潘 婉,高 飛,陳曉丹
(海南醫學院附屬醫院檢驗科,海南 海口 570102)
隨著各種類型的全自動血液分析儀在臨床檢驗中的廣泛應用,血液常規檢驗的工作效率和質量都有了較大的提高。近年本院引進的ADVIA 2120全自動血液分析儀(以下簡稱ADVIA2120)是繼BayerH*3和ADVIA120之后的目前較高檔次的聯合檢測型血液分析儀,其檢測速度快,提供參數多,重復性好,準確性高[1]。為了了解其對異型淋巴細胞報警提示的可信性,我們對有異型淋巴細胞報警提示的標本139例及無異型淋巴細胞報警提示的標本195例同時進行手工顯微鏡檢,對檢查結果做分析與比較,現報道如下:
1.1 儀器和試劑 德國拜耳公司生產的ADVIA 2120全自動血液分析儀,日本歐林巴斯光學株式會社生產的顯微鏡CX-21,所用試劑均為原裝配套,質控物由美國伯樂公司提供,儀器用專門的校準品校準。瑞氏-姬姆薩染液按標準操作規程自行配置。
1.2 標本來源 收集2010年2月至2010年4月海南醫學院附屬醫院各科臨床住院病人EDTA-K2抗凝靜脈血,有異型淋巴細胞報警提示的139例及無異型淋巴細胞報警提示的195例。
1.3 方法 ADVIA2120各項參數均經校準,每天用質控物進行室內質控。患者靜脈采血1.0~2.0 ml,立即輕輕加到含有EDTA-K2的抗凝管中,迅速混勻,標本采集后4 h內按ADVIA 2120的儀器操作規程進行測試。然后將ADVIA 2120異型淋巴細胞檢測結果與顯微鏡檢測結果比較。對有異型淋巴細胞報警提示的標本,同時用顯微鏡目測法檢測。另設置對照組,即無異型淋巴細胞報警提示的標本,也推片染色進行顯微鏡目測。手工顯微鏡檢測按《全國臨床檢驗操作規程》[2]進行,對儀器法提示有異型淋巴細胞報警的標本做血涂片瑞特-姬姆薩染色,用顯微鏡目測法復檢。儀器提示有異型淋巴細胞且鏡檢證實者為“真陽性”,儀器提示有異型淋巴細胞而鏡檢未檢出者為“假陽性”,儀器無異型淋巴細胞提示而鏡檢檢出者為“假陰性”,儀器無異型淋巴細胞提示而鏡檢未檢出者為“真陰性”。其中敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%;特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%;陽性預測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%;陰性預測值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%。
1.4 統計學處理 采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。
334例標本儀器檢測與顯微鏡目測結果比較見表1。本組病例ADVIA2120異型淋巴細胞報警提示的敏感性為86.1%,特異性為81.7%,陽性預測值為71.2%,陰性預測值為91.8%。兩法比較,差異有統計學意義(χ2=10.28,P < 0.05)。

表1 ADVIA2120檢測和顯微鏡目測結果比較(例)
ADVIA 2120全自動血液分析儀是德國Bayer公司最新推出的全自動多參數血液分析儀,測試速度快,每小時可檢測120個標本,它采用先進的鞘流技術、激光散射技術和細胞化學染色技術對全血細胞進行分析。該儀器可用于血液樣本和生物體液的檢測,兩者具有同等的臨床應用性能[3]。在白細胞分類計數方面,該儀器通過過氧化物酶和嗜堿/核分葉兩個通道進行白細胞分類計數,并具有報警提示異常白細胞的功能。
儀器的設計原理保證了儀器檢測結果的敏感性和穩定性[4],用血液分析儀進行全血細胞分析,總希望有較高的檢測靈敏度以避免漏檢,但這勢必會帶入假陽性。本實驗對ADVIA 2120有異型淋巴細胞報警提示的139例標本進行分析,結果顯示異型淋巴細胞報警提示的敏感性為86.1%,特異性為82.0%,陽性預測值為71.2%,陰性預測值為91.8%,與人工顯微鏡檢有顯著性差異。99例為真陽性,其中17例為腫瘤放化療后患者,4例為新生兒患者,3例為白血病患者,3例為肺炎患者,1例為傳染性單核細胞增多癥患者,1例為感染患者,1例為消化道疾病患者,1例為帶狀皰疹患者。將195例未出現異型淋巴細胞報警提示的標本也進行顯微鏡檢,16例為假陰性,其中9例為腫瘤放化療后患者,4例為感染患者,1例為消化道疾病患者,1例為腎病患者,1例為新生兒患者。
通常認為異型淋巴細胞是EBV病毒感染所引起的單核—巨噬系統的異常增生,EBV與B淋巴細胞受體結合,在不斷增殖與復制過程中,被T淋巴細胞識別,激發抑制性T細胞(Ts/c)增殖并自身發生轉化,形成細胞毒性效應,這種受刺激后異常增殖的T細胞和少量B細胞出現在外周血中便形成異型淋巴細胞。根據形態特征將其分為三型:Ⅰ型(空泡型),胞體比正常淋巴細胞稍大,多為圓形或橢圓形,核常偏位,染色質粗糙呈網狀或小塊狀,排列不規則,胞漿量豐富,深藍或灰藍色,有空泡;Ⅱ型(不規則型),胞體較大,外形常不規則,可有多數偽足,核圓或橢圓,著色較淺,胞漿量豐富,淺藍色或灰藍色,有透明感,邊緣著色深藍,一般無空泡,可有少數嗜天青顆粒;Ⅲ型(幼稚型),胞體較大,外形常不規則,核圓或橢圓,染色質呈網狀排列,可見1~2個核仁,胞漿深藍色,可有少數空泡。普遍認為EB病毒感染者血液中會出現大量的異型淋巴細胞,是傳染性單核細胞增多癥的特殊實驗室檢查特點。臨床發現異型淋巴細胞可在其他病原性病毒感染中出現,異型淋巴細胞的增多與多種病毒的感染及變態反應有關[5],并且異型淋巴細胞的百分率也會高于10%以上。
ADVIA 2120對全血細胞進行分析,不是由細胞核、細胞漿、細胞膜結構的整體差異來鑒別細胞,因此不可避免存在干擾因素,而產生一定的誤差。單核細胞和大淋巴細胞在體積、顆粒及染色質形態上均與異型淋巴細胞有一定的相似性,以及未溶解完全而腫脹的紅細胞的干擾使儀器對異型淋巴細胞報警提示的假陽性率高。另外由于細胞的病理或藥物作用,使細胞的大小、形態及內容物發生改變,其產生的散射光信號發生不規則的變化使儀器無法正確識別而報警。人工分類則可以通過顯微鏡根據細胞核、細胞漿、顆粒、核染色質等特征對異型淋巴細胞進行分析,鏡檢的準確性與檢驗者的經驗、對細胞的認知程度、血涂片的制作質量、計數部位、分類細胞數多少等有關。因為存在人為判斷的可能性和儀器原理的缺陷性,我們對有異常提示的標本,仍應按照操作規程認真進行顯微鏡目測復核以免漏診及誤診,確保血液分析結果的準確性和權威性,滿足臨床的需要,這也是循證醫學檢驗的要求,使檢驗的每一項參數體現臨床價值。
綜上所述,ADVIA2120全自動血液分析儀異型淋巴細胞報警提示具有一定的可信性,陽性預測值高,但其假陽性率也較高(28.8%),是一種對大批量全血標本進行血細胞計數與分類快速而有效篩檢的血液分析儀。因此對異型淋巴細胞報警提示可作為一個有效的過篩工具,還不能完全替代顯微鏡檢測,只有將兩者相互結合,才能保證結果的準確性、報告的可靠性,進而將血液學檢驗技術提高到一個新的水平。
[1]吳新忠,龐 鑫,羅福東,等.Bayer ADVIA 2120全自動血細胞分析儀的性能評價[J].現代醫學儀器與應用,2007,19(6):62-64.
[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:123-124.
[3]Harris N,Jou J M,Devoto G,et al.Performance evaluationof the ADVIA 2120 hematology analyzer:an international multicenter clinical trial[J].LabHematol,2005,11(1):62-70.
[4]叢玉隆,樂家新.現代血細胞分析技術與臨床[M].北京:人民軍醫出版社,2005:181-200.
[5]陳偉雄.外周血異型淋巴細胞增高細胞免疫變化的探討[J].臨床和實驗醫學雜志,2007,6(4):90-91.