工作情況制定的三分群儀器的篩選規則

2 結 果

21 528份標本的儀器檢測結果中有6 579份符合復審標準，占30.6%，其中符合陽性標準的有1 905份，陽性率為29.0%，復審陽性原因見表2。對1 905份陽性患者臨床病歷進行追蹤查詢，統計到被診斷為血液糸統疾病的有129例，疾病類型分析見表3。

表2 1 905例復審陽性原因

表3 129例血液系統疾病類型

3 討 論

KX-21是一種三分類血細胞分析，與其他同類儀器一樣，其細胞計數原理是電阻抗法，根據各種細胞產生脈沖大小、多少分別進行計數及分類。由于儀器本身固有的局限性，雖然觀察直方圖和警示可以大致了解各類細胞的分布情況或可能存在某種異常細胞，但無法確定該類細胞的具體結構和形態以及存在的具體數量，而這些信息對臨床診治患者又有很大的幫助，有的甚至是確診某種疾病的唯一依據(如瘧原蟲)。因此按復審標準進行血涂片檢查，方能對異常細胞進行定性和定量。血涂片顯微鏡復檢不僅能補充儀器形態鑒別能力的不足，而且足以直觀地評估和驗證血細胞分析儀所報告結果的可行性。

表2可提供臨床醫生許多非常有價值的信息，桿狀核比例可判斷感染輕重；幼稚細胞可考慮血液疾病；嗜酸粒細胞過敏、寄生蟲、哮喘或惡性疾病等；異型淋巴細胞說明可能有病毒感染，超10%可能為EB病毒感染(傳單)；同樣RBC形態對貧血鑒別診斷有重要意義。因我們是地方綜合性大醫院，重癥患者相對集中，所以形態學可進一步防止漏檢或錯檢。

因三分群血細胞分析儀的局限性，一些重要參數常出現儀器法假性增高或降低，例如有核RBC導致的WBC假性增高，小RBC導致的PLT假性增高[8]，PLT聚集導致的假性降低，通過血涂片我們可進行正確評估并進行手工糾正。對復檢陽性標本1 905例門診患者進行病歷追蹤查詢臨床病歷，統計到被診斷為血液糸統疾病的有129例，其疾病類型分析見表3，這些門診患者不少還是門診初診才發現的疾病。可見重視血涂片鏡檢能為臨床血液病的早期發現和治療提供非常有價值的依據。

由此可見，血細胞分析儀檢測后有一套復審標準進行血涂片復審是我們檢驗質量的保證。但必須注意的是，即便我們制定了嚴格的復審標準，仍有可能存在個別病例漏檢的可能，并且我們這套標準還沒經過系統的驗證，還未知假陰性率是否低于5%，因此為了能夠進一步保證血細胞分析檢測報告的準確性，提高血液分析檢驗工作質量，我們仍有許多工作需要做。

[1]從玉隆,彭 明.全國血液學復檢專家小組工作會議記要暨血細胞自動計數復檢標準釋義[J]中華檢驗醫學雜志,2007,30(4)：380-382.

[2]叢玉隆,王昌富,樂家新.血細胞自動化分析后血涂片復審標準制定的原則與步驟[J].中華檢驗醫學雜志,2008,31(7)：729-732.

[3]盧興國,叢玉隆.應重視和提升傳統血液形態學檢驗水平[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(6)：481-482.

[4]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社,1997：10.

[5]孫 芾,王厚芳,于俊峰,等.血細胞顯微鏡復檢標準的制定及臨床應用[J].中華檢驗醫學雜志,2005,28(2)：155-157.

[6]XE-2100血細胞分析復檢標準制定協作組.SysmexXE-2100自動血細胞分析和白細胞分類的復檢規則探討[J].中華檢驗醫學雜志,2008,31(7)：752-757.

[7]崔 巍譯.全自動血液分析儀的復檢標準[J].中華檢驗醫學雜志,2007,30(4)：371-373.

[8]鐘素萍、馬粵建.Sysmex KX-21型血細胞分析儀計數血小板的影響因素的探討[J].海南醫學,2007,18(8)：132-133.